实验室14种常用消毒灭菌的方法汇总.docx

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1、实睑室14种常用消毒,灭菌的方法汇总目录1 .热力消毒灭菌12 .干热消毒灭菌13 .湿热消毒灭菌24 .电热培养箱35 .微波消毒36 .煮沸法37 .高压蒸汽灭菌法48,手提式高压蒸汽灭菌器49 .卧式高压蒸汽灭菌器510 .预真空式高压蒸汽灭菌器511 .紫外线消毒512 .臭氧消毒513 .甲醛消毒614 .乳酸重蒸法消毒61 .热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。提到高温灭菌，相信大家日常生活中都应该用过祖传的万能100度法，买个新的餐具啦，水杯啦，都会习惯性的

2、拿开水烫一烫，意在消毒，这的确也是有一定科学依据的。高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡，是应用最广泛且有效的灭菌方法。下面我们说两种方法。2 .干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20%以下的高热。干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。一般繁殖体在干热80100C中经1小时可以杀死，芽胞需160170C经2小时方可杀死。干热适用于易被湿热损坏和在干燥条件下使用更方便的物品（如金属、玻璃、陶瓷及凡士林纱布条等）灭菌。由于其对烤箱要严格要求（国内产的烘箱质量都有点悬），且大功率、高温下危险系数较大，一般不建议使用！燃烧法：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。

3、烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。将器械放在火焰上烧灼12分钟。若为搪瓷容器，可倒少量95%乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约12分钟。采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转23次。燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醛等。燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。焚烧：某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，

4、使之炭化。3 .湿热消毒灭菌湿热消毒灭菌是由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热灭菌法比干热灭菌法所需温度低、时间短。（1）煮沸法将水煮沸至100,保持510分钟可杀灭繁殖体，保持13小时可杀灭芽胞。在水中加入碳酸氢钠至1%2%浓度时，沸点可达105,能增强杀菌作用，还可去污防锈。在高原地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间（海拔每增高300m,需延长消毒时间2分钟）。此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品。煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触。锐利、细小、易损物品用纱布包裹，以免撞击或散落。玻璃、搪

5、瓷类放入冷水或温水中煮；金属、橡胶类则待水沸后放入。消毒时间均从水沸后开始计时。若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态。4 .电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌。培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。一般繁殖体在干热80IOOC中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160170经2小时方可杀死。热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。灭菌后待箱内温度降至5040C以下才能开启柜门，以防炸裂。5 .微波消毒微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速

6、升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。目前己广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。若物品先经1%过氧乙酸或0.5%新洁尔灭湿化处理后，可起协同杀菌作用，照射2分钟，可使杀芽胞率由98.81%增力口至IJ99.98%99.99%。微波对人体有一定危害性，其热效应可损伤睾丸、眼睛晶状体等，长时间照射还可致神经功能紊乱。使用时可设置不透微波的金属屏障或戴特制防护眼镜等。6 .煮沸法将水煮沸至100,保持510分钟可杀灭繁殖体，保持13小时可杀灭芽胞。在水中加入碳酸氢钠至1%2%浓度时，沸点可达105C,能增强杀菌作用，还可去污防锈。在高原

7、地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间（海拔每增高300m,需延长消毒时间2分钟）。此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品。煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触。锐利、细小、易损物品用纱布包裹，以免撞击或散落。玻璃、搪瓷类放入冷水或温水中煮；金属、橡胶类则待水沸后放入。消毒时间均从水沸后开始计时。若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态。7 .高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103206kPa时，湿度可达121.3-132C

8、o高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，公众号“实验室IS017025”提醒，此法为目前可靠而有效的灭菌方法。适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、药品、细菌培养基等。潜热是指当Ig1O（TC的水蒸汽变成IgIo（TC水时，释放出2255.2J的热量。高压蒸汽灭菌的关键问题是为热的传导提供良好条件，而其中最重要的是使冷空气从灭菌器中顺利排出。因为冷空气导热性差，阻碍蒸汽接触欲灭菌物品，并且还可减低蒸汽分压使之不能达到应有的温度。8 .手提式高压蒸汽灭菌器为金属圆筒，分为二层，隔层内盛水，有盖，可以旋紧，加热后产生蒸汽。锅外有压力表，当蒸汽压力升高时，温度也随之相应

