石大药用植物学实验指导02基本实验项目1实验一 显微镜的使用和植物细胞构造.docx

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1、实验一显微镜的使用和植物细胞构造目的要求：一、熟悉显微镜各部分的结构和功能。二、初步学会正确地使用显微镜和显微镜放大倍数的计算方法。三、记住使用显微镜时应注意的事项。四、了解细胞的形态及基本构造。五、学习表皮制片法及绘制植物细胞图的基本技术。用品：显微镜毛线纤维装片镜子解剖针刀片盖玻片碘液蒸饿水ZE1SS数码显微镜药用植物电子图片相册实验内容：(一)显微镜的使用方法及注意事项1 .观察前的准备(示教)(1)显微镜从显微镜柜或木盒内取出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，保持镜体直立，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。严禁用单手提着镜子走，防止目镜滑出。(2)将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘

2、约IOCm左右，右侧可放记录本或绘图纸。用显微镜观察时，必须用双眼，切勿紧闭二眼。要反复训练用左眼窥镜，右眼作图。(3)对光：一般可利用日光灯或自然光做光源，避用直射阳光。直射阳光会影响物像的清晰，损坏光源装置和镜头并刺激眼睛。对光时先把低倍镜转到中央，对准载物台上的通光孔，然后用左眼观察目镜中视野的同时，转动反光镜使视野的光线最明亮最均匀为止。如果靠近光源，或光线较强时，宜用平面的反光镜，如果光源较远或光线较弱时，宜用凹面的反光镜。当在镜筒内见到一个圆形而明亮的视野时，再利用聚光镜或虹彩光圈调节光的强度，使视野内的光线均匀而明亮。2 .低倍镜的使用镜检任何标本要养成必须先用低倍镜观察的习惯因

3、为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定要观察的位置。(1)放置切片：升高镜筒，把玻片标本放在载物台中央，使材料正对通光孔，然后用压片夹压住载玻片的两端。(2)调整焦点：两眼从侧面注视物镜，并慢慢按顺时针方向转动粗调焦螺旋，使镜筒徐徐下降至物镜离玻片约5mm处，用左眼或双目注视镜筒内，同时按反时针方向转动粗调焦螺旋使镜筒上升，直到看见清晰的物像为止(注意不可在调焦时边观察边下降镜筒，否则会使物镜和玻片触碰，压碎玻片，损伤物镜)。如一次看不到物像，应重新检查材料是否放在光轴线上，重新移正材料，再重复上述操作过程直至物像出现和清晰为止。为了使物像更加清晰，此时可轻微转动细调焦螺旋使物像最清晰,当细调焦

4、螺旋向上或向下转不动时.，即表明已达极限，切勿再硬拧，而应重新调节粗调焦螺旋，拉开物镜与标本间的距离，再反拧细调焦螺旋，约10圈左右(一般可动范围为20圈)。有的显微镜可把微调基线拧到指示微调范围的二条白线之间，再重新调整焦点至物像清晰为止。(3)低倍镜的观察：焦点调好后，可根据需要，移动玻片使要观察的部分在最佳位置上。找到物像后，还可根据材料的厚薄、颜色、成像反差强弱是否合适等再调节，如视野太亮，可降低聚光器或缩小虹彩光圈，反之则升高聚光器或开大光圈。(4)毛线纤维片的观察练习取一张毛线纤维装片，打开标本移动器的簧夹，把玻片标本放在镜台上用弹簧夹住，调节标本移动器的螺旋，移动玻片标本，使毛线

5、纤维的交叉点对准集光器的中央。左眼在目镜上观察，右手慢慢地转动螺旋，降低镜台(或升高镜台)。使低倍镜和镜台的距离慢慢地增大，直到视野中出现毛线纤维的物象为止，如果物象不清楚，可调节小螺旋，直到物象清楚为止。如果看不到毛线纤维的交叉点，可用左手调节标本移动器的螺旋，找到毛线纤维的交叉点。按照上述操作规程，反复，要求做到不用看实验指导就能够正确地使用低倍镜。转动物镜转换器，把高倍镜转到镜筒的下方。左眼在镜上观察，看视野内是否已经有了物象，如果有了物象,可调节小螺旋使它更加清楚，再将光线调节到适宜为止，如果看不到物象，就上下调节小螺旋，如果仍看不到，则按照高倍镜的使用方法重新练习，直到在高倍镜下能看

