如何正确理解紫外交联仪中三种波长UVA(365)、UVB(302)、UVC(254).docx

《如何正确理解紫外交联仪中三种波长UVA(365)、UVB(302)、UVC(254).docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《如何正确理解紫外交联仪中三种波长UVA(365)、UVB(302)、UVC(254).docx（6页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、1如何正确理解紫外交联仪中三种波长UVA(365) UVB(302) UVC(254)紫外线是指通过棱镜将自然光分成赤、橙、黄、绿、青、蓝、紫七色光,波长较紫色光更短的一类光线的总称.它广泛存在于自然界中，与人的生活密切相关。根据生物效应的不同，将紫外线按照波长划分为四个部分:A波段(UVA),又称为黑斑效应紫外线(400315nm);B波段(UVB ),又称为红斑效应紫外线(315280nm);C波段(UVC),又称为灭菌紫外线(280 100nm)Q波段(UVD),又称为真空紫外线(Vacuume UV)(200 10nm)。Visible I ightInfaredUltraviolet

2、100280 315 400780Wave Iength nm*威尼德无Vacuum UV相关紫外产品很多年之前，紫外线就已被用于防止物体表面微生物的生长，空气中微生物的破坏以及液体灭菌，紫外线杀菌消毒技术具有广谱高效、无二次污染、不存在抗药性、便于管理和实现自动化等诸多优点，多年来被广泛运用于物体表面、空气、饮用水的消毒和废水处理。以C波段为主紫外线可以杀灭包拈细菌繁殖体、芽胞、分支杆菌、病毒、真菌、立克次体和支原体等各种微生物。杀菌效果是由微生物所接受的紫外线辐照剂量决定的，不同种类的微生物对紫外线的敏感性不同，因此使用紫外线消毒时，必须确定合适的辐照剂量以达到灭杀目标微生物的效果。少了杀

3、灭效率低，高了造成灯的不应有冗余。如今紫外线杀菌也应用到了手术室，开始对空气进行消毒杀菌，上述应用都应用到了人们的日常生活中。科研工作者不断的研究与深入，慢慢将紫外线杀菌的这种特性应用到生命科学的研究中。目前威尼德生物科技(北京)有限公司，使用UVA(365nm)UVB(302 nm)、UVC(254 nm)三种波长制造了四款紫外交联仪，主耍包括VL-1000A (365nm).VL-1000B (302nm) VL-1000C (254nm) VL-3000 (三种波长)满足不同的科研需求。,j如今基因组学蛋白组学走在时代的前沿，分子生物学相关技术得到了质的飞跃，离不开人们对未知科学的探索，

4、在分子水平上，在紫外线照射下，核酸链中相邻的啼咤可发生二聚化，主要发生在胸腺喀咤碱基之间。近一百年来，研究人员一直利用紫外线的这种特性作为研究基因突变的工具。总而言之，这些发现为分子生物学和细胞生物学以及其它领域中基于紫外线的应用铺平r道路。2紫外交联仪在生命科学领域的应用紫外交联仪是一种多用途的紫外辐射系统，主要用于将DNA或RNA交联到尼龙膜、硝酸纤维素膜上。交联过程仅需25-50秒。传统的方法是将膜置于真空烘箱中80烘烤2小时。与真空烘箱烘焙相比，紫外交联仪照射可使杂交信号显著增加。此外VL系列紫外交联仪可用于Northern、Southern blotting EMSA等膜交联,CLI

5、P-seq iCLIP-seq PAR-CLIP-seq pBpa sulfo-SDA psoralen 等双分子交联以及微生物灭活(例如细菌，真菌，病毒)，光稳定性验证，琼脂凝胶中DNA的切割，RecA突变筛选，胸腺二聚体产生的部分限制性内切酶消化，UV灭菌消除PCR污染。在紫外灭菌，聚合物固化(例如水凝胶，甲基丙烯酸甲酯树脂)等方面也有应用。目前威尼德VL系列四款紫外交联仪，VL-1000A (365nm)、VL-1000B(302nm)、VL-1000C (254nm) VL-3000 (三种波长)在功能上有着诸多的优势与特点，比如：多种模式自由选择：自动模式(Auto Mode)、能量

6、模式(Energy Mode)、时间模式(Time Mode) 预设模式(Preset Mode)o多种光源自由选择：254nm(UVC)、302nm (UVB)、365nm (UVA)安全性强：仪器装有安全联锁装置，当门打开或者门关闭不严时会自动关闭紫外光源，保护使用者安全。灯管更换提示功能：当灯管功率小于初始值的60%时，此灯亮，提示用户需要更换灯管。光源分布一致性好：紫外交联仪光源的分布，尤其是中心区域的分布一致性好,能够保证样品各点吸收的能量基本一致。友好、安全的观察窗：观察窗采用3层特殊玻璃，用户可以安全地通过此窗口观察样品和灯的运行状态。O预设常用实验程序不同波长灯管自动识别功能在

7、实际应用也体现出很好的实验效果，示例如下:EMSA实验凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。凝胶迁移实验样品提取化学发光反应探针处理(二二 ，u9转膜p制胶及制电泳-lC 电泳制样(臾6数据来自北京林业大学EMSA实验,仪器型号VL-10fMK条件：自动模式I2nj,cnr )交联：a.用紫外交联仪（UVliglNcrglmker）选扑2nm紫外波K 120nJcn2交联45&秒.如果没仃紫外交联仪可以使用件通的捉式紫外灯

8、（例如大的捉紫外依测化11 （2 MRIMI ,:照射37）力钟.也可以使用总冰匚作台内的紫外灯即肉膜510即米左右照射315分钟 G佳的交联时间可以使用标准从l行摸索b.文联完华行可以直接进入下步履测：也可以用保鲜膜包 缶室温卜燥， 门.一；内进入下,步检溶c.如果检测结果发现交联效果不佳, 2至连Gee probe的条带和H常微弱,可以考虑在腰I,燎万参考步5fA的条件再交联一次以进一步改善交联效果.亲自碧云玷物技术忤发出云EMSA试剂盒说明书紫外线诱导的突变为明确紫外线对大豆疫霉菌的诱导突变作用研究了紫外线诱变的突变菌株的菌落形态、菌丝生长速率、菌丝形态、卵抱子形态、产抱能力、同宗配合能

9、力、致病力和抗药性的变异情况。结果表明，大豆疫霉菌突变菌株菌落形态、菌丝生长速率、菌丝和卵泡子形态以及同宗配合能力都发生显著变异，游动泡子产泡量和致病性明显降低。1 于红梅宋玉华左豫虎紫外线对大豆疫霉菌的诱导变异作用J 大豆科学2008.第27卷 第3期.Southern 杂交紫外交联120mjcm37 C杂交24小时固定操作将DNA固定到股上可以通过下面的任何种操作:如果你想采用那么紫外交联的方法（尼龙膜）将胶放到已经用1OSSC浸透的Whatman 3MM滤纸上洗涤之前用紫外交联这块湿涧的股紫外交联后,将膜放入双蒸水中简单冲洗下,然后自然脱干.120C,烘烤（尼龙膜）在2SSC简单的洗涤一下膜将尼龙膜放在120C卜烘烤30分钟或者根据操作说明的要求进行操作。80C,烘烤（尼龙膜）在2SSC简单的洗涤下膜将尼龙膜放在80C卜真空烘烤2小时由罗氏提供地高辛试剂盒说明书提供双分子交联图表摘录自武汉康测科技有限公司试剂盒说明书