发酵罐操作规程.docx

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1、发酵罐系统操作规程一.准备工作1检查电源是否正常，空压机、微机系统和循环水系统是否正常工作。2 .检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。3 .开动空压机，用0.15MPa压力，检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好，有无泄漏。罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重点检测），确保所有阀门处于关闭状态（电磁阀前方的阀门除外）。4 .检查水（冷却水）压、电压、气（汽）压能否正常供应。进水压维持在0.12Mpa,允许在0.15-0.2MPa范围变动,不能超过0.3Mpa,温度应低于发酵温度10；罐体可靠接地；输入蒸汽压力应维持在0.3Mpa；空压机压力值0.8Mpa,空气进入压力应控制

2、在0.25-0.30MP（空气初级过滤器的压力值）。5温度、溶氧电极、PH电极校正及标定，详见触摸屏PH、Do的标定帮助。6.检查各电机能否正常运转（共4个）。电磁阀能否正常吸合（整套系统共11个电磁阀）。二.灭菌操作1 .空气管路的灭菌1.1 空气管路上有三级预过滤器、冷干机和除菌过滤器。预过滤器、冷干机不能用蒸汽灭菌，因此，在空气管路通蒸汽前，必须将通向预过滤器的阀门关闭，使用蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。1.2 除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，通过蒸汽减压阀调整0.13Mpa,不得超过0.15MPa,严禁用过热蒸汽对除菌过滤器灭菌。1.3 空消过程中，除菌过滤器下

3、端的排气阀应微微开启，排除冷凝水。1.4 空消时间应持续30分钟左右，当设备初次使用或长期不用后启动时，最好采用间歇空消，即第一次空消后，隔35小时再空消一次，以便消除芽抱。15经空消后的过滤器，应通气吹干，约2030分钟，然后将气路阀门关闭。保持空气管道正压。2.种子罐（酸碱罐消泡罐）空消2.1 种子罐空消前，应将打开排污阀Q22打开（使夹套内的压力不超压），即将夹套的水放掉。2.2 关闭Q14,微开Q15,打开蒸汽阀门Q12,打开Q13向罐内通蒸汽；打开QI8、Q19通过取样口向罐内直接通蒸汽。2.3 3将罐上的接种口，排气阀Q9及排污（料路）管路上的阀门Q24、Q25微微打开，使蒸汽通过

4、阀门排出，当湿度达到122OC后开始计时，调整阀门Q9、QI3、Q19的开度,保持罐压在0.130.15Mpa（温度1220C1280C）,可根据工艺调整空消的温度与压力。2.4 当空消3040min后应关闭QI3、QI5、Q19,然后再关闭QI2、Q18,打开空气管路上的阀门Q14、Q13向罐内通空气冷却，使罐内保持正压0.03MPa-0.05MPa之间，空消时最好将夹套的排水阀打开，以防夹套水排不干净。2.5 5需要快速冷却时则关闭夹套排污阀门Q22,打开冷却水阀门Q27/DC1向夹套通水冷却，达到常温后关闭冷却水。特殊情况下，可采用间歇空消（隔35小时再空消一次，以便消除芽胞）。2. 6

5、空消结束后将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内形成负压损坏设备。3. 7空消时溶氧、PH电极取出，妥善保存，以延长其使用寿命。3.种子罐（酸碱罐消泡罐同种子罐）的实消实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。3.1 空消结束后，关闭进气阀门Q13,打开Q9卸去罐内压力，将校正好的PH、DO电极装好，尽快将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷凝水。3. 2培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量应根据工艺要求确定，发酵液的最终容积为罐体全容积的70%左右（泡沫多的培养基为60-65%左右，泡沫少的培养基可达7580%）,考虑到冷凝水、接种量及是否流加补

6、料，初定容由生产根据工艺的要求自行决定，要在实践中摸索。3. 3先开启机械搅拌装置，低速（50ToOrmin）转动，使罐内物料均匀混A0O3. 4为减少冷凝水，先打开套排污阀Q22、蒸汽阀Q21,对罐内培养基预热（采用夹套通汽预加热）。当罐内温度升到90时（具体温度应按蒸汽质量而变动），关闭夹套进汽阀Q21,关闭Q14,全打开进汽阀Q12,打开Q13通入蒸汽，全开Q18,微开Q19通过取样口向罐内通蒸汽，关闭Q25、Q26,全开Q23,微开Q24向罐内直通蒸汽，微开尾气阀门Q9（三路通汽灭菌），关闭电机搅拌，当罐内温度升到105C时，缓缓打开排气阀将罐顶冷空气排掉，持续5min,关闭排气阀。4

7、. 5当温度上升到121123,罐压升至O.12Mpa时（不得超过O.2Mpa）,控制蒸汽阀门Q9、QI9、QI3、Q24的开度大小，保持温度与罐压不变，开始计时，微开火焰接种口向外排蒸汽，30分钟后，关紧焰接种口，关闭Q24（关闭前应人为地开大蒸汽量几次，避免培养基残留于阀门处），关闭Q23,关闭QI9、18,关闭QI3、Q12停止供汽。3.6关闭夹套排污阀门022,打开冷却水阀。27/口（；1向夹套通水冷却，打开电机搅拌，当压力降到0.05MPa时微微开启排气阀和空气进气阀门Q14、Q13向罐内通空气搅拌，加快冷却速度，并保持罐压为0.05Mpa,直到罐内培养基温度降至接种温度。当罐内温度

