44检定菌接种传代规程.docx

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1、有限公司检定菌接种传代规程XY1-Z1-44编制受控状态受控审核版本/状态A/0批准生效日期2023年02月28日序号修改内容修改人批准人修订口期1目的：制订检定菌接种传代检验规程，对从事检测的操作人员进行培训指导，按检测规程操作。2 .范围：本方法适用于检定菌接种传代。3 .术语和定义：无4 .职责：质量部负责实施。5 .内容：5.1 检定菌传代芽抱杆菌传代周期为36个月，其它菌种为1个月。具体看菌种使用说明，原则上传代数在传代培养基斜面上接种58支，按使用量进行适当调整。5.2准备工作5.2.1仪器：冰箱、生物安全柜、压力蒸汽灭菌器、电热恒温水浴锅、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、电热恒温鼓风

2、干燥箱、电子天平、电炉。5.2.2器具：接种环、酒精灯、试管5.2.3培养基、菌种：试验菌、新洁尔灭溶液（5%）、乙醇（99.5%）、胰酪大豆陈琼脂培养基等。5.2.4消毒液：a. O.K新洁尔灭溶液：往Io1试剂瓶里加入9.81蒸馈水和200m1新洁尔灭溶液（5%）,搅拌均匀将已灭菌过的毛巾浸湿在这消毒液中备用。b. 75%乙醇溶液：往IOOOm1试剂瓶里放入250m1蒸储水和750m1乙醛溶液（99.5%）,搅拌均匀，已灭菌过的毛巾浸湿在消毒液中备用。5.3操作步骤5.3.1接种：将传代培养基准备58支，保存在冰箱（ISIOC）中的试验菌准备2支,用新洁尔灭溶液（0.1%）或乙醇（75%）

3、擦拭菌种管、试管后，移入净化工作台，紫外灯灭菌30分钟，把菌种试管盖打开，并用酒精灯火焰灼烧一圈，用接种环刮取一点，在新的斜面培养基上接种，退出接种环，塞上管塞。接种环经火焰灭菌后放置。接种的斜面培养后，沿接种线长出菌苔，非接种线的部位应无细菌生长。同时做空白试验，空白试验应无菌生长。5.3.2贴签：试验菌接种结束后，贴上标签。5.3.3培养：在3537培养箱内培养1天或2025培养57天（真菌）。5.3.4保存：培养结束后，用胶袋封口，110C保存。5.3.5 芽胞杆菌保存期为36个月，其它菌种为1个月，试验菌传代次数为5次。5.3.6 试验用菌株传代次数不超过5次，并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特性。6 .相关文件净化工作台使用及维护保养SOP电热恒温培养箱操作维护保养规程电热恒温鼓风干燥箱操作维护保养规程电子恒温水浴锅操作维护保养规程立式压力蒸汽灭菌器操作维护保养规程电子天平使用及维护保养SOP霉菌培养箱操作维护保养规程7 .相关记录检定菌定期检查记录检定菌管理记录检验仪器和设备的使用记录培养基配制记录培养箱温度监测记录玻璃器皿清洗记录表