石大药用植物学实验指导.docx

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1、药用植物学实验指导（供药学和中药学专业使用）药学院二零年月基本知识和技能(1-13)一腊叶标本的制作O1二显微镜的使用与保养()2三中药显微标本的制作技术()6四、绘图技术()10五、细胞壁及后含物的显微化学鉴别法()13实验一显微镜的使用和植物细胞构造()14实验二质体、淀粉粒及显微测量法()17实验三菊糖和草酸钙晶体()20实验四分生组织、保护组织和分泌组织()22实验五机械组织、输导组织及维管束类型()24马义/()27实验七茎()28第佥八叶()30翅佥九花()31实验十果实和种子()34实验十一蓼科、毛葭科、十字花科()36实验十二蔷薇科、豆科、伞形科()37实验十三唇形科、茄科、菊

2、科()39实验十四天南星科、百合科、兰科()40附录常用试剂配制基本知识和技能-腊叶标本的制作（一）标本的压制将采得的标本，压在标本夹（夹板）内适当的时间（依据材料的不而异）后用纸更换，并加整理。整理时要使花、叶展平、形态美观，不能使多数叶片重叠要压有正面叶片，也要压反面叶片。落下来的花、果或叶片，要用小纸袋装好，袋外写上该标本的采集号，并与标本放在一起，以后贴在台纸上。标本与标本之间须隔数层吸水纸，夹在标本夹内，并加适当的压力，用粗绳将标本夹捆起放在通风处。次日换干纸时，须再仔细加工整理标本。以后每日均需更换干纸至少一次,并应随时再加整理。在第三日换干纸后，捆紧标本夹后放在日光中，使水份迅速

3、蒸发以防止标本过度变色或发霉。通常在北方干燥地区，约换干纸78天后，标本即可干燥。若遇阴雨天，可用微火烘烤。换下的湿纸，要及时放日光中晒干或用火烤干，以备换纸时用。肉质的球茎、鳞茎、果实可切开压制。南方多雨地区，每日应换千纸二次，并可放在微火上烘烤。已干的标本要及时提出另放，即每隔一张单纸放一张标本。并应将同号标本放在一起，外用一张单纸夹起，在夹纸的右下角，写上该号标本的采集号。最后小心地将每包标本用细绳捆好，放在干燥通风处。（二）标本的消毒野外带回的标本或外单位交换来的标本，往往带有害虫卵或霉菌抱子。故在标本入柜之前必须进行消毒，消毒方法可用升汞（HgC12）的千分之二至千分之五的乙醇溶液放

4、在搪瓷盘内，将标本浸透静置5min左右，用夹子夹取，放在干的吸水纸中，压干后即可上台纸。升汞有剧毒，操作时应注意房间通风，切忌用手直接操作，要带胶皮手套和口罩，操作后要洗手以免中毒。剩余消毒液要妥善保管。（三）标本的装订己经消毒的标本，用毛笔将胶水（最好用植物胶）刷在标本背面，花的部分不必上胶以便解剖观察花部形态。然后移贴台纸上（可用约40cm义30cm的厚卡片纸），稍加压力，放置干。贴时应注意在左上角和右下角分别留出贴野外记录签和定名签的位置。然后用纸条（或线）将叶片和植物粗壮部分穿钉固定在台纸上即成。（四）标本的鉴定标本经过分科、分属和分种鉴定后，可将定名签贴在台纸右下角，野外记录签贴在左

5、上角，最后可加贴一张薄而韧性强的封面衬纸以免标本互相磨擦损坏，这样即成为完整的标本。随后将同种植物标本放在一起，用一种夹夹起（可用牛皮纸按台纸大小制作）并在种夹外注明该种植物学，按科、属顺序放大标本柜中密闭保存。柜中可放入一些樟脑球防虫。整个标本室可用硫酿氨或澳代甲烷熏蒸消毒但消毒要打开窗户通风数日方可进入。二显微镜的使用与保养（一）显微镜的类型显微镜是研究植物细胞结构、组织特征和器官构造最常用的重要仪器。显微镜的类型很多，主要分为光学显微镜和电子显微镜两大类。根据其功能的不同，光学显微镜又分为普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜和荧光显微镜等。普通光学显微镜一一是由一组光学放大系统和机械