8、降至比发酵工艺所要求的温度高23C时，关闭阀门Q27/DC1停止通冷却水。注：1）在空消实消时一定排尽夹套内的余水，否则会导致罐体压扁，造成设备损坏。2）在空消、实消结束后冷却过程中，严禁种子罐产生负压，以免造成污染。三.种子罐接种（移种）1接种1本系统采用火焰封口接种，接种前应事先准备：泗精棉花、钳子、镜子、接种环、石棉网手套、Z字扳手。2 .菌种装入三角烧瓶内，接种量根据工艺要求确定。3 .将酒精棉花围在接种环周围点燃，将菌种瓶口在火焰上烧一会儿，用Z字扳手拧开接种口，迅速将菌种倒入罐内，此时应向罐内通气，使接种口有空气排出（压力接近与零，但不能为零）。4 .将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。

9、接种后，罐压保持在0.03-0.07MPa（0.05Mpa）,调节通风量。5 .移种5.1. 移种前应先路内的冷凝水随时可以排空。2. 2移种时在关闭蒸汽阀后应当立即进行移种，避免造成负压污染。2.3采用压差移种即P小大于P大，移种前对移种管道、阀门蒸汽灭菌20min,P小0.05MPa,P大0.03Mpa,打开移种管道上的阀门，通过压差作用转罐，移种结束后立即关闭移种阀，然后打开与之联通的蒸汽阀通入蒸汽进行冲刷消毒，并立即清洗种子罐，防止发酵料粘结在管道阀门及罐壁上，消毒后立即关闭蒸汽阀门和排冷凝水的阀门及管帽。四.取样在接种完成后或在发酵中途要取样检查时，可通过取样口取样。取样前，取样管路

10、阀门需用蒸汽灭菌，防止杂菌污染而引起误导，取样结束后同样要用蒸汽冲洗取样管道及阀门。操作方法：全开蒸汽阀门Q18,微开Q20,当时间到15分钟后，将酒精棉花围在取样口周围点燃，关闭Q20,关闭Q18,打开Q19,打开Q20,先将取样管内的液体排光后，将准备好的取样瓶在火焰边打开，快速取样并盖好，关闭Q20,然后打开Q18清洗/灭菌取样口5分钟，关闭Q20、Q18o取样完成后，要用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成，调节好压力与流量后，系统一可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、D0）,具体的工艺参数由操作工自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制

11、。四.种子罐培养1取样完成后，要用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成后，把压力与流量调节好，系统则可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、D0）,具体的工艺参数根据生产要求自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制。2.种子移入种子罐后控温培养，罐压一般0.03-0.05Mpa,转速根据工艺要求而定，调节循环水的温度控制发酵温度，当环境温度高于发酵温度时，用冷凝水降温。PH调节由控制系统通过执行机构自动加减实现。泡沫报警由泡沫探头检测泡沫信号在触摸屏以指示灯形式显示。注:1）灭菌前应对PH电极校正，培养过程中PH的控制使用蠕动泵的加酸加碱来实现的，酸

12、瓶碱瓶先在灭菌器中灭菌。2）溶氧（DO）的测量与控制：溶氧电极的标定：接种前在恒定的发酵温度下，将转速及空气量开到最大值时的溶氧DO值作为100%.培养过程中溶氧测量和控制：DO值的控制采用调节空气流量和调节转速来达到，转速与溶氧的关联的控制。其次必须同时调节进气量（手动）控制。五取样在接种完成后或在发酵中途要取样检查时，可通过取样口取样。取样前，取样管路阀门需用蒸汽灭菌，防止杂菌污染而引起误导，取样结束后同样要用蒸汽冲洗取样管道及阀门。操作方法：全开蒸汽阀门Q18,微开Q20,当时间到15分钟后，将酒精棉花围在取样口周围点燃，关闭Q20,关闭Q18,打开Q19,打开Q20,先将取样管内的液体

13、排光后，将准备好的取样瓶在火焰边打开，快速取样并盖好，关闭Q20,然后打开Q18清洗/灭菌取样口5分钟，关闭Q20、Q18o取样完成后，要用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成，调节好压力与流量后，系统一可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、D0）,具体的工艺参数由操作工自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制。七.出料1 .本设备的出料是利用罐压将发酵液从出料管道排出，根据发酵液的浓度，罐压可控制在0.05-0.IOMpao2 .出料后取出溶氧、PH电极清洗保养。PH电极存放在饱和的氯化钾溶液中，溶氧电极放于保护套中。3 .出料结束后，应立即放水

14、清洗发酵罐及料路管道阀门，并开动空压机，向发酵罐供气并搅拌，将管路中的发酵液冲洗干净。4 .如果发酵罐暂时不用，则对发酵罐进行空消，并排空罐内、夹套及管道内的水。.维修与保养1 .安置设备的环境应整洁、干燥、通风良好，水、汽不得直接泼到电器上。2 .设备启用之后，必须及时清洗，防止发酵液干结在发酵罐及管路、阀门内。3 .各类仪表，应按规定要求保养存放压力表、安全阀、温度仪每年应校准一次。4 .设备停止使用时应清洗、吹干。过滤器的滤芯应取出清洗，凉干，妥善保管，法兰压紧螺母应松开，防止密封圈永久变形。5 .空压机周围的环境应保持清洁，空气清新，排水沟为活水，机体表面干净。6 .空气储存罐定期打开罐底的排污阀，排掉罐内的冷凝水（大约30天左右处理一次，具体情况应更具当地的空气湿度而定）。7冷干机应定时按下开关键（绿色按钮）排放里面的冷凝水。附：发酵罐系统的维护、清洗和保养为了保证发酵罐正常运行，用户除了必须熟悉设备的工作原理与各部件的结构、性能作用以及管路、阀门的作用外，还应该重视和加强设备的维护与保养，只有做到设备精心维护才能保证设备处于最好状态，延长设备工作年限。