辅助生殖科辅助生殖临床技术操作规范.docx

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1、辅助生殖科辅助生殖技术操作规范第一篇辅助生殖临床应用第一章取卵手术第一节、取卵手术常规第二节、取卵手术负压吸引器调节程序第二章.冷冻胚胎移植第一节、冷冻胚胎移植的内膜准备第二节、胚胎移植手术第三节、验孕和孕期监测第三章.宫腔内人工授精常规第一节、宫腔内人工授精的必备条件第二节、宫腔内人工授精的适应症第三节、宫腔内人工授精的禁忌症第四节、宫腔内人工授精促排卵常规第二篇辅助生殖实验室部分第一章.精液检查及精子制备第一节、精液常规检查操作方法第二节、精子形态分析操作方法第三节、精子低渗肿胀试验(HOS)第四节、全自动精子分析系统使用说明(西班牙SCA全自动精液质量分析系统）第五节、抗精子抗体（MAR

2、）检测方法第六节、细针附睾/睾丸穿刺取精术及精子制备常规第七节、伊红试验第二章.宫腔内人工授精的实验室处理第一节、取精第二节、精液处理第三节、授精第四节、文件书写第三章.体外受精-胚胎移植常规第一节、仪器准备（最迟提前2天）第二节、试剂第三节、所需物品第四节、步骤第四章.卵细胞浆内单精子注射常规第一节、仪器配置及注射前准备第二节、卵细胞浆内精子注射的适应症第三节、ICS1操作程序第五章.卵子辅助激活常规一、卵子辅助激活指征二、激活试剂配制三、步骤第六章.玻璃化冷冻解冻常规一、冷冻解冻试剂配制二、冷冻操作常规三、解冻操作常规第七章.精子冷冻一、新鲜精子冷冻二、睾丸及附睾精子冷冻第三篇辅助生殖并发

3、症的防治第一节、取卵术手术并发症及处理第二节、减胎术概述第三节、卵巢过度刺激综合征诊疗常规第四节、异位妊娠诊疗常规第五节、感染的诊疗常规第六节、脏器损伤的诊疗常规第七节、血管损伤的诊疗常规第八节、卵巢扭转的诊疗常规第一篇辅助生殖临床应用第一章取卵手术技术第一节、取卵手术常规1）精神紧张者可使用杜冷丁镇痛，用法为50mg肌注，注药前病人解小便，若既往注射度冷丁后呕吐严重则禁用。2）打开加热台开关，如果需要冲洗，打开冲洗机，使注射腔预热（见附录）。3）手术者及器械护士洗手，注意擦第二遍灭菌王后用灭菌毛巾准备好所用物品（见附录）。4）进手术室前给病人肌注将手擦干。5）器械护士穿手术衣，戴手套、生理盐

4、水洗手，将14m1Fa1con管平放于取卵加热台上，并用无菌巾盖好，使取卵管预温。6）手术者戴手套，打开阴道消毒包,用IOmI注射器抽1%利多卡因,放台上备用。7）手术者用PVP碘消毒外阴、阴道，用生理盐水冲洗阴道至碘全部冲尽（纱布不变色）。8）阴道冲洗后用干纱布将阴道擦干，于宫颈基底3点9点处各注射1%利多卡因5m1。注意注药前要回抽，证实未刺入血管后再推药。9）手术者穿手术衣，换干净手套,生理盐水洗手。11）器械护士、手术者、巡回三者协同上阴道探头套及布套,注意无菌操作。12）生理盐水纱布擦洗探头套。13）生理盐水冲洗穿刺架，上穿刺架,作盆腔扫描。14）撕开穿刺针袋，手术护士将穿刺针从袋内

5、取出，立即将取卵管套在胶塞上（注意不可碰触胶塞的内面）。将穿刺针与负压吸引管连接，按负压调节程序调负压至15Kpao15）若需卵泡冲洗，此时通知实验室将装有冲洗液的60m1注射器递出交巡回与冲洗管连接并安装于冲洗机上。16）管道冲洗：巡回从操作箱内取出冲针液，手术者将穿刺针插入试管中吸出1-2m1冲针液使管道温度及PH平衡，吸出之冲针液连同取卵试管应弃去.若为双腔针可先冲再吸。余下的冲针液应立即放回操作箱.若为含Hepes之冲针液,盖子应盖紧；若为碳酸氢盐缓冲的冲针液,放回操作箱前盖子松开。17）通知实验室，若实验室已做好准备可开始卵泡穿刺。当一侧卵巢卵泡穿刺完毕后应取出穿刺针，经冲洗液冲洗后

