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1、新型冠状病毒核酸检测临床标本的处理(核酸纯化)程序1 .目的保证标本处理标准化、规范化,使不规范操作因素对实验结果造成的影响减至最小。2 .范围新冠病毒核酸提取。3 .职责新冠病毒标本检测项目的工作人员按此文件操作执行。4 .工作流程4.1 接收样本在接收样本前,检测人员需要按照三级防护标准穿戴好,然后用75%的乙醇对实验室内的生物安全柜的空间和台面以及核酸提取仪等进行消毒,还需对标本转运箱进行消毒,并核对被检样本姓名、性别、年龄、编号及检测项目等,待确认转运箱完好后将其放入生物安全柜。4. 2病毒灭活采用56干浴灭活,时长35分钟。病毒灭活后为避免开盖后气溶胶污染实验室和检测人员,常温静置1
2、5分钟以上再执行下一步操作。如果使用含胭盐的采样管,胭盐会对病毒起到灭活作用,可以省去56干浴灭活步骤。4. 3核酸提取1)标本操作人员穿戴三级防护用品,在生物安全柜内将离心管依次编号。2)取出病毒提取试剂,对应标本编号。3)用旋涡混匀器对标本进行混匀,把可能含有病毒核酸的细胞从拭子标本中洗脱下来。4)在生物安全柜当中,一人开盖,一人加样,用移液器加混悬液200uL标本到提取液当中。5)裂解裂分钟。6)把裂解好的核酸提取盒放入半自动核酸提取仪当中,按预先设置好的程序提取核酸。7)核酸提取完成后在生物安全柜内,将提取的核酸加至PCR扩增反应体系。4.4 核酸分析,等待结果在生物安全柜内,将提取的核酸加至PCR扩增反应体系,然后将构建好的扩增体系放入扩增仪,进行核酸扩增后分析。4.5 消毒,废物处理一系列步骤完成后,需要对实验废物进行处理,并对实验仪器、桌面、地面进行消毒。待检测结果出来后,对检测到的可疑阳性样本按GLSC_09-7XXXX医院新冠标本核酸检测与报告流程对检测结果进行复核上报。5相关记录5. 1 YCXZYY/JYK-JL-SOP 18-35-01 附表 21 PCR 实验室流程图