河医大生药学实验指导19组织透化法.docx

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1、附录三组织透化法中草药的组织构造，常因细胞内含有多量的内含物、色素或因细胞皱缩而看不清楚，须用适当的试剂处理。以溶解、除去或使细胞内含物变为透明，或使色素氧化退色，以及使细胞膨胀而透明以利观察。这种试剂称组织透化剂，常用透化剂主要有两类：（一）稀甘油：能浸润渗入细胞壁或其内含物中，由于它们的折射率比水高，因而起到使组织透化的作用。（二）水合氯醛溶液：为最常用的透化剂，能迅速渗入组织，使干燥而收缩的细胞重新膨胀，并能溶解多数细胞内含物如淀粉、蛋白质、叶绿素、挥发油、树脂等，而使细胞组织变得通明、清晰。水合氮醛溶液制透化标本片：方法I：将需透化观察的材料放在载玻片上，加水合氯醛溶液I2滴，加盖玻片

2、，在小火焰上缓缓加热，火焰高度Icm为宜，不超过2cm,加热时用手拿住载玻片一端的两侧，保持载玻片的水平状态，在火焰上缓缓地左右移动，保持透化液微沸腾状态并随着透化液蒸发随时由盖玻片一侧补充液体（此时应注意勿使火力过猛，以免液体突然汽化而使盖玻片崩落、破碎）。加热约1分钟左右可放置待凉后在显微镜下检查,若透化不完全，可再反复加热,直至材料透明。方法2:为避免盖玻片崩落。透化时也可不加盖玻片。于材料上滴加水合氢醛溶液后，同上法用手拿住载玻片在小火焰上缓缓加热，此时因水合氯醛蒸发快，必须随时补加液体或蒸储水，以免析出结晶，直至材料透明，放冷，盖上盖玻片，再行观察。若材料较大，且厚，如叶片、萼片、花瓣等用上法不能使材料完全透明时，可剪取所需材料8mm见方小块放在试管中，加透化液23m1,在沸腾的水浴中加热约15-20分钟，至材料呈现透明时，将材料小心取出放载玻片上，切成小块，加透化液盖上盖玻片即可观察。