UUDNA样本处理.docx

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1、UU-DNA样本处理标准操作规程1 .目的：规范解胭服原体DNA样本制备操作。2 .范围UU-DNA定量检测实验的样本制备操作。3 .操作人员PCR室在岗工作人员。4 .操作步骤4. 1打开金属浴，调至37；4.2 从传递窗中取出已配好的PCR反应液管、定量参考品、阴性对照、阳性对照、DNA提取液,PCR反应液管立即放入样本准备区4冰箱。4.3 定量参考品AD及阴、阳性对照置37金属浴中复融，振荡混匀5秒，瞬时低速离心500OrPm,使管盖不沾带试剂。将金属浴调至100备用。4.4样本处理4.4.1向拭子管中加入IIn1灭菌生理盐水，高速震荡Imin,挤干拭子；4.4.2将处理后的全部液体转移

2、到15m1离心管中（如分泌物过多,只取200U1）,IOOOOrpm离心5分钟；4.4.3弃上清，向沉淀中加入Im1灭菌生理盐水，振荡混匀3min,IOOoorPm离心5分钟；4.4.4弃上清，向沉淀中加入50U1DNA提取液（DNA提取液使用时边颠倒混匀边迅速打开管盖吸取颗粒和液体一起加入沉淀中），盖上管盖，振荡混匀3min,瞬时低速离心至500OrPm使颗粒和液体集中在管底，取出置于加热至100的金属浴中温浴10分钟。4.4.510分钟后从金属浴中取出离心管放至4冰箱冷却3分钟IOOOorPm离心5分钟，上清液用于PCR反应。4.5 阴性、阳性质控品样本处理4. 5.1取出阴性、阳性质控品,取5011到15m1离心管中,各加入50U1DNA提取液,充分混匀，10（Te恒温处理10分钟;5. 5.2IOoOorPn1离心5分钟，上清液用于PCR反应。4.6 加样从4冰箱中取出已准备好的PCR反应液，分别加入处理好的待测样本、阴性、阳性质控品,上清液51,盖紧管盖后瞬时低速离心。4.7 离心后取出PCR管传至样本准备区到PCR扩增区的传递窗中。5.引用文件PCR室流程记录表