HPV分型样本制备(2).docx

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HPV分型样本制备标准操作规程1 .目的使PCR工作人员HPV分型的样本制备操作规范化，减少实验误差。2 .范围HPV分型检测实验的样本制备、核酸提取。3 .操作人员PCR室在岗工作人员。4 .操作步骤5 .1打开金属浴，调至IOO0Co4.2 将准备好的HPV23PCR反应液管立即放入样本准备区4C冰箱。4.3 样本从-20C冰箱取出后，室温复融，振荡混匀5秒。4.4 取出已灭菌的1.5m1离心管n个（n为样本数量），将标本管中样本液吹打混匀，吸取InI1转入15m1离心管,盖上管盖，做好标记，10,00OrPnI离心5分钟,吸弃上清液，留沉淀（若样本有杂质如溶血或漂浮物，可以使用生理盐水洗涤1-2次）。4.5 阳性和阴性质控品复融，震荡混匀，瞬时离心，各取IOU1,分别加入15m1的离心管。4.6 6样本沉淀及质控品，分别加50U1DNA提取液振荡混匀3min,放入离心机瞬时离心5秒，使管壁上不沾有提取颗粒，再置于100C的金属浴中温浴计时10分钟，1000OrPn1离心5分钟，上清备用。4.7 取出HPV23PCR反应管，分别加入样本提取液及质控品提取液上清5U1,PCR反应管液瞬时低速离心。4.8 离心后取出反应管传至样本准备区到PCR扩增区的传递窗中5.附表HPV分型检测流程记录表