糖链抗原CA 72-4标准操作程序SOP文件.docx

《糖链抗原CA 72-4标准操作程序SOP文件.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《糖链抗原CA 72-4标准操作程序SOP文件.docx（4页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-08CA 72-4版序：ABCD页码：第1页，共4页概述：是1981年美国Colcher等人用乳腺癌肝转移的癌细胞膜成份免疫小鼠，所得IgG型单克隆抗体B72.3所识别的肿瘤相关糖蛋白抗原，称为TAG-72（Tumor AssociatedGlycoprotein,肿瘤相关糖蛋白）。它是胃肠道和卵巢癌的肿瘤标志物。CA 72-4MW1000KDo临床应用：恶性肿瘤研究表明，80%以上的人体腺癌可在其细胞膜上检出CA 72-4,而非上皮性的恶性肿瘤及良性增殖性病变均无该抗原表达。因此，它与一些在正常组织有表达的一些糖类抗原，如CA125,CA19-

2、9等相比,特异性更强；1）恶性肿瘤时增高，阳性率分别为：胃肠道癌40%,肺癌36%,卵巢癌24%；CA72-4的检测与CEA具有互补作用；2）对原发性乳癌、胃癌、直结肠癌以及卵巢癌患者血浆CA72-4清除连续检测表明,CA72-4在检测残余肿瘤时很有作用；3） CA72-4与CA125联合检测，作为诊断原发性及复发性卵巢肿瘤的标志：两者均阳性时特异性为100%,两者均阴性时，说明无残余肿瘤；4）与CA19-9联合应用于胃癌的检测。CA72-4, CA19-9的阳性率分别为42%47%和46%,而联合检测时阳性率可达63%。5）胃癌术后监测CA72-4水平还有助于早期发现胃癌复发；其他疾病据报道

3、，正常人健康和良性胃肠道疾病的阳性率分别为3.5%和6.7%原理：采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。 第1步：标本、生物素化的抗CA724单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗CA724单抗混匀，形成夹心复合物。 第嬴：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02

4、-08CA 72-4版序：ABCD页码：第2页，共4页试剂：M：链霉亲和素包被的微粒(透明瓶盖)，1瓶，6. 5mlo含防腐剂。R1：生物素化的抗CA724单克隆抗体(灰盖)，1瓶，10ml。含防腐剂。R2： Ru(bpy)32 +标记的抗CA724单克隆抗体(黑盖)，1瓶，10血。含防腐剂。储存和稳定性：存放在2-8度，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度，12周；放在Elecsys2010, 8周；(室温20 25度；开盖时间累计不超过20小时)。标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。(不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆

5、。确保标本不被肝素污染。)标本在28度可稳定24小时，-20度可稳定12个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。检测步骤：提供的材料：货号：100人份的Elecsys CA724试剂盒包含： M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素化的抗CA724抗体 R2三联毗咤钉标记的抗CA724抗体需要的材料(未提供,： ElecsysCA724定标液(CalSet) ElecsysCA724质控品(PreciControl Cardiac) Elecsys通用稀释液 Elecsys2

6、010 分析仪 Elecsys系统缓冲液(ProCell) Elecsys 测量池清洗液(CleanCell) Elecsys 添加剂液(SysWash) Elecsys 系统清洗液支架(Adapter for SysClean) Elecsys 2010反应杯(Assay Cup) Elecsys 2010 吸样头(Assay Tip)ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-08CA 72-4版序：ABCD页码：第3页，共4页方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入如果特殊情况下仪器无法阅读条阅读条形码

7、，可以手工输入15位数字。将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。定标：每批CA724试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CalSet定标液定标。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒） 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。质控：ElecsysCA724质控品（PreciControlCardiac） 1和2或其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各

8、实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。计算：对每一个标本，仪器会自动计算结果，单位是ng/ml或mg/L。干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素27mgdl）、溶血（血红蛋白1. lgdl）、脂血（脂质1500mgdl）和生物素50ngml干扰。接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（2000Uml） o 50种常用药物经试验对本测定无干扰作用。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。CA724测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。检测范围：稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。ABCD医院文件编号：ABCD-02-08免疫实验室CA 72-4版序：ABCD页码：第4页，共4页 正常参考范围（Roche Elecsys系统）9.8Uml建议各实验室建议自己的正常参考范围