DB6505T 1252023畜间布鲁氏菌病监测技术规范.docx

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1、ICS65.020.30CCSB41B6505哈密市地方标准DB6505/T1252023畜间布鲁氏菌病监测技术规范Technica1Regu1ationsforDiagnosticCriteriaofSero1ogica1ConfirmaionofAnima1Bruce11osis2023-12-30实施2023-11-30发布哈密市市场监督管理局发布本文件按照GB/T1.1-2023标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由哈密市动物疫病预防控制中心提出。本文件由哈密市农业农村局归口。本文件起草单位：哈密市动物疫病预防控制中心、伊州区动物疫病预防控制中心。本文件

2、主要起草人：张国新、杨帆、张志新、张婉琪、段进刚、玉努斯阿不都、何波。本文件实施应用中的疑问，请咨询哈密市动物疫病预防控制中心。对本文件的修改意见建议，请反馈至哈密市动物疫病预防控制中心（哈密市八一路26号）、哈密市市场监督管理局（哈密市前进西路14号）哈密市动物疫病预防控制中心联系电话：0902-2317228,传真：0902-2317228,邮编：839000哈密市市场监督管理局联系电话：0902-2250279,传真：0902-2251069,邮编：839000畜间布鲁氏菌病监测技术规范1范围本文件规定了畜间布鲁氏菌病的确诊流程与记录、阳性畜扑杀及无害化处理、隔离场所的消杀等关键环节。本

3、文件适用于哈密市域内畜间布鲁氏菌病监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T2961兽医实验室质量和技术要求3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。1布鲁氏菌病bruceIIosis也称布氏杆菌病（以下简称布病），是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。我国将其列为二类动物疫病。初筛实验pre1iminaryscreeningte

4、st应用虎红平板凝集试验对被检对象进行布病血清学初步筛查诊断。4确诊流程及记录A1流程分类分为乡镇兽医实验室初筛检测环节和县级兽医实验室确诊环节。d3乡镇实验室初筛4.2.1样品采集4.2.1.1血清样品的采集、保存及运输要求，可参见附录A操作。4.2.1.2采样人员需对照样品采集信息记录表逐项核对并完整填写。样品信息记录表见附录Bo4.2.2样品送达4.2.2.1采样人员应将样品采集信息记录表与血清样品，在8h内送达乡镇兽医实验室。4.2.2.2乡镇兽医实验室检测或接样人员对血清样品数量、质量及样品采集信息记录表是否完整进行逐项核对。4.2.3虎红平板初筛4.2.3.1乡镇兽医实验室开展虎红

5、平板检测（初筛）应符合GB/T18646相关要求，在24h内完成初筛检测工作，初筛检测结果阳性即为布鲁氏菌病疑似阳性畜，检测结果确诊前禁止向任何人泄露相关信息。4.2.3.2完成填写虎红平板检测（初筛）记录表（附录C）。A1疑似阳性畜的隔离4. 3.1.1实验室检测人员应在检测工作完成当天将虎红平板检测（初筛）结果汇总并上报至县级兽医实验室。5. 3.1.2乡镇农业综合服务中心负责24h内送达隔离通知书（附录D）至布病疑似阳性畜畜主,并要求其隔离疑似病畜。A疑似阳性样品送检实验室检测人员对虎红平板检测结果阳性的血清样品单独分离冷冻保存，72h内与虎红平板检测（初筛）记录表一同送至县级兽医实验室

6、进行确诊。AK县级兽医实验室确诊6. 5.1血清学确诊县级兽医实验室收到虎红平板初筛结果记录单和疑似阳性待检样品后，按照GB/T18646规定进行确诊，确诊结果阳性即为布病阳性畜，确诊结果阴性即为布病阴性畜，确诊结果可疑即为布病可疑畜，并于48h内出具检验报告。7. 5.2检验报告出具检验报告分为正本和副本。正本包括县级兽医实验室出具的报告正文、虎红平板检测（初筛）记录表和样品采集信息记录表（复印件），装订成册后，加盖检验专用章和骑缝章，准备送达。副本包括正本部分、制样表、检测结果原始记录、流程卡，装订成册后，加盖检验专用章和骑缝章，保存备查。5扑杀及无害化处理41检验报告移交检验报告正本应在

