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1、实验报告植物体叶绿素含量的测定摘要:本实验采用分光光度法,利用95%乙醇提取菠菜叶片中和番茄叶片中叶绿体色素,叶绿素a,叶绿素b和类胡萝卜素最大吸收峰的波长分别是665nm649nm和470r1m。根据分光光度计测定的吸光度值,从而计算出乙醇提取液中叶绿体色素含量。实验原理:利用95%乙醇提取叶绿体色素,叶绿素a,叶绿素b和类胡萝卜素最大吸收峰的波长分别是665nm649nm和470nmo根据分光光度计测定的吸光度值,可以计算出乙醇提取液中叶绿体色素含量。实验目的:扇握分光光度计法对叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总浓度和类胡萝卜素总浓度测定和计算的方法。实验材料:生物材料:菠菜叶片0.25g,自己
2、培养的全素番茄苗叶片0.2g,缺磷番茄苗叶片0.2g;试剂:95%乙醇、石英砂、碳酸钙;仪器:分光光度计、电子天平、研钵、漏斗、玻璃棒、小烧杯、IOm1量筒、50m1容量瓶、剪刀、滤纸、滴管。实验步骤1叶绿体色素的提取取新鲜菠菜叶片0.25g,擦干,去中脉,剪碎放入研钵,加入少许石英砂和CaCo3,再加入95%乙醇3m1,研磨成匀浆,再加95%乙醇IOmI,静置IOmin,用漏斗滤去残渣,用乙醇反复冲洗研钵、残渣至无色;用容量瓶定容至50m1。2.吸光度的测定取光径Icm比色杯,注入上述叶绿素提取液,以95%乙醇注入另一同样的比色杯内作为空白对照,在波长665、649、和47Onm下测定吸光度
3、。3结果计算依据下列计算公式,分别计算出叶绿素a、B的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的浓度。Ca(叶绿素a)=13.95A-6.8Cb(叶绿素b)=24.96-9-7.32A665Ct(叶绿素)=Ca+Cb=18.16+6.63MCxc(类胡萝卜素)=(IOOOA470-2.05Ca-114.8Cb)248叶绿体色素含量色素浓度(mg1)提取液体积(1)X稀释倍数样品鲜重(g)实验结果:菠菜叶片提取液吸光值:材料(g)/浓度(mg1)叶绿素a叶绿素b叶绿素总浓度类胡萝卜素总浓度菠菜7.822.149.962.29全素番茄3331.084.410.91缺磷番茄2.741.504.240.609材料(g)/色素含量(mg)叶绿素a叶绿素b叶绿素总含量类胡萝卜素总含量菠菜1.5640.4281.9920.458全素番茄0.830.270.110.23缺磷番茄0.5480.30.8480.122实验讨论:1、测定叶绿素ab为什么选用红光波长?叶绿素吸收红光和蓝紫光,故有两个吸收峰,光合色素还有类胡萝卜素,只吸收蓝紫光,所以不能选蓝紫光区测定,否则被类胡萝卜素干扰,只能用红光。