Waters FX液相硬件01HPLC使用入门介绍.docx

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1、HP1C-液相色谱入门hup:WWW.waters.conVwa1erszhCN/HP1C-High-Perfbirnance-1iKuid-Chroma1ograDhy-Beginner%27s-Guidenav.htm?IOCaIe=ZhCN&cid=10048919（1）过滤流动相与样品流动相：含盐流动相务必过漉并按照要求填写记录与标签样品：过滤或离心，（过滤有吸附考虑离心）（2）脱气（气泡来源与脱气方式）脱气程度与所用检测器相关。个人推荐脱气方式超声5min（抽滤）（3）样品的准备：自动进样小瓶鉴于某些实验进样量偏大，建议液面加至第三条横线处。不宜超过瓶肩（避免进样过程中溢出）。瓶盖力

2、量大小合适，拧上即可。（4）色谱柱的选择与安装1）色谱柱的使用极端条件2）色谱柱的安装：尽可能地减小死体积，力量大小合适，顺其自然不要磨损http:WWW3）保护住的选择与使用，含有辅料的样品，包括成品的检测，推荐安装保护柱（保证柱芯与色谱柱相同，分析方法开发过程中若遇到没有适合的柱芯的时候请提交采购计划）4）使用过程中不要突然增加流速或断开色谱柱，避免压力突变导致填料坍塌。httc（5）流动相的放置1）保证管路通畅2）确保有充足的洗针液，洗泵液，及色谱柱冲洗液3）确保更换前后的溶剂互溶（如有正相流动相的使用请与仪器维护人员联系，确定脱气包不收损害）（5）开机电脑与仪器的开关无先后顺序，UV检

3、测器打开需要大约5min时间，平衡需要30minRI则至少40min（建议60min甚至更长）。E1SD则需要保证氮气充足。（6）仪器运行前准备Sea1wash（注意不要排空，使用低比例甲醇），need1ewash（洗针液与待测成分的相容性），WetPrime,DUrgeinieCto1（排气泡）Dryprime的使用（7）仪器结构简单介绍http:各部件构造(8)仪器运行及处理Empower3fi1e.share（WcnycosdfiIe）（X：）ARDARDUser实i仪FSW仪HPtC软件码廊！名称修改日期类型大小0优2695KiSSinIK程2011/7/251S5AdobeAcrob

4、at.6.39OKBjaeaEB5rh2011/6/2711:18AdobeAcrobat.5.324KB1)方法组的建立2)样品组的建立3)处理方法的建立(9)PUrgeinjeCtOr将含有缓冲盐的流动相替换为高比例甲醇(连续使用则无必要)(10)色谱柱的冲洗与保存反向色谱柱(C8及CI8)禁止用纯水冲洗色谱柱1)流动相中无盐及酸类，只有有机相与水：直接用高比例有机相(eg90%MeOH)冲洗约20个柱体积，流速推荐为Im1/min。2)流动相中含有有机酸碱，低比例有机相(eg1O%MeOH)冲洗1020个柱体积，再用高比例有机相(eg90%MeOH)冲洗约15个柱体积，流速推荐为1m1min.3)流动相中含有缓冲盐，低比例有机相(eg10%MeOH)冲洗2030个柱体积，再用高比例有机相(eg90%MeOH)冲洗约15个柱体积，流速推荐为1m1mino色谱柱柱体积的计算：对于内径4.6mm,填料粒径5um的色谱柱V(m1)=0.1*11为柱长Cm(H)色谱柱的使用记录与仪器的使用记录填写(若有异常，请及时上报)