河医大生药学实验指导.docx

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1、生药学实验指导目录实验一生药的理化鉴定(1)(25)实验二生药的理化鉴定(2)(29)实验三冬虫夏草、茯苓、贯众、麻黄等生药鉴别(33)实验四大黄、何首乌、黄连，川乌、白芍等生药的鉴定.(36)实验五淫羊蕾、防己、厚朴、五味子、肉桂等生药的鉴别.(39)实验六延胡索、板蓝根、大青叶、山楂苦杏仁等生药的鉴别(42)实验七黄苗、甘草、槐米、黄柏等生药鉴别(45)实验八人参、三七、沉香、丁香等生药鉴别(48)实验九当归、川苜、柴胡、白芷、小茴香、马钱子等鉴别(51)实验十龙胆、薄荷、丹参、黄苓等生药鉴别(54)实验十一洋金花、地黄、金银花、天花粉等生药鉴别(57)实验十二桔梗、茵陈、红花、苍术、木香

2、等生药鉴别(60)实验十三麦冬、知母、砂仁、半夏、天麻等生药鉴别(63)实验十四动物、矿物类生药(67)实验十五中成药的显微鉴定(69)实验十六生药的综合鉴定(71)附录一显微绘图法(72)附录二显微测量法(75)附录三组织透化法(78)附录四常用试剂及配置方法(79)附录五石蜡切片法(82)实验一生药的理化鉴定（一）一、实验目的（一）掌握生药中糖类、苔类成分与氟昔、酚昔、慈昔的理化性质和定性反应并能应用于生药鉴定中，以确证生药中这些成分是否存在。（二）学会生药理化鉴定的常用方法。（微量升华法、灰分测定法）二、实验材料、仪器及试剂党参、玉竹、苦杏仁、牡丹皮、虎杖、大黄、三七试管架、试管、量筒、

3、具塞试管、烧杯、三角烧瓶、水浴锅、吸管、滤纸、小漏斗。马福炉、天平、土甘锅、干燥皿、Feh1ing试剂、-蔡酚试剂、10%的盐酸试液、10%氢氧化钠试液、苦味酸钠试纸、氢氧化钾试液、硫酸亚铁试液、稀盐酸试液、1%三氯化铁、5%三氯化铁试液、醋酸镁甲醇溶液、浓硫酸。三、实验内容与方法1、单糖、多糖与昔类成分的鉴别取玉竹05g,剪碎，置50m1三角瓶中，加蒸储水IOmI,瓶口放一小漏斗（空气冷凝，防止水分蒸发太多），水浴温热10分钟，滤过药渣加适量水，再滤过，合并滤液至10m1,备用。（1）费林（Feh1ing试验）试验：取滤液Im1于50m1烧杯中，加碱性酒石酸铜试剂（Feh1ir1g）试齐J8

4、m1（临用时由甲液与乙液等量混和而成，置沸水浴加热5分钟，观察有无破红色沉淀产生（尤其要观察瓶壁处）。反应原理：WWW.mcd1zbcomNMXJO-C-C-000K*G40H1.一NQOCC-C-OOOK2M)II1IOHOH00WHHCC-0HO-Ce-CooKIHO-CIHCI。/X)OHj.2廿、*2HQ一嬲1！*-0AOyJH/I1HCC-OK（2）-蔡酚试验（MOIiSh试验）：取玉竹粉末0.51g,加蒸储水IOmIo水浴温热5IOmin,滤过，取滤液Im1于大试管中，加-蔡酚试剂23滴，摇匀，沿管壁，缓慢加入浓硫酸Im1,保留二层液面，观察二液面交界处有无形成紫红色环。反应原理：

5、2、氟昔的鉴别(1)苦味酸钠试验：取苦杏仁1粒，研碎后置具塞试管中，加水数滴湿润，管口悬挂苦味酸钠试纸，密塞，将试管置60水浴中温热，观察试纸逐步由黄变红。(2)普鲁士蓝试验：取苦杏仁1粒，研碎后置试管中，加水数滴湿润，立即用滤纸包扎管口，并加氢氧化钾试液1滴使湿润，将试管置60C水浴温热约10分钟后，于试纸上加硫酸亚铁溶液1滴，并加稀盐酸和5%三氯化铁试液各1滴，滤纸即显蓝色。3、酚昔的鉴别取牡丹皮0.5g,加乙醇5m1,水浴温热5分钟取上清液2m1于试管中滴加1%三氯化铁试剂1滴，即呈紫红色。反应原理：ROH+(Fe(H2O)6)3+Fe(H2O)5(ROH)3Fe(H2O)5RO2H3O

