肌钙蛋白T标准操作程序SOP文件.docx

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1、ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-21肌钙蛋白T版序：ABCD页码：第1页，共3页用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的肌钙蛋白T含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。概述：心肌来源的肌钙蛋白T （cTnT,分子量39.7kD）是心肌损伤特异的、灵敏的标志。在急性心肌梗死（AMI）发病后34小时，血清cTnT含量升高，并可持续14天之久。检测血清cTnT对心肌缺血性损伤，如AMI和心肌炎的诊断，以及监测不稳定型心绞痛的病程和危险性评价均有重要意义。在30%肾功能衰竭的病人血清中，cTnT可升高。临床资料表明：该类病人患继发性心血管并发症

2、的危险性升高。Elecsys肌钙蛋白T采用两种心肌特异的单克隆抗体。用重组人cTnT作为参考标准品，为第3代TnT测试。原理：采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。 第1步：15ul标本、生物素化的抗TnT单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗TnT单抗混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原

3、版标准曲线而得。试齐士M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6. 5mlo粒子浓度0.72mgl,生物素结合能力470ng生物素/ml粒子。含防腐剂。R1：生物素化的抗TnT单克隆抗体（灰盖），1瓶，10血。浓度L5mgl,磷酸缓冲液O.hnol/1, pH6.0o 含防腐剂。R2： Ru（bpy）32+标记的抗TnT单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度L2mgl,磷酸缓冲液0.1moll, pH6.0o含防腐剂。储存和稳定性：存放在2-8度，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度，12周；放在Elecsys2010, 8周；（室温20 25度；开盖时间累计不超过2

4、0小时）。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-21肌钙蛋白T版序：ABCD页码：第2页，共3页标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。(不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆。确保标本不被肝素污染。)标本在28度可稳定24小时，-20度可稳定12个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。检测步骤：提供的材料：货号：12017644, 100人份的Elecsys肌钙蛋白T试剂盒包含： M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素

5、化的抗肌钙蛋白T抗体 R2三联比陡行标记的抗肌钙蛋白T抗体需要的材料(未提供)： Elecsys肌钙蛋白T定标液(CalSet)货号12017652 Elecsys心肌标志质控品(PreciControl Cardiac)货号 12018209 Elecsys通用稀释液货号11732277 Elecsys2010 分析仪 Elecsys系统缓冲液(ProCell)货号 11662988 Elecsys 测量池清洗液(CleanCell)货号 11662970 Elecsys 添加剂液(SysWash)货号 11930346 Elecsys 系统清洗液支架(Adapter for SysClea

6、n)货号 11933159 Elecsys 2010反应杯(Assay Cup)货号 11706802 Elecsys 2010吸样头(Assay Tip) 货号 11706799方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条阅读条形码，可以手工输入15位数字。将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。定标：每批TnT试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CalSet定标液定标。文件编号：ABCD-02-21ABCD

7、医院免疫实验室版序：ABCD肌钙蛋白T页码：第3页，共3页定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒） 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。质控：Elecsys心肌标志质控品（PreciControlCardiac） 1和2或其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。计算：对每一个标本，仪器会自动计算结果，单位是ng/ml或mg/L。干扰因素：该方

8、法不受黄疸（胆红素27mgdl）、溶血（血红蛋白Llgdl）、脂血（脂质1500mgdl）和生物素50ngml干扰。接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（2000Uml） o50种常用药物经试验对本测定无干扰作用。TnT浓度高到400ngl也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。肌钙蛋白T测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。检测范围：0. 01025. 00 ng/ml稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:10稀释。稀释后的标本cTnT含量必须高于Ing/M。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释,机器会自动计算结果。正常参考值：建议用0. lngml作为临床阈值。1999年，应用Elecsys肌钙蛋白T第三代）试剂对1951名正常人的测试结果，99%0. 01 ng/ml,最高值为0. 037ngmL如有必要，各实验室应自己测定一个参考值。