包医大生药学实验指导.docx

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1、生药学实验指导实验室规则一、实验前必须结合讲课的内容预习实验指导，明确实验目的、要求、内容和方法，准备好实验用具。否则不准进入实验室。二、实验课不许迟到、早退、无故缺席，如有特殊情况不能参加实验者，必须事前请假，并转告指导老师。三、在实验课中，要有秩序的、认真仔细的操作，严格执行操作规程，实事求是，独立完成，每次试验要求按时完成作业，不得抄袭。四、爱护室内一切实验仪器、标本、切片及用具，不准私自带出实验室，如有损坏应及时报告教师并登记。五、学生对号入座，显微镜也必须对号固定使用，每次使用前后要检查，如有问题向指导老师报告，不得任意拆卸。六、保持实验室肃静，实验室不得随意走动，大声喧哗，未经允许

2、不得随意离开实验室。七、保持实验室整齐清洁。仪器和物品用完后立即放回原处，不得随意乱放，用过的吸水纸、擦镜纸、火柴梗等也要放在自己桌面的左上角，不许随地乱丢。八、实验结束后，清洗实验用具，放置原处，值日生清扫卫生，擦净黑板，关好门、窗、水、电及完成指定工作后，方可离开实验室。实验一生药的理化鉴定一、实验目的1、掌握生药中糖类、首类化学成分的理化性质和定性反应，并能应用于生药鉴定中，以确证生药中这些成分是否存在。2、了解糖类及昔类主要鉴别反应的原理。3、掌握生药中生物碱、糅质、氨基酸和蛋白质的理化性质和定性反应，并能应用于生药鉴定中，以确证生药中这些成分是否存在,了解主要鉴别反应的原理。二、实验

3、材料党参、槐花（槐米）、大黄、夹竹桃叶、桔梗、百部、五倍子、儿茶、白芷三、实验内容与步骤1、单糖、多糖和昔类成分的鉴别取党参粗粉05g,置于50m1三角烧杯中，加蒸储水IOm1,瓶口放一小漏斗（空气冷凝，防止水分蒸发太多），水浴温热数分钟，滤过，药渣加适量水，再过滤，合并滤液至Iom1,备用。（1）费林试验（Feh1ing试验）：取滤液ImI于50m1烧杯中，加碱性酒石酸铜试剂（Feh1ing试齐D8m1（临用时由甲液和乙液混合而成，置于水浴加热5分钟，观察有无病红色沉淀产生，如有沉淀，表明含还原糖），在整个反应过程中，反应液应保持蓝色，否则应适当添加Feh1ing试剂至蓝色不褪，继续加热5分

4、钟，放冷，滤过，滤液加10%盐酸,使反应液的PH为12,再加沸水浴加热10分钟(水解)，放冷,加10%氢氧化钠试液,使反应液呈中性，再加Feh1ing试剂8m1,沸水浴加热数分钟，观察有无砖红色沉淀产生(如有沉淀，表明含有多糖或昔类)。记录水解前后沉淀量的多少(以+示很多，以+示较多，以土示很少来表示)。(2) -蔡酚试验(MOIiSCh试验)：取滤液ImI于大试管中，加Q-蔡酚试剂2-3滴，摇匀，沿管壁缓缓滴加浓硫酸Im1轻放试管架上，保留两层液面，观察两液面交界处有无形成紫红色环。2、意昔的鉴别(1) Bomtrager反应取大黄粉0.2g置试管中，加入10%的NaoH试液4m1,振摇，溶

5、液即呈红色，滤过，滤液加10%HCI使中和，溶液变黄色；再加乙醛2m1,振摇使之分层，醛液呈黄色，吸取酸液层置另一试管中，加氢氧化钠试液1m1,振摇后碱液又显红色。(2)醋酸镁反应：取大黄粉末0.2g于试管中，加乙醇3m1,水浴温热5分钟，滤过，得滤液，力口1%醋酸镁甲醇溶液2滴，振摇后观察，溶液渐呈橙红色。(3)微量升华：取大黄粉末少许于金属圈内，小火徐徐加热数分钟，可见黄色升华物附着载玻片上，将玻片取下翻转后，在显微镜下检视，低温升华时可见针状结晶；高温时可见羽状结晶。3、黄酮昔的鉴另J:(1)取槐米粗粉0.5g,加乙醇IOm1,水浴温热5分钟，滤过，得滤液。盐酸-镁粉还原反应：取上述滤液

