ms造就基母液的配制与保留新版.docx

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1、ms造就基母液的配制与保留新版实验一MS培养基母液的配制与保存一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能；2、掌握培养基各种母液的保存方法。二、仪器与用具1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具:烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签；3、试剂:95%酒精，0.1-INNaOH,0.I-INHC1,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸镭水。三、方法步骤(一)母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10100倍。优点：(1)保证各物质成分的准确性；(2)便于配置时快速移取；(3)便于低温保藏。、MS大量元素母液(IOX)1称10升量溶解在1升蒸

2、储水中。配1升培养基取母液IOOm1o化学药品1升量10升量(IOX)50升量(50X)?NHNO1650mg16.5g43?KNO1900mg19.Og3?CaC1?2H0(CaC1)440mg()2224.4g?MgS0?7H0(MgSO)370mg()4243.7g?KHPO170mg1.7g242、MS微量元素母液（IoOX）称10升量溶解在IOOmI蒸储水中。配1升培养基取母液IOm1o化学药品1升量10升量100升量（IOOX）MnS0?4H0222.3mg223mg4?（MnS0?H0）（21.4mg）（214mg）24?ZnS0?7H0428.6mg86mg?HBO6.2mg6

3、2mg33?K10.83mg8.3mg?NaMo0?2H020.25mg2.5mg24?CuS0?5H0420.025mg0.25mg?CoC176H0220.025mg0.25mg注意:Coe1?6H0和CUS0?5H0可按10倍量（O.25mg10=2.5mg）或IOO倍量（25mg）2242称取后，定容于IOOnI1水中，每次取IOmI或1m1,即含0.25Ing的量。3、MS铁盐母液（IOoX）称10升量溶解在IoOm1蒸储水中。配1升培养基取母液IOm1o化学药品1升量10升量IOO升量（IoOX）Na?EDTA37.3mg373mg2FeS0?7H04227.8mg278mg注意配

4、制时，两种成分分别溶解在少量蒸储水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。4、MS有机物母液（IoOX）称10升量溶解在IOOmI蒸储水中。配1升培养基取母液IOm1o化学药品1升量10升量100升量（IOOX）?烟酸0.5mg5mg?盐酸毗哆素（VB6）0.5mg5mg?盐酸硫胺素（VBI）0.1mg1mg?肌醇100mg1g?甘氨酸2mg20mg5、生长调节剂单独配制，浓度为15mg1（书中为0.51mgm1）,本实验要求配成1mg/m1O配制培养基母液时注意事项：?一些离子易发生沉淀，可先少量水溶解，在按配方顺序依次混合；?配制母液时用蒸储水或重蒸馈水；?药品应用化学纯或分析纯；?溶解生长素时，可用少量0.11N的NaOH或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0.1一1N的HC1加热溶解（如再加蒸储水，易产生白色沉淀，此时可加入热水）。（二）母液的保存1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期、配制者。（注意将易分解、氧化者，放入棕色瓶中）例如:MS铁盐（IooX）,2013.10.22,12生技班甲组2、贮藏:4?冰箱。四、作业1、写出实验报告。