6、支持及调节系统组成。以可见光作光源，用玻璃制作透镜的显微镜，可分为单式显微镜与复式显微镜两类。单式显微镜由一个透镜组成放大倍数在10倍以下。构造稍复杂的单式显微镜为解剖显微镜，是由几个透镜组成，其放大倍数在200倍以下。复式显微镜至少由两组以上透镜组成，是植物形态解剖实验最常用的显微镜，其有效放大倍数可达1250倍。相差显微镜一一是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差（即相位差）转化为光强差的特种显微镜。其特点是利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差转化为人眼可以分辨的振幅差，从而使活体透明标本清晰可见。暗视野显微镜是一种通过观察样品受侧光照射时所产生的散射光来分辨样品细节的特殊显微镜

7、。其特点是不让光束由下至上地通过被检物，而是将光线改变途径，使其斜射投向被检物，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表反射或衍射光而形成明亮图像当照明光有足够的强度而背景黑暗时，这些散射光便可通过物镜和目镜被观察到，从而分辨出普通光学显微镜所不能分辨的的细节。荧光显微镜一一是一种通过观察样品受紫外线照射后所产生的荧光来分辨不同类型样品的特殊显微镜。多用于细菌的鉴别上。电子显微镜使用电子束作光源的一类显微镜。电子显微镜以特殊的电极和磁极作为透镜代替玻璃透镜，能分辨相距2A左右的物体，放大倍数可达80120万倍，其分辨力比光学显微镜大100。倍，是观察超微结构的重要精密仪器。（二）普通光学显微镜

8、的构造显微镜的种类虽多，构造繁简不同，但总的来说，都包括光学结构和机械装置两大部分。曜片更KJ1于轮*fK11*t-依例台嫌向0DF检喊智门横向苗竹T轮电源H大完fffMTT0图1-1双筒复式显微镜光学放大系统：由成像系统和照明系统组成。成像系统包括物镜和目镜，照明系统包括反光镜和聚光器。目镜：目镜插入镜筒的上端，通常由两个透镜组成，上面一个与眼睛接触的叫接目透镜，下面一个靠近视野的叫视野（会聚）透镜，在上下透镜的中间，有一金属制成的环状光阑或叫“视场光阑”。它的作用是把物镜放大的实象再放大一次并把物镜映入观察者的眼中。现在生产的显微镜，其目镜简外通常都刻有放大倍数。例如：5x、10x、20x

9、.等。物镜：安装在镜筒前端物镜转换器上的透镜，利用光线使被检物体第一次造像，因而直接关系和影响着成像的质量。对分辨力有着决定性的影响。物镜可分低倍、高倍和油浸物镜三种。物镜的性能可以从物镜外壳上标志着的数值孔径（numerica1apeature简写为NA）大小来表示。数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据。不同放大倍数物镜的数值孔径范围如表I-1所示。表1-1不同放大倍数物镜的数值孔径物镜倍数数值孔径（NA）低倍物镜1XWX0.04-0.15中倍物镜6250.15).40高倍物镜25X63X0.35-0.95油浸物镜90-1001.25-1.40物镜的放大倍数愈高它的工作距离愈小即

10、物镜最下面透镜的表面与盖玻片上表面间的距离就越小所以使用时要特别注意聚光器：位于载物台下，是由几个透镜组成，用来集中光线的。虹彩圈安装在聚光镜底部，它是一个其中安有可变扁平形的环，上有一特别的柄使其张开或关闭来调节光束的密度，使物象更清晰。虹彩圈下面为一金属圈制成的滤光片环。可以换放兰色、黄色或乳白色等滤光片，以改变日光或人工光源的色调和强弱，使之适合于观察。反光镜：位于聚光器的最下方，是由一面平一面凹的镜子所组成，镜面可作各种方向的翻转。其主要作用是改变照明的光线，使光线能射向聚光透视。平面镜在光线较强时使用，凹面镜在光线较弱时使用。2机械支持及调节系统显微镜的机械部分，是整个显微镜装配的骨

11、架，它是安装光学放大系统的基座。显微镜的机械部分包括镜座、镜柱、镜臂、载物台、物镜转换器、镜筒和调焦装置等。镜座：是显微镜的基座，用来支持整个镜体，使显微镜放置稳固。镜柱：位于镜座上的一个短柱，使用于支持镜臂及载物台的。倾斜关节：是连续镜臂与镜柱的，可调节镜体，使之成一定的角度，便于观察，一般倾斜度不超过30,以免中心后倾。镜臂：是显微镜的主要支持架，它由倾斜关节与镜柱及镜座连在一起，在使用时,可保持垂直和倾斜的位置。镜筒：为长圆形金属筒。上接目镜，下连物镜转换器。并使目镜和物镜的配合保持一定距离，镜筒能保护成像的光路和亮度，物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。镜筒长度的变化，不但放大倍率随

