鸡卵黄免疫球蛋白IgY酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx

上传人:lao****ou 文档编号:1018499 上传时间:2024-09-04 格式:DOCX 页数:3 大小:32.14KB
下载 相关 举报
鸡卵黄免疫球蛋白IgY酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx_第1页
第1页 / 共3页
鸡卵黄免疫球蛋白IgY酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx_第2页
第2页 / 共3页
鸡卵黄免疫球蛋白IgY酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx_第3页
第3