糖链抗原CA 19-9标准操作程序SOP文件.docx

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1、ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-07CA 19-9版序：ABCD页码：第1页，共4页概述：CA19-9(carbohydrate antigen 19-9)是一种粘蛋白型的糖类蛋白肿瘤标志物，为细胞膜上的糖脂质，因由鼠单克隆抗体116NSI99识别而命名。是迄今报道的对胰腺癌敏感性最高的标志物。在血清中它以唾液粘蛋白形式存在，分布于正常胎儿胰腺、胆囊、肝、肠和正常成年人胰腺、胆管上皮等处。是存在于血液循环的胃肠道肿瘤相关抗原。临床应用：消化道恶性肿瘤胰腺癌、肝胆系癌、胃癌、结直肠癌的CA19-9水平分别是正常均值的683、535、279、115倍。而阳性率以胰腺癌为最高，故CA

2、19-9是胰腺癌较好的标志；胰腺癌诊断中的应用:1)2)3)4)5)大部分胰腺癌患者血清CA19-9水平明显增高。如果以正常参考范围上限(37 U / mL)为诊断标准，敏感性和特异性均可达90%以上；CA19-9水平与肿瘤的阶段有关，血清中含量的高低提示手术的难易程度；术前CA19-9水平对预后有一定提示作用，低者预后较好；术后CA19-9水平降至正常者生存期长于未下降者；肿瘤复发时，CA19-9可再度升高，并且发生于影像学诊断之前。因此可用作监测肿瘤的复发。其他恶性肿瘤卵巢癌、淋巴瘤、胃癌、肝癌、食管癌、乳腺癌的阳性率较低。应用如下：1)胃癌的阳性率约为25%-60%,且与肿瘤分期有关。对

3、于胃癌患者，同时检测CEA可提高阳性率；2)直肠、结肠癌患者，阳性率为18%-58%,与肿瘤分期有关。同时测定CEA可提高敏感度，如果治疗有效，CA19-9下降速度较CEA快；3)胆囊癌、胆管癌、胆道癌的CA19-9阳性率较高，可用于区别胰腺癌、胆管癌合并的黄疸与阻塞性黄疸。后者的CA199水平较低。使用原则:CA19-9与AFP、CEA联合检查,有助于提高胃肠道肿瘤的诊断效率ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-07CA 19-9版序：ABCD页码：第2页，共4页非肿瘤性疾病低浓度增高、一过性增高可见于慢性胰腺炎、胆石症、肝硬化、肾功能不全、糖尿病等。原理：采用双抗体夹心法，整个过

4、程18分钟完成。 第1步：标本、生物素化的抗CA199单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗CA199单抗混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。试剂：M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6. 5mlo含防腐剂。R1：生物素化的抗CA199单克隆抗体（灰盖），1瓶，10m

5、l。含防腐剂。R2： Ru（bpy）32 +标记的抗CA199单克隆抗体（黑盖），1瓶，10血。含防腐剂。储存和稳定性：存放在2-8度，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度，12周；放在Elecsys2010, 8周；（室温20 25度；开盖时间累计不超过20小时）。标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。（不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆。确保标本不被肝素污染。）标本在28度可稳定24小时，-20度可稳定12个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温

6、平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。检测步骤：提供的材料：ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-07CA 19-9版序：ABCD页码：第3页，共4页货号：100人份的Elecsys CA199试剂盒包含： M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素化的抗CA199抗体 R2三联毗陡行标记的抗CA199抗体需要的材料(未提供)： ElecsysCA199定标液(CalSet) ElecsysCA199质控品(PreciControl Cardiac) Elecsys通用稀释液 Elecsys2010 分析仪 Elecsys系统缓冲液(ProCell) Elecsys 测量池清洗液

7、(CleanCell) Elecsys 添加剂液(SysWash) Elecsys 系统清洗液支架(Adapter for SysClean) Elecsys 2010反应杯(Assay Cup) Elecsys 2010吸样头(Assay Tip)方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入如果特殊情况下仪器无法阅读条阅读条形码，可以手工输入15位数字。将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。定标：每批CA199试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊

8、信息。应用CalSet定标液定标。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂(试剂经仪器注册24小时以内)标定一次，如再次标定即根据下列要求： 一个月(同一批号试剂) 7天(放置仪器上的同一试剂盒) 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。质控：ElecsysCA199质控品(PreciControlCardiac) 1和2或其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外,应采取校正措施。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-07版序：ABCDCA 19-9页码：第4页，共4页计算

9、：对每一个标本，仪器会自动计算结果，单位是ng/ml或mg/L。干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素27mgdl）、溶血（血红蛋白Llgdl）、脂血（脂质1500mgdl）和生物素50ngml干扰。接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（2000Uml） o 50种常用药物经试验对本测定无干扰作用。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。CA199测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。检测范围：稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。 正常参考范围（Roche Elecsys系统）： 37 U / mL建议各实验室建立自己的正常参考范围