7、签发当日送达县级动物卫生监督机构，并履行移交手续。4）办理扑杀令县级动物卫生监督机构应在收到确诊结果阳性检验报告后，48h内办理政府扑杀令。41扑杀乡镇农业综合服务中心在接到政府扑杀令后，在县级动物卫生监督机构的监督下完成扑杀及无害化处理工作。54解除隔离对于县级兽医实验室检测结果为阴性的牲畜应予以解除隔离：布病可疑畜应继续隔离，并于1个月后进行复检。6隔离场所的消杀A1粪污处理隔离解除后，乡镇农业（畜牧业）发展技术服务中心监督畜主及时清除隔离场所的粪污，清洁墙面、地面、顶棚、通风口、门口及水管等主要设备设施表面的污物。A0消毒对隔离场所进行全面喷洒消毒并确保其充分湿润，必要时进行连续喷洒以增

8、强消毒效果。喷洒范围包括墙面、地面或饲槽、饮水器、圈栏、通风口及粪沟等，不留消毒死角。A1消毒顺序按照从上到下、从里到外，先圈舍内部，后圈舍周围的顺序进行消毒。附录A(规范性)血清样品采集保存及运输要求A.1采样前准备A.1.1采样人员应熟悉动物防疫的有关法律规定，具有一定的专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术。A.1.2采样前防护要求应做好个人安全防护准备，穿戴一次性乳胶手套、口罩、帽子、一次性防护服、鞋套等，必要时戴护目镜或面罩。A.1.3耗材准备样品采集信息记录表、记号笔、签字笔、一次性采血器(5m1)、多功能试管架、保温箱、酒精棉球、干棉球、免洗凝胶等。A.2样品采集与处理

9、A.2.1采血部位应根据动物种类确定采血部位。牛可选择颈静脉、尾静脉或乳房静脉采血;羊多数选取颈静脉采血。A.2.2采血方法A.2.2.1牛尾静脉采血应由两人以上完成采血工作。将牛固定在保定架内或用其他方法保定后，一人用牛鼻钳将牛头向前牵拉，另一人将牛尾上提，在距离尾根10Cn1左右中点凹陷处，将采血器针头垂直刺入约1Cnb见有血液回流时，即可缓慢外拉采血器拉杆使血液流入采血器，采血量不少于3m1oA.2.2.2牛静脉采血应由两人以上完成采血工作。牛需要固定在保定架内后，一人用牛鼻钳将牛头向前牵拉，另一人在采血部位下方压迫颈静脉血管，使之怒张，针头与皮肤呈45角由下向上方刺入血管，见有血液回流

10、时，即可缓慢外拉采血器拉杆使血液流入采血器，采血量不少于3m1oA.2.2.3羊静脉采血必须由两人以上完成采血工作，羊需要固定在保定架内或要求保定人员年轻力壮能独自完成保定工作，将羊颈部静脉完全暴露，另一人在采血部位下方压迫颈静脉血管，使之怒张，针头与皮肤呈45角由下向上方刺入血管，见有血液回流时，即可缓慢外拉采血器拉杆使血液流入采血器，采血量不少于3m1oA.3血清分离、保存、包装及运输A.3.1血清分离应将血样在室温条件下倾斜30角静置2h4h,待血液凝固有大量血清析出时，可使用一次性吸管或者移液器吸头将血清吸入洁净无酶的21离心管内并及时完成样品编号。必要时可低速离心(1000g离心10

11、min-15min)分离出血清。A.3.2血清保存24h内能完成检测的血清可放28C保存待检。若24h内能无法完成检测需长时间保存，应将血清置-20C以下保存，且应避免反复冻融。A.3.3血清包装及运输A.3.3.1血清包装编号后装入血清离心管封口后放于离心管架或自封袋内，并标明采样日期及采样地点等相关信息。A.3.3.2血清运输条件允许时应以最快最直接的途径将所采集的样品送往实验室。对于可在采集后24h内送达实验室的血清样品，可放在2C8的容器中冷藏运输，对于不能在采集后24h内送达实验室但不影响检测结果的血清样品，应以冷冻状态运输、送达。附录B（规范性）样品采集信息记录表采样日期:采（抽）样地点市区（县）乡（镇）村GPS坐标经度：纬度：养殖模式口舍饲口放牧半牧斗忤舍饲联系人/畜主佚系电话养殖区域农区口牧区存栏量样品数量采（抽）样方式总体随机口分层随机口系统随机口整群口分散口其它被采样动物同群养殖方式口种畜（禽）场口规模场口散养户口屠宰场口活畜交易市场被采样动物健康状况健康发病口死亡采样环节养殖口调运屠宰口交易市场样品编号品种样品类型畜别年龄耳标号备注畜主签字：年月日抽样人签字：年月日备注附录C（规范性）虎红平板检测（初筛）记录表样品编号耳标号初筛结果样品编号耳标号初筛结果检验人员签字：校验人：检验日期：试剂生产厂家：依据标准：试剂批号：环境温度：附录D（规范性）隔离通知书