6、(ROH示丹皮酚)4、意音的鉴别(1)碱液反应：取大黄粉少许于小试管中，加10%氢氧化钠试液，即呈红色，继续加10%盐酸使中和，药液变黄色，再加氢氧化钠试液又显红色。(2)BOrntrager(保恩特来格)反应：取大黄粉约0.5g于试管中，加10%氢氧化钠试液2m1,振摇后过滤，得红色滤液，加10%盐酸酸化后，溶液转为黄色,加乙醍2m1,振摇后静置分层，分取黄色的乙醛液于另一试管中，再加10%氢氧化钠试液Im1振摇匀后静置分层则碱液层又显红色。(3)醋酸镁反应取大黄粉末约0.2g于试管中加乙醇3m1,水浴温热5分钟，滤过，得滤液，加I%醋酸镁甲醇溶液2滴，振摇后观察，溶液渐呈橙红色。(4)微量

7、升华：如图5所示，取大黄粉末少许于金属圈内、小火徐徐加热数分钟，可见黄色升华物附着载玻片上，将玻片取下翻转后，在显微镜下检视，低温升华时可见针状结晶、高温时可见羽毛状结晶，滴加碱液后,结晶消失,并呈红色。5、生药中灰分的测定总灰分测定取粉碎后过二号筛的三七粗粉约3g,置炽灼至恒重的t甘埸中，精密称定(精确至0.01g),放马福炉中缓缓炽热，至完全灰化时,逐渐升温到500600oC1完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算三七中含灰分的百分数。酸不溶性灰分的测定取上面所得灰分加入稀盐酸约IOmI1用表面皿覆盖，水浴上加热10分钟，表面皿用5m1热水冲洗，洗液入用堪,用无灰滤纸过滤，蛆堪内残渣用水洗于滤

8、纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。将滤渣连同滤纸移至同一用堪内，干燥并炽灼至恒重。根据残渣重量，计算三七中含酸不溶性灰分的百分数。BSGa升华装篁QfiUa片a令的J金奥片a中川小孔豺石格物四、实验报告1 .记录各鉴别反应的步骤与结果，并说明反应原理（可用化学反应式表示）。2 .计算出三七的总灰分、酸不溶性灰分的百分含量。五、思考题1 .怎样鉴别某生药含单糖、多糖或昔类成分？2 .灰分测定的原理是什么？3 .总灰分和酸不溶性灰分与生药品质的关系是什么，举例说明。实验二生药的理化鉴定（二）一、实验目的（一）掌握生药中黄酮昔类、皂苔类、强心昔类、香豆精昔类的理化性质和定性反应，并能应用于生药鉴

9、定中。（二）掌握生药中生物碱类、糅质类、氨基酸与蛋白质类的理化性质和定性鉴别反应。（三）学会应用荧光分析法、薄层层析法，水份测定法鉴别生药。二、实验材料、仪器及试剂槐米、桔梗、穿山龙、地高辛片（tabe11aedigoxin）s白芷、粉防己、硫酸阿托品注射液、五倍子、槟榔、天花粉。试管、试管架、量筒、烧杯、水浴锅、50m1三角烧瓶、滤纸、蒸发皿、紫外分析灯、硅胶板、层析瓶。乙醇、1%盐酸、碘化锄钾试剂、碘化钾碘试剂、碘化汞钾试剂、硅铝酸、明胶氯化钠溶液、三氯化铁试剂、饱和漠水、醋酸铅试剂、饱和石灰水、苗三酮试剂、10%氢氧化钠溶液、0.5%硫酸铜试剂、镁粉、1%三氯化铝甲醇液、10%盐酸试液、

10、0.9%氯化钠溶渡，2%红细胞悬浮液、醋酢、浓硫酸、冰醋酸、三氯化铁-冰醋酸试剂、K-K试剂、3,5-二硝基苯甲酸乙醇试液、乙醍、7%盐酸羟胺甲醇溶液、20%氢氧化钾甲醇溶液、稀盐酸、1%三氯化铁乙醇溶液、甲苯、醋酸乙酯、甲酸。槐花乙醇提取液、远志生理盐水提取液、夹竹桃醇提取液、粉防己酸性乙醇液；核桃楸皮、秦皮和秦皮甲素乙醇提取液。三、实验内容与方法1、黄酮苔的鉴别取槐米粗粉约0.5g,加乙醇IOmI,水浴温热5分钟，滤过，得滤液。(1)盐酸-镁粉还原反应：取上述滤液2m1于大试管中，加镁粉少许振摇，滴加浓盐酸数滴，观察到产生许多泡沫，同时溶液渐变樱红色。(2)三氯化铝反应：取上述滤液2m1于