9、升高。该灭菌器体积小，可自发蒸汽，便于携带。操作方法如下：在灭菌器中盛水3000m1；将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内；将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的的方管中；盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气；锅下加热，打开排气活门，放出冷空气（一般在水沸后排气1015分钟左右），关闭放气活门，使压力逐渐上升至103kPa,温度达121.3C,维持20分钟后，排气至“0”时，慢慢打开盖子。如果突然开盖，冷空气大量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂。后再关闭放气开关，待夹层压力表达到灭菌所需压力时（约10分钟后），将蒸汽控制阀移至“消毒”位置，使蒸汽进入柜室，柜室内的冷空气及冷凝水可由柜

10、室阻气器排出，待柜室的压力升到103137kPa,温度达121.3126.2C时，转动压力调节阀，使压力与温度保持恒定。维持30分钟后，将蒸汽控制阀移至“排气”位置，排气毕，将蒸汽控制阀移至“干燥”位置；物品干燥后，将蒸气控制阀移至“关闭”位置，待压力指针到“0”位置和热空气排尽后，才能打开柜门，取出物品；关紧进气阀。9 .卧式高压蒸汽灭菌器其结构原理同手提式高压蒸汽灭菌器，因其体积大，一次可灭菌大量物品。操作人员须经专业培训，合格后方能上岗。10 .预真空式高压蒸汽灭菌器在通入蒸汽前有一预处理阶段，即柜室内抽负压至2.6kPa（空气排除约98%）,所以，预真空高压蒸汽灭菌器除有下排气式所具备

11、的灭菌系统、蒸汽输送系统、控制系统、安全系统和仪表监测指示系统外，增加抽负压系统和空气过滤系统。机器运转由电脑控制。11 .紫外线消毒在室温20C25C时，220V30W紫外灯下方垂直位置1.0m处的253.7nm紫外线辐射强度应70Wc?,低于此值时应更换，提醒，适当数量的紫外灯，确保平均每立方米应不少于1.5W。紫外线消毒时，无菌室内应保持清洁干燥。在无人条件下，可采取紫外线消毒，作用时间应30min,室内湿度20%或40%、相对湿度大于60%时，应适当延长照射时间。用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射，且应达到足够的照射剂量。人员在关闭紫外灯至少30min后方可入内作

12、业。12 .臭氧消毒臭氧以氧原子的氧化作用破坏微生物膜的结构，以实现杀菌作用。臭氧对细菌的灭活反应总是进行的很迅速，与其它杀菌剂不同的是：臭氧能与细菌细胞壁脂类的双键反应，穿入菌体内部，作用于蛋白和脂多糖，改变细胞的通透性，从而导致细菌死亡。臭氧还作用于细胞内的核物质，如核酸中的噂吟和喀咤破坏DNA。臭氧首先作用于细胞膜，使膜构成成份受损伤，而导致新陈代谢出现障碍，臭氧继续渗透穿透膜，而破坏膜内脂蛋白和脂多糖，改变细胞的通透性，导致细胞凋亡。封闭无菌室内，无人条件下，采用20mgm3浓度的臭氧，作用时间应30mino消毒后室内臭氧浓度02mgm3时方可入内作业。13 .甲醛消毒按照甲醛（40%

13、）IOm1m高锌酸钾5gn?计算用量。不同情况下，用量有所不同，但比例为2：Io盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锌酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锌酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。注意顺序：是将甲醛倒入高镒酸钾溶液内。消毒时间一般为20-30分钟。消毒后要打开门窗通风换气。这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是福尔马林，一般包装上写的是37%o公众号“实验室ISO17025”提醒，甲醛对人体危害太大了，一般不推荐这种方法。可以考虑用40%乳酸熏蒸，效果很不错的。14 .乳酸重蒸法消毒室内温度22,湿度75%90%,按0.6gm3乳酸量共用96g进行室内熏蒸，使蒸汽弥散全室，密闭门窗1h。