猪丹毒不同检测方法的比较.docx

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1、猪丹毒不同检测方法的比较由丹毒杆菌引起的猪丹毒一直是养猪业中的一个重要疾病，从死亡猪的组织中分离到猪丹毒杆菌可以确诊为猪丹毒。猪丹毒的其他诊断方法有免疫组化技术（IHC）、PCR和血清检测技术。猪丹毒的进一步鉴定方法还包活凝胶电泳（PFGE）,血清分型、核糖体基因型、DNA扩增和近来使用的全序列测定法。研究目的采集已感染和未感染丹毒猪的样品（组织、血样、唾液），来评估猪丹毒的传统检测方法和新检测方法。材料和方法检测样品包括血样、组织及唾液，这些样品来自实验感染猪（血清Ia型，19）、接种过疫苗的猪（血清2型）、未感染的阴性对照猪和未确定是否感染丹毒杆菌的猪。诊断实验情况总结如表Io检测样品检测

2、组织血清唾液细菌分离+抗体细菌增殖+抗体E1ISA+抗体FMIA+抗原IHC+抗原RT-PCR+DNA表1诊断方法和检测结果结果通过同时做IHC检测和直接细菌培养，170份经福尔马林固定的组织石蜡切片样品中有25份（14.7%）的IHC检测结果不一致，IHe实验表现出对检测丹毒病原的高敏感性和特异性。一对一比较细菌分离和细菌增殖的结果，发现增殖培养的敏感性更高，尤其是利用CAN琼脂培养，466份样品中，细菌分离鉴定出38份阳性（8.2%）,而细菌增殖培养鉴定出360份阳性（77.2%）o分别用实时PCR、增殖培养和常规PCR来检测实验感染丹毒猪的不同组织（脾脏、肺脏、心脏、扁桃体、肝脏、肾脏）

3、，结果显示实时PCR和增殖培养敏感性更高。37份样品中，实时PCR检测法和肉汤培养增殖法都检测出27份呈阳性。唾液样品中，实时PCR检测是所有检测方法中最敏感的一种（图1）,100%实验感染猪都成功分离出猪丹毒杆菌，然而在接种丹毒杆菌后4-8天，实验猪的血清和唾液中仅有25%检测到IGM和IgG抗体（图1）o图1：接种丹毒杆菌不同天数后猪唾液样品的4种方法检测结果（1-28）M=IGM抗体检测。FM1A=荧光启示1在实验室诊断中不管是利用细菌增殖法还是实时PCR检测法都能在不同样品中成功检测出猪丹毒。2 .在使用抗生素治疗的猪群中，IHC检测将是替代细菌培养的另一种更好的检测方法。3 .唾液检测猪群丹毒杆菌是一种快速检测的方法，而且唾液采样相对简单，可操作性强，同时也适合长时间监测IgM和IgG抗体水平。