11、试管中，加1%三氯化铝甲醇溶液Im1,振摇，可见溶液渐变鲜黄色。2、皂昔的鉴别取桔梗与穿山龙粗粉各Ig,分别置50m1三角烧瓶中，加水IOmI,煮沸2分钟，滤过，滤液加水至IOmI,备用。(1)泡沫试验：分别取上述滤液各2m1,置2个试管中，密塞或以手指压住管口，强烈振摇数分钟，观察是否产生大量泡沫，放置10分钟后，再记录泡沫的高度。另取桔梗与穿山龙滤液各4m1,分置4支试管中，每支2m1滤液其中一支桔梗与一支穿山龙滤液中分别加10%盐酸试液调节PH为I,另一支桔梗与另一支穿山龙滤液中分别加10%氢氧化钠试液调节PH为13,将酸碱两管滤液同时强烈振摇数分钟，观察泡沫高度。可见桔梗溶液的酸碱两管

12、泡沫高度相同。而穿山龙碱液管的泡沫比酸液管高。(2)溶血试验：取远志生理盐水提取液2m1置一试管中，另取一试管加0.9%NaC1溶液2m1,于二支试管中分别加2%红细胞球悬浮液Im1,摇匀后放置，注意观察哪支试管溶液变清。3、强心昔的鉴别分别取新鲜夹竹桃叶1片剪碎与地高辛3片，各置50m1三角烧瓶中，加70%乙醇IOmI,用空气冷凝装置水浴加热5分钟，滤过，得滤液，并加水至IOmI,备用。(1)-去氧糖反应(KHIer-KiIiani反应)：取夹竹桃滤液2m1于蒸发皿中.水浴蒸干，加三氯化铁-冰醋酸试液Im1使残渣溶解，并转入小试管中，沿管壁缓缓滴加浓硫酸Im1,观察两液层交界处有无棕色环产生

13、，上层醋酸液呈何颜色?另取地高辛滤液2m1,同样操作，观察结果。(2)3,5-二硝基苯甲酸反应(Kadde反应),取滤液Im1于试管中滤液中加新配制的3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液ImI,观察溶液是否变成紫色。反应原理(C17上不饱和内酯环反应)4、生物碱的鉴别取粉防己粗粉0.5g,置50m1三角烧瓶中，加乙醇15m1用空气冷凝装置、水浴回流10分钟，滤过。滤液置蒸发皿中，于水浴蒸干，残渣加1%盐酸5m1使溶，滤过，滤液分置4支小试管中，每试管Im1,分别滴加下表中生物碱沉淀剂各2滴,观察沉淀的颜色与数量（以+、+、+表示）。同时取4支去硫酸阿托品注射液，启封后按下表滴加生物碱沉淀剂，并记录反应

14、结果。沉B沉C剂J色-C产N茎店j-金A碘化秘钾碘化钾碘碘化汞钾硅鸨酸粉防己提取液硫酸阿托品注射液5、荧光分析法：取秦皮，核桃核桃楸皮粉末各Ig,放入三角烧瓶中，分别加入乙醇IOmI,水浴回流提取IO分钟，放冷过滤。滤液作供试品。另取秦皮甲素（七叶树苗），加乙醇制成每Im1含5mg的标准液做对照品。将三者分别点于滤纸上，置365nm紫外分析灯下观察荧光反应。6、薄层层析法：（两人做一份）样品、标准品的制备：同荧光分析法。制板取硅胶G2克加入0.5%竣甲基纤维素钠的水溶液6m1,搅拌均匀，倒在6cmX22cm干净的玻璃板上铺匀，放置水平位置，自然干燥，干后于105。C活化一小时，活化后置干燥器中

15、备用。展开剂：甲苯：醋酸乙酯：甲酸：乙醇=3:4:1:2点样：距玻璃板下端一厘米处，分别点上秦皮、核桃楸皮的提取液及秦皮甲素的标准液。展开方式：倾斜上行法。展距约15cm。晾干后，置365nm紫外分析灯下观察荧光斑点并描绘出层析图谱，计算秦皮甲素的Rf值。7、水分测定法（甲苯法）当归约50go水分测定装置一套，如图6.【实验内容、方法及步骤】1甲苯的制备取甲苯约25Om1,加少量蒸储水振摇，放置后弃水层.再蒸储甲苯后备用。2、测定取经粉碎的当归粗颗粒约20g,精密称定（准确至0.01g）,置A瓶中，加甲苯约20m11如图连接，再从冷凝管顶部加甲苯充满B的狭窄部分,将A置可调温电热套中加热至苯沸腾调节温度使2滴/秒至B管的水量不再增加，将冷凝管内部用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷把管壁上的甲苯推下，继续蒸僧5分钟，放冷至室温，待水分与甲苯完全分离，检读水量，并换算成当归中含有水分的百分数。生药中的水分含量%=【水分量m1)样品量g)100%四、实验报告1、记录有关鉴别反应、