6、清晰为止。3 .高倍物镜的使用(1)选好目标：因高倍物镜只能将低倍视野中心的一部分加以放大,故在使用高倍镜前应在低倍镜中选好目标并移至视野的中央，转动物镜转换器，把低倍物镜移开，换上高倍物镜，并使之与镜筒成一直线(因高倍镜工作距离很短，操作要小心，防止镜头碰击玻片)(2)调整焦点：在正常情况下，当高倍物镜转正之后，在视野中即可见模糊物像，只要稍调动细调焦螺旋，即可见到最清晰的物像。初用一台显微镜时，要注意它的高、低倍物镜是否能如上述情况能很好配合，如果高倍物镜离盖玻片较远看不到物像时，则需重新调整焦点。此时应从侧面注视物镜，并小心转动粗调焦螺旋使镜筒慢慢下降到高倍物镜头几乎要与切片接触时为止，

7、(小心勿压碎玻片标本和损坏镜头)，然后再由目镜观察，同时转动粗调焦螺旋，稍微升高镜筒至见到物像后，换调细调焦螺旋，使物像更加清晰为止。(3)调节亮度：在换用高倍镜观察时，视野变小变暗，所以要重新调节视野的亮度，此时可以升高聚光器或放大虹彩圈。4 .油镜的使用在使用油镜之前，也要先用低倍镜找到被检部分，变换成高倍镜调整焦点并将被检部分移到视野中心，然后再换用油镜。油浸物镜的工作距离(指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离)很短，一般在0.2mm以内，再加上一般光学显微镜的油浸物镜设有“弹簧装置”,因此使用油浸物镜时要特别细心，避免由于“调焦”不慎而压碎标本制片，使物镜也受到损害。使用油镜时，可先

8、在盖玻片上滴加一滴香柏油，才能使用。用油镜观察标本时，绝对不许使用粗调焦螺旋，只能用细调焦螺旋调节焦点。如盖玻片过厚，必须换成薄片方可聚焦，否则会压碎玻片，损伤镜头。油镜使用后，应立即以拭镜纸蘸少许清洁剂乙酸和无水乙醇（7:3）的混合液擦去镜头上的油迹。5 .收镜观察结束，应先升高镜筒，转动物镜转换器，使物镜镜头与通光孔错开，取下玻片，再降下镜筒，并将反光镜还原成与桌面垂直，擦净镜体，罩上防尘罩。仍用右手握住镜臂左手平托镜体，按号放回镜箱中。（二）植物细胞构造的观察：用镶子撕其新鲜的洋葱鳞茎鳞叶内表皮一小块平铺于载玻片的水滴上，注意使表皮的光面向上，然后盖上玻片，用低倍镜观察，了解其大致的结构

9、情况。可见表皮由许多无色透明的细胞组成（每个细胞好象一个关闭的长方盒子，细胞核，细胞质及液泡等各部均不能很清楚的辨认）然后从镜台上取下装片,自盖玻片一端滴加稀碘液1滴，自他端用吸水纸吸尽水液。此时随着碘液的吸入，洋葱表皮细胞被染成黄棕色。先在低倍镜而后在高倍镜下观察下列结构。1、细胞壁：在细胞的最外面。在显微镜下看来略为一个长方形的框子。2、原生质体：在细胞壁之内，是细胞内生活物质的总称。主要有两部分组成。细胞核：为原生质体的稠密部分，染色较深，呈类圆形，在较幼嫩细胞中，位于中间，较老的细胞常在一侧。在核中充满均匀结构的核质，并可见到其中有2-3个染色较深的类圆形结构即为核仁。核的表层为核膜与细胞质相接。细胞质：为除细胞核以外的原生质体的部分。幼嫩的细胞中细胞质充满整个细胞。而较老化时则有液泡存在。随着细胞的老化，由多数的小液泡聚成一个大液泡，占据细胞中央位置。而细胞质则仅分布在边缘部分，紧贴在细胞壁的内部。用碱染色后的细胞质颜色较深。液泡较浅，近于无色，故可区别。作业与思考：1 .初步练习绘制34洋葱表皮细胞构造图，并注明各部分结构名称。2 .植物细胞的显微构造主要有那几部分组成？