12、之变化，而且成像质量也受到影响。因此，使用显微镜时不能任意改变镜筒长度国际上将显微镜的标准筒长定为16Omm此数字标在物镜的外壳上。转换器：为接于镜筒下端的圆盘。可自由转动，盘上有34个安装物镜的螺旋孔当旋转转换器时，物镜即可固定在使用的位置上，保证物镜与目镜的光线合轴。调焦装置：用以调节物镜和标本之间的距离，得到清晰的物像。在镜臂两侧有粗、细调焦螺旋各1对（弯筒显微镜的调焦螺旋在镜柱两侧）旋转时可使镜筒上升或下降，大的一对为粗调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动2mm左右：小的一对为细调焦螺旋，旋转一周可使镜筒移动约0.1mm。使用低倍镜时，用粗调节器做粗略的调焦，调到隐约看到标本为止，然后改用细

13、调节器作精确调焦，使所观察的标本最清晰。使用高倍镜时要用细调节器，禁止使用粗调节器，以免损坏镜头。载物台：载物台也叫工作台或镜台。它的作用是安放载玻片。载物台中心有一个通光孔。载物台分固定式和移动式两种，移动式载物台上旋钮可左右前后移动。载物台的纵横坐标上都有游标尺，一般读数为0.Imm,（二）解剖镜的构造与使用1 .解剖镜的构造双筒解剖镜的构造上与普通光学显微镜相似，也分为机械装置和光学系统两部分，不过它的构造比较简单。机械装置有镜座、镜台、镜筒、支柱（立柱）和调节手轮等部分：光学系统有接目镜、接物镜和反光镜等部分（见图1-2）o双筒解剖镜具有两个镜筒、两个目镜和物镜，因此，使用时两眼可以同

14、时观察。在镜简的其中一个附有调整目镜筒（目镜调节圈），用以校正观察者的两眼间距离。双筒解剖镜只设有一对粗调焦手轮，进行焦距调节。按目镜和接物镜也有各种不同的放大率,一般双筒解剖镜的放大倍数，从几十倍至一百倍左右。在双筒解剖镜上有的有反光镜，有的缺反光镜；有的在镜身上附有照明灯。镜台上有一块厚玻璃板和一块一面白色一面黑色的瓷板，根据观察物的颜色和透明度可以调换使用。2.解剖镜的使用方法把解剖镜放在面向光源的位置，调节两镜筒间的距离，使适合自己的两眼间的宽度O如观察透明的标本，镜台选用玻璃板，光源由反光镜底下照射。如观察不透明的标本，镜台选用瓷板，深色标本用白色一面，浅色标本用黑色一面，光源以强光

15、或灯光从上面直接照在标本上，标本要观察的部位应转向光源。在解剖镜下，观察到的物象为一正立像，而且标本移动方向和物像的移动方向完全一致。图1-2双筒解剖镜1.目镜护罩2.目镜3.目镜调节环4.升降手轮5.缩紧螺钉6.活动支柱7.固定支柱8.镜身9.转盘10.大物镜11.压夹12.工作台板13.底座三中药显微标本的制作技术中药显微标本片根据制作目的可分为临时制片、半永久制片和永久制片三种。临时制片是供临时观察中药显微构造用，一般不作保存，制片简单，封藏剂（装置液）为水、稀甘油、水合氯醛等。半永久制片常用于需要保存一段时间的中药制片，保存时间为312个月，制片的封藏剂常用甘油冻胶。永久制片是作长期保存的标本片，如标准中药的标本片等，制作工序多，时间较长，制片的封藏剂常用加拿大树胶。（一）徒手切片法徒手切片法是中药显微鉴定中最常用的制片方法之一。其特点是工具简单，操作简便，无须特定场所，随看随制。切片用具有单面刀片、双面刀片、镒子、培养皿等。适用对象为中药横切面组织观察、纵切面组织观察、显微化学反应观察等。1 .临时制片法（1）取材：根据鉴定的要求，选取有代表性的药材样品进行制片。根类药