6、，将穿刺针插入保护套内，待实验室找卵近结束时再次冲洗取卵针并开始下一侧卵巢的穿刺。18）手术护士应注意手术台温度和取卵管温度，注意负压系统工温度下降太快,应关闭风机或升高室温。19）手术过程中若出血多，可将阴道探头紧压于阴道穹隆数分钟，一般出血会立即停止。20）若卵巢位于子宫上方，可采取以下方法避免经子宫穿刺：腹部按压,改变探头方位，牵拉宫颈。若上述措施无效,可经子宫穿刺，但应避免经过内膜。21）取卵完毕后，常规盆腔扫描并做阴道检查,若有出血做相应处理。22）术者填写取卵手术记录。附录：取卵手术物品取卵手术物品1.洗手、消毒物品洗手用品阴道消毒包温生理盐水8瓶漏斗、塑料桶2只2.消毒巾塑料布手

7、术衣、口罩、帽子消毒手套孔巾、脚套阴道探头布套3.手术车、消毒车4.穿刺物品取卵针（16G或17G,根据情况而定）阴道探头套吸引管消毒玻璃接头14亳升FA1CON管若干（根据卵泡多少定）16G穿刺支架消毒试管架5毫升注射器，60亳升注射器5.其它手术灯吸引器B超仪椅子加热台第二节、取卵手术负压吸引器调节程序负压吸引器工作状态好坏对取卵影响很大，取卵术前、术中应注意观察：1）连接负压吸引管前应先试机，当按住进气口（玻璃接头）时负压应上升至15Kpao开放进气口，再反复试三次。若负压不在15Kpa应调节负压调节旋钮。最大负压达不到15Kpa,可能提示吸引胶管漏气,接头连接不紧或吸引器已损坏，此种情

8、况应调换吸引器。2）将吸引器玻璃接头与吸引管紧密连接，再将吸引管玻璃接头与取卵针连接，取卵针胶塞与取卵管接紧，各接头处不可漏气。3）吸空针（CCDI7G单腔针）负压应达到5Kpa,否则表明负压系统有问题，反复试三次。4）吸培养基，负压应接近15Kpa,且培养基呈线状流入取卵管。若负压达15Kpa但培养液不呈线状流入，表明取卵针已不通畅，应换针。5）取卵过程中若穿刺针进入卵泡中很顺利，但卵泡液流出缓慢或卵泡缩小缓慢，表明负压系统有问题或穿刺针阻塞，应立即检查原因，并作相应处理。6）若取卵率低，应首先检查负压吸引系统。7）负压吸引器放在手术台上，取卵过程中巡回；手术护士、手术者应反复观察压力表显示

9、。说明:a、负压吸引器为XX医用吸引器厂生产的羊水吸引器，型号YB-DYX-10在0-25Kpa内可调另购脚踏开关与吸引器连接，脚踏开关电线长2米。b、压力旋钮平时放强档，使用时旋转微旋钮调节压力。c、使用时去掉负压吸引瓶，吸引器进气管通过盐水接头直接与无菌吸引管连接。d、吸引器进气管（绿色）不耐紫外线，应用胶带保护。冲洗机调节方法：移动显示条按A显示移动条内容按B移动黑方块按A改数字按数字键输入设定内容按“Enter”使活塞后退再开门一次。第二章冷冻胚胎移植技术操作规范“以冷冻胚胎移植为核心的IVF策略”不同于传统超排卵周期因卵泡多为防止OHSS或因孕酮高不适合新鲜胚胎移植不得已而采用全胚冷

10、冻。“以冷冻胚胎移植为核心的IVF策略”是主动的全胚冷冻，包含四个基本要素：简单的促排卵方案、全胚冷冻、主要在自然排卵周期进行冷冻胚胎移植、简单的黄体支持。冷冻胚胎移植涉及以下关键问题：内膜准备、胚胎内膜同步、黄体支持。第一节、冷冻胚胎移植的内膜准备冷冻胚胎移植可以在自然周期、微刺激周期和激素替代周期进行，前两种称为有排卵周期。排卵后有黄体形成，移植后黄体支持简单，应该尽量在有排卵周期进行冷冻胚胎移植。一、自然排卵周期内膜准备适用于排卵正常，周期23-30天的妇女。月经周期第10天前排卵的妇女不适合自然周期冷冻胚胎移植，可以用来曲咏推迟排卵2天。周期超过30天的妇女监测时间较长，也可以用来曲嗖

11、促排卵，缩短监测次数。准备自然周期冷冻胚胎移植的患者，根据月经周期长短从月经周期第10天-12天开始用尿1H试纸监测，每天一次,用晨尿测定。若1H开始显示，来院抽血查性激素：FSH,1H,E2,P4,同时超声监测，注意内膜厚度、形态、卵泡大小、有无输卵管积水。注意少数妇女1H峰不典型，尿1H测定一直阴性，若1H一直阴性，月经周期第14-15天来院查性激素和超声监测。1、若血1H水平超过10mium1,E2超过200pgm1,且内膜超过8mm,形态正常，卵泡平均直径大于16mm,标志着1H峰已经出现。2、若血1H超过IOmiU/m1,但小于20miu1,E2、P4仍低，卵泡平均经线小于15mm,

12、应该第二天复查,判断1H峰是否真正发生。3、若血1H水平低于20m1Um1,且P4低于Ing/m1,即1H处于上升期，当日夜晚9点注射Hcgioooou,+5天上午9-io点解冻D3胚胎，+7天上午9-10点解冻D5-7囊胚4、1H水平等于或大于20m1Um1,或P4大于等于Ing/m1,即1H峰处于下降期，当日下午2-5点注射hcgioooo,+4天上午9-io点解冻D3胚胎，+6天上午9-10点解冻D5-7D囊胚。5、若已经排卵、P4在1-2ngm1之间，为排卵第一天，立即注射Hcgioooou,同时开始使用达芙通和安琪坦或雪诺酮，+3天上午9-10点解冻D3胚胎，+5天上午9-10点解冻

13、D5-7D囊胚。一般口服达芙通支持黄体已经足够，不再监测内源性孕酮，不注射黄体酮油剂，方便病人。6、夜晚9点注射Hcgioooou的，+3天开始口服达芙通下午2-5点注射Hcgioooou的，+2天开始口服达芙通（达芙通用量20mgBIDPO)o7、若注射HCG日卵泡平均直径低于15mm,可能发生黄体功能不全，应该加强黄体支持，口服达芙通同时阴道塞黄体酮，如安琪坦0.2gbidpv,或雪诺酮1支PVo8、注射HCG后到移植日不再监测，移植日测内膜，移植后不监测内源性孕酮和雌激素。9、取消移植标准：E2高峰日，或冷冻胚胎移植日内膜厚度低于8mm；E2高峰值低于150pgm1,1H峰日卵泡小于14

14、mm,或不能确定排卵时间，或内膜形态异常均应该取消移植。二、微刺激周期的内膜准备1、来曲咏微刺激（来曲嘤的用量应根据月经周期长短决定）：周期30-34天，来曲咏第一周期用量2.5mgqd3天。周期35-40天，来曲嘤第一周期用量5mgqd3天。周期超过40天，来曲嘤第一周期用量5mgqd5天。周期第10天前排卵，或卵泡14mm以下排卵的妇女，可以用来曲嘤推迟排卵。来曲嘎2.5mgqd3天。来曲理用量越大需要添加的HMG用量越少，卵泡越少，雌激素越低来曲哇用量越小-需要添加的HMG用量越大，卵泡越多，雌激素越高。一般从月经周期第3天开始口服来曲咏，用药起始日后7天超声监测：主卵泡超过14mm,不

15、需要加用HMG主卵泡不足14mm,加用HMG150uimqod,2-3次复诊2、HMG晚刺激若月经第12天主卵泡小于IOmm,用HMG促排卵，HMG150imqod,根据卵泡的大小决定用药次数，促排卵的同时监测尿1Ho一般HMG晚刺激周期卵泡在15mm出现1H峰。无论是自然周期还是微刺激周期做内膜准备，均采用严格同步的方法，同步方式和黄体支持同自然周期。三、激素替代周期的内膜准备为减少病人痛苦，尽量不采用激素替代做冷冻胚胎移植，HRT有指证进行。适用于：FET反复自然周期失败；,不明原因不孕自然周期FET失败；自然周期内膜6mm；周期23d、周期第10天前排卵或卵泡14mm有1H峰出现者；异常出血（排卵期出血、经期延长）的患者。内膜薄、异常出血的患者应该先做宫腔镜，有排卵周期胚胎移植失败的患者、有人工流产史、宫腔手术史、结核史的患者应该先做宫腔镜检查。激素替代前一般不需要降调节，从月经周期第3天直接使用雌激素。子宫肌腺症是否需要在激素替代前作降调节没有确切的证据，如果内膜正常，子宫肌腺症患者在激素替代前没有降调节的必要。