新型冠状病毒人员、环境、污水等标本采集程序.docx

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1、GLSC_09-5-l新型冠状病毒人员、环境、污水等标本采集程序（一）采集对象。新冠肺炎病例、可疑感染人员和其他需要进行检测的人员，以及可能被污染的环境或物品等。（二）采样人员基本要求。从事标本采集的技术人员应当经过生物安全、监测技术培训并合格，熟悉标本采集方法，熟练掌握标本采集操作流程。应严格按照操作流程进行采样，按要求做好标本信息记录，确保标本质量符合要求、标本及相关信息可追溯。（三）标本采集基本要求。L住院病例的标本由所在医院的医护人员采集，密切接触者标本由当地指定的疾控机构、医疗机构负责采集。采集标本时，要根据不同采集对象设置不同的采样区域，发热患者前往发热门诊就诊、采样,未设置发热门

2、诊的机构应设置发热患者专用采样区域，将发热患者与其他检测人群分区采样，避免交叉感染。2 .无症状感染者、入境人员、密切接触者在隔离观察期间应采集鼻咽拭子进行核酸检测，解除隔离时应同时采集2份鼻咽拭子样本，分别使用不同核酸检测试剂检测，2次检测原则上由不同检测机构开展。3 .根据临床及实验室检测工作的需要，可在住院、隔离期间多次采样,可同时采集呼吸道、血液、便等多种标本。采样人员应严格遵循采样规范采集标本，保障所采集标本质量符合要求，同时应详细记录受检者信息，可利用条形码扫描等信息化手段采集相关信息。4 .人群筛查应根据核酸提取、检测所用试剂的要求确定采样管，可选择含病毒灭活剂（胭盐或表面活性剂

3、等）的采样管。用于病毒分离的标本应放置于不含有病毒灭活剂的采样管。5 .物品和环境监测应根据监测目的和防控需求，确定采样物品、位置与数量，采样时应严格遵循采样规范。（四）采集标本种类。每个病例必须采集急性期呼吸道标本（包括上呼吸道标本或下呼吸道标本），重症病例优先采集下呼吸道标本；根据临床需要可留取便标本、全血标本、血清标本和尿标本。物品和环境标本根据监测需求采集。标本种类：1 .上呼吸道标本：包括鼻咽拭子、咽拭子等。2 .下呼吸道标本：深咳痰液、肺泡灌洗液、支气管灌洗液、呼吸道吸取物等。3 .便标本/肛拭子：留取粪便标本约10克（花生大小），如果不便于留取便标本，可采集肛拭子。4 .血液标本

4、：抗凝血，采集量5ml,建议使用含有EDTA抗凝剂的真空采血管采集血液。5 .血清标本：尽量采集急性期、恢复期双份血清。第一份血清应当尽早（最好在发病后7天内）采集，第二份血清应当在发病后第34周采集。采集量5ml,建议使用无抗凝剂的真空采血管。血清标本主要用于抗体的测定，不进行核酸检测。6 .尿标本：留取中段晨尿，米集量23ml。7 .物体表面标本：包括进口冷链食品或进口货物的内外包装表面，以及运输储藏工具等可能被污染的部位进行涂抹采集的标本。8 .污水标本：根据海运口岸大型进口冷冻物品加工处理场所排水系统分布情况，重点选取污水排水口、内部管网汇集处、污水流向的下游或与市政管网的连接处等23

5、处点位进行采样。（四）标本采集和处理。1 .鼻咽拭子：采样人员一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子，拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时,轻轻旋转一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻），然后缓缓取出拭子，将拭子头浸入含23ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。2 .咽拭子：被采集人员先用生理盐水漱口，采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润（禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起过敏），被采集人员头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧扁桃体，将拭子越过舌根，在被采

6、集者两侧扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，将拭子头浸入含23ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。咽拭子也可与鼻咽拭子放置于同一管中。3 .鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集器）。4 .深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于含3ml采样液的采样管中。如果痰液未收集于采样液中，可在检测前，加入23m

7、l采样液，或加入痰液等体积的痰液消化液。痰液消化液储存液配方见表lo表1痰液消化液储存液配方成分质量/体积二硫苏糖醇0. 1g氯化钠o. 78g氯化磷0. 02g磷酸氢二钠0. 112g磷酸二氢钾0. 02g水7. 5mlPH 值 7.40.2 (25)使用时将储存液用去离子水稀释至50ml,与痰液等体积混合使用，或者参照试剂说明进行使用，也可采用痰液等体积的含lgL蛋白酶K的磷酸盐缓冲液将痰液化。5,支气管灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器1次，也可用小儿导尿管接在50

8、ml注射器上来替代收集。6 .肺泡灌洗液：局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其顶端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水，每次3050ml,总量100250ml,不应超过300ml。7 .粪便标本：取1ml标本处理液，挑取黄豆粒大小的便标本加至管中,轻轻吹吸35次，室温静置10分钟，以8000 rpm离心5分钟，吸取上清液进行检测。粪便标本处理液可自行配制，配方见表2。表2粪便标本处理液配方成分质量/体积Tris1.211g氯化钠8. 5g无水氯化钙（或含结晶水的氯化钙）1. lg (1.47g)水800ml用浓盐酸调节pH为7.5,以去

9、离子水补充至1000 ml也可使用HANK，S液或其它等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液溶解便标本制备便悬液。如患者出现腹泻症状，则留取粪便标本35ml,轻轻吹打混匀后，以8000rpm离心5分钟，吸取上清液备用。8.肛拭子：用消毒棉拭子轻轻插入肛门35c,再轻轻旋转拔出，立即放入含有3-5ml病毒保存液的15ml外螺旋盖采样管中，弃去尾部，旋紧管盖。9 .血液标本：建议使用含有EDTA抗凝剂的真空采血管采集血液标本5ml，根据所选用核酸提取试剂的类型确定以全血或血浆进行核酸提取。如需分离血浆，将全血15002000rpm离心10分钟，收集上清液于无菌螺口塑料管中。10 .血清标本：用真空负

10、压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟，15002000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。11 .物体表面标本：参考农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范(WS/T7762021)推荐的方法，采样拭子充分浸润病毒保存液后在表面重复涂抹，将拭子放回采样管浸润，取出后再次涂抹采样，重复3次以上。对表面较大的物体进行多点分布式采样。12 .污水标本：参考农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范(WS/T776-2021)推荐的方法，采集污水的拭子样本时，用拭子浸入吸附污水，将拭子放回采样管浸润，取出后再次浸入污水，重复3次以上，对每个污水采样位置应进行多点分布式采样。采集污水的水体样本时，用聚乙烯塑料瓶收集1LL5L污水,大于L5L体积的污水采集，可以使用聚乙烯塑料桶或现场水样专用富集设备。污水水体样本采集前，先充分混合均匀后取样；如果污水难以充分混合，出现分层现象时，可按各层水量的比例分层取样。13 .其他材料：依据设计需求规范采集。