6、2m1于试管中，先滴加盐酸2-3滴，再加镁粉少许振摇，产生许多气泡，同时溶液渐变樱红色。(2)三氯化铝反应：去上述滤液2m1于试管中，力口1%三氯化铝甲醇溶液1m1,振摇，可见溶液渐变鲜黄色。4、皂昔的鉴别：取桔梗粗粉1g,置于50m1三角烧瓶中，加生理盐水15m1,在水浴上加热20分钟，滤过：(1)泡沫反应取上述滤液2m1,置试管中，密塞或以手指压住管口，强烈振摇数分钟，观察是否产生大量泡沫，放置10分钟后，再记录泡沫的高度。(2)溶血试验取上述滤液ImI和生理盐水Im1分别置于试管中，各加2%红血球悬浮液3-5滴，摇匀后放置，注意观察哪支试管溶液变清而透明。(示溶血现象)(3) 1iber

7、mann反应：取柴胡粗粉1g,置锥形瓶中，加70%乙醇10m1,于水浴中温热数分钟，滤过，滤液置蒸发皿中，水浴蒸干，放冷，加处酊ImI溶解，并转入小试管中，沿管壁加浓硫酸1m1,两液面的交界处显紫红色环。取夹竹桃叶粗粉2g,加70%乙醇15m1,再加10%醋酸铅2m1,在水浴上煮沸5分钟，滤过：(I)Kener-KiIiani反应：取夹竹桃滤液2m1于蒸发皿中，水浴蒸干，加三氯化铁-冰醋酸试液ImI使残渣溶解，并转入小试管中，沿管壁缓缓滴加浓硫酸Im1观察两液面交界处有无棕色环产生，冰醋酸层显蓝绿色(-去氧糖反应)。(2)Kedde反应：取滤液5m1,加新配制的2%3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液

8、1m1,再加5%氢氧化钾溶液数滴，溶液显紫红色。6、生物碱的鉴别取百部粗粉1g,置50m1三角瓶中，力口1%盐酸15m1,振摇15分钟，滤过。将滤液分装于6支小试管中，每试管Im1其中一支作为空白对照，其余分别滴加下表中生物碱沉淀剂各2滴，观察沉淀颜色与数量(以+,+,+表示)碘化秘钾碘一碘化钾碘化汞钾硅鸨酸磷铝酸百部提取液分别取五倍子，儿茶粗粉各2g,加水20m1,40-50C水浴加热20分钟，冷却，滤过，五倍子滤液和儿茶滤液分别各置5支试管，依次加入下述试剂，观察溶液变化。试剂五倍子（可水解糅质）2m1儿茶（缩合鞋质）2m1醋酸铅试液2滴明胶试液3滴三氯化铁试液3滴饱和滨水2滴8、香豆素类

9、的鉴别异羟后酸铁反应：取白芷粗粉0.5g,置具塞试管中，加乙醴3m1振摇5分钟后，静置约20分钟，取上清液Im1于另一试管中，加7%盐酸羟胺甲醇溶液与10%氢氧化钠甲醇溶液各23滴，摇匀，水浴温热12分钟，冷后加10%的盐酸，使PH为34,再加1%三氯化铁乙醇溶液12滴，溶液呈紫红色。四、作业记录各鉴别反应的步骤结果，并说明反应原理（可用化学反应式五、思考题1、Feh1ing反应中，水解前后产生CU2O沉淀的主要成分是什么?2、怎样鉴别某生药含单糖、多糖或甘类中的糖成分？3、具有什么基团的意醒类成分与氢氧化钠溶液反应才显红色？为什么？4、如何区别某生药所含皂甘是三菇皂昔还是留体皂昔？5、如何确

10、证某一生药中存在生物碱类成分？6、如何鉴别可水解糅质与缩合糅质？7、异羟后酸铁反应开始时，加碱性试剂的作用是什么？实验二生药中水分及灰分的测定一、实验目的1、掌握烘干法及甲苯法测定生药中水分含量的方法，了解减压干燥法测定水分含量的方法。2、掌握生药中总灰分与酸不溶性灰分的测定方法。3、了解生药中水分，总灰分与酸性不溶性灰分测定的意义。二、实验材料大青叶Fo1iumIsatidis,当归RadisAnge1icaeSinensis,大黄RadixetRhizomaRheio三、实验方法1、烘干法测定水分取大青叶碎片（直径不超过3mm）约5g,平铺于干燥至恒重的扁形的称重瓶中，厚度不超过IOmm,

