专业资料 DNA提取原理及步骤简述.docx

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DNA提取原理及步骤简述DNA提取的步骤主要有裂解、结合、洗涤和洗脱。以下是各步骤的作用原理：1 .裂解：这一步是必须的，因为DNA通常从细胞或其他生物物质中被释放出来。细胞裂解可以通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。其中，酶作用主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶使细胞破裂，核酸释放。蛋白酶还能降解与核酸结合的蛋白质，促进核酸的分离。2 .结合：磁珠表面带负电荷，磁珠buffer是高盐环境有带正电荷的盐离子，样本被buffer影响，磷酸基团带负电荷。3 .洗涤：核酸的高电荷磷酸骨架使其比蛋白质、多糖、脂肪等其他生物大分子物质更具亲水性，根据它们理化性质的差异，用选择性沉淀、层析、密度梯度离心等方法可将核酸分离、纯化。用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理性的沉淀剂。当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。4 .洗脱：加水或者EB破坏高盐环境，形成低盐环境，使DNA从磁珠上脱落。请注意，以上步骤的作用原理可能因具体实验条件和设备而有所不同。在进行实验时，请根据具体情况调整步骤和参数。