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1、层析法常用数据表及性质(一)离子交换纤维素目前常用的离子交换纤维素列于下表DEAE-纤维素形状长度(微米)交换当量(毫克当量/克)蛋白吸附容量(毫克/克)床体积(亳升/克)胰岛素(pH8.5)牛血清清蛋白(pH8.5)pH6.0pH7.5DE-22改良纤维性*12-4001.00.17504507.77.7DE-23同上(除细粒)184001.00.17504508.39.1DE-32微粒性(干粉)24631.00.185()6606.06.3DE-52同上(溶胀)24631.00.185()6606.06.3CM-纤维素溶菌酶7S- Y球蛋白pH5.()pH7.5(pH5.0)(pH5.0)
2、CM-22改良纤维性12-4000.6 0.066(X)1507.77.7CM-23同上(除细粒)184000.6 0.066(X)1509.19.1CM-32微粒性(干粉)24631.00.11,2604006.86.7CM-52同上(溶胀)24631.00.11,26()4006.86.7*:英国Whatman厂的型号,原来有旧型号如DE-1,为长纤维性,长度1000微米。还有DE-11,纤维性,5()25。微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。(-)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据型号排阻的下限(Mr)分级分离的范围(Mr)膨胀后的床体积(mL/g干凝胶)膨胀所需最少时间(室温,小时
3、)Bio-gel-P-21 600200-2 0003.824Bio-gel-P-43 600500-4 0005.824Bio-gel-P-64 6001 000-5 0008.824Bio-gel-P-1010 0005 000-17 00012.424Bio-gel-P-3030 00020 00050 00014.91012Bio-gel-P-6060 00030 000-70 00019.01012Bio-gel-P-100100 00040 000-100 00019.024Bio-gel-P-150150 00050 000150 00024.024Bio-gel-P-20020
4、0 00080 000-300 00034.048Bio-gel-P-300300 000100 000-400 00040.048注:上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.(三)琼脂糖凝胶的技术数据(琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在04, pH 49范围内是稳定的。)名称、型号凝胶内琼脂糖百分含量(W/W)排阻的下限(Mr)分级分离的范围(Mr)生产厂商Sagavac 10102.5x105lxl()4 2.5x1 ()5Seravac Labora
5、tories,Sagavac 887xl052.5x1 O47x1 ()5Maidenhead, EnglandSagavac662xl065x104-2x106Sagavac4415xl062x10515x106Sagavac22150xl065x105-15x107Bio-GelA-0.5M100.5x1051x10M.5x106Bio-Rad Laboratories,Bio-Gel A-1.5M81.5X1061x1041.5x106California,U.S,A.Bio-GelA-5M65xl06IxIOMxIO6Bio-GelA-15M415X1054x104-15x106Bio
6、-GelA-50M250x106IxIOMOxIO6Bio-GelA-150M1150xl06150x1()6(四)凝胶过滤层析介质的技术数据凝胶过滤介质名称分离范围颗粒大小(um)特性/应用pH稳定性工作耐(Mj压最快流速(cm/h)Superdex 301000024-44肽类、寡糖、小蛋白等3120.3100Superdex 7530007000024-44重组蛋白、细胞色素3120.3100300024 44单抗、大蛋白3120.3100Superdex2()()Superose 610000-60000020-40蛋白、肽类、多糖、核酸蛋白、肽类、寡糖、多糖3120.4305000-
7、5xlO620-403120.730Superose 12肽类、小蛋白100030000025-753110.220 39SephacrylS-100HR1000 10000025 75蛋白,如清蛋白3110.220-39SephacrylS-200 HR500025000025-75蛋白、抗体3-110.220-39Sephacryl1 (XXX)1.5X1 ()6S-300 HRSephacrylS-400 HRSepharose 6Fast FlowSepharose 4Fast FlowSepharose 2BSepharose 4BSepharose 6BSepharoseCL-2B
8、SepharoseCL-4BSepharoseCL-6B20000-8x1061()0004x1 (卜60000-20x1067000040x10660000-20x106100004x1 ()670000-40x10660000-20x105100004x1 ()62575平均90平均90602004516545165602004516545165多糖、具延伸结构的大分子如蛋白多糖、脂质体巨大分子巨大分子如重组乙型肝炎表面抗原蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)蛋白、多糖蛋白、多糖蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)蛋白、多糖蛋白、多糖3112
9、-122-1249494-93133130.20.1().10.0040.0080.020.0050.0120.02203930025()1011.514152630凝胶过滤介质名称分离范围颗粒大小(R in)特性/应用PH稳定性工作干凝胶溶胀体积(mL/g)溶胀最少平衡时间(h)最快流速(cm/h)室温沸水SephadexG-10700干粉40-1202-13233125SephadexG-151500干粉40-1202132.53.53125SephadexG-25Coarse1000-5000干粉 100-300脱盐及交换缓冲液用213466225SephadexG-25Medium10
10、005 000干粉50-150脱盐及交换缓冲液用213466225SephadexG-25Fine1(X)()5000干粉2080脱盐及交换缓冲液用2-13466225SephadexG-25Superfine1000-5000干粉1()40脱盐及交换缓冲液用213466225SephadexG-50150030000干粉100300小分子蛋白质分离2109116225Coarse干粉50-150小分子蛋白质分离SephadexG-50150()300002-109-116225Medium干粉2080小分子蛋白质分离SephadexG-50Fine150030000小分子蛋白质分离2109-
11、116225SephadexG-50150030000干粉10-40中等蛋白质分离2-109116225Superfine干粉40-120中等蛋白质分离SephadexG-75300080000干粉1040中等蛋白质分离210121524372SephadexG-75Superfine300070000干粉40-120中等蛋白质分离2-10121524316SephadexG-10040001.5x105干粉1040稍大蛋白质分离210152048547SephadexG-100Superfine4000IxlO5干粉40-120稍大蛋白质分离2-1015-2048511SephadexG-1
12、505OOO-3xl05干粉10-40较大蛋白质分离210203072521SephadexG-150Superfine50001.5x1 ()5干粉40120较大蛋白质分离2-1018227255.6SephadexG-2005000-6x105干粉1040210304072511SephadexG-200Superfine500()2.5x1 (户2-1020257252.8SephadexLH20100干粉特别为使用有机溶剂而设计。适合分离脂类、胆固醇、脂肪酸、激素、维(嗜脂性)4 00025106生素及其他小生物分子。此分离范围指以酒精为溶剂的分离(五)离子交换层析介质的技术数据离子交换介质名称最高载量