11、精密称定重量（W1）,打开瓶盖在IO（M05干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30,精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止（W2）。根据减失的重量，计算样品中含有水分的百分数。生药中水分含量二W1-W2/W1*100%2、甲苯法测定水分（1）安装仪器。（2）洗净全部仪器，置干燥箱内烘干，备用（3）将甲苯置分液漏斗中，加少量水充分振摇，放置，分去水层，甲苯蒸储后备用。（4）取当归粗粉适量（相当于含水量24m1）,精密称定，置A瓶中，加甲苯约200m1,必要时加玻璃珠数粒，将仪器各部分按图连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A

12、瓶置电热套中或用其他适宜方法加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟储出2滴。待水分完全储出，即测定管刻度部分的水量不在增加时，将冷凝管内部分先用适量甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸镯5分钟，放冷置室温,拆卸装置，如有水黏附在B管上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离。读取水量，并换算成样品中含有水分的百分数（VW）o1、总灰分的测定取大黄粗粉3-5g（如不需要测定不溶性灰分，可取供试品2-3g）,置已炽热至恒重的生期中，称定重量（准确至0.0Ig）,缓缓炽灼，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500-600C,使完全灰化并至

13、恒重。根据残渣重量，计算大黄中含灰分的百分数。2、酸不溶性灰分的测定取上项所得的灰分，在用堪中小心加入稀盐酸9-11m1,用表面皿覆盖用烟，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5m1冲洗，洗液并入片烟中，用无灰滤纸滤过，f蜗内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸至同一地烟中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供品中含酸不溶性灰分的百分数。四、实验作业1、分别记录大青叶与当归的水分测定过程，并计算它的水分含量。2、记录灰分测定实验步骤，并分别计算大黄中总灰分与酸不溶性灰分的含量。五、思考题1、试述甲苯法测定生药中水分的原理。2、试述测定酸不溶性灰分的意义与原理。实验

14、三生药中挥发油的含量测定一、实验目的1、掌握生药中挥发油含量测定的方法2、了解生药中挥发油含量测定的意义二、实验材料薄荷HerbaMenthae三、实脸方法根据挥发油的相对密度大小不同，挥发油的测定有甲、乙两种方法。甲法适用于测定相对密度在1O以下的挥发油，乙法适用于相对密度在1O以仁的挥发油。（1）甲法取薄荷（约5mm的碎段）适量（约相当于含挥发油05TQ侬称定重量（准确至O.rg）,置烧瓶中，每:1oOg供试品加水699m1与玻瑞珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充满发油测定器的刻度部分，并滥流入烧瓶时为止,置电热套中或其他适宜的方法缓缓加热至沸,并保持微

15、沸约3小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面约5mm处为止。放置1小时以上，再开启活塞使油层下降至上端恰与刻度O线平齐,读取挥发油体积，并计算样品中含挥发油的百分数(V/W)。样品中挥发油的含量(m1g)j1x1。%(2)乙法取水约30OnI1与玻璃珠数粒，置烧瓶中，连接挥发油测定器。自测定器上端加水充满刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，再用移液管加入二甲苯1m1,然后连接回流冷凝管。将烧瓶内容物加热至沸腾，并继续蒸储,其速度以保持冷凝管的中部呈冷却状态为度o3。分钟后，停止加热，放置工S分钟以上，读取二甲苯的体积。然后照甲法自取供试品适量，依法测定，自油层体积中减去二甲苯的体积，即为挥发油体积，再计算供试品中含挥发油的百分数。样品中挥发油的含量(m1g)=J1x1。%四、作业简要记录所测生药中挥发油的测定步骤，并计算含量。五、思考题测定挥发油的过程中，影响测定结果的因素有哪些?实验四根类生药一一黄黄黄茜AStfagaIiRadix一、实验目的1、掌握黄茂生药性状。2、掌握黄茂横切面组织特征。二、实验材料蒙古黄芭原植物标本生