新版BCA蛋白质定量试剂盒doc.docx
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1、2.标准曲线制备与操作。(1)蛋白标准需要新鲜稀释配制(蛋白标准稀释后,请立即使用,余下废弃,不可再用),取IOu1浓缩蛋白标准(50mgm1),加入990u1稀释液配制成0.5mgm1蛋白标准。(为减少稀释产生误差,总稀释体积不可太小)为保持样品和标准测定条件同一,蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。一般要求,可以用0.9%NaC1PBS或水直接稀释标准品。(2)按下表格操作编号123456789标准稀释液同2019181612840蛋白标准R01248121620样品R20蛋白对应浓度XJang/m100.050.100.200.400.600.81BCA工作液12002002
2、00200200200200200200混匀,37C放理之间也可接受)t20-30分钟,冷却到室温,i,根据标准曲线计算出蛋白划定A562的吸光度(540-595nm浓度注:样品和试剂比可以按比例放大或缩小。微孔检测时,可以按比例缩小,但总体积不小于IOOu1产品特点:1 .准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000gm1,采用加强方法可检测到5gm102 .快速:45分钟内完成测定。3 .可在微孔板中进行。4 .相对于其他方法干扰因素较少。5 .不同蛋白质分子的变异系数远小于Bradfordo6 .不受低浓度的EDTA、EGTA、DTT硫酸钱、脂类的干扰7 .标准曲线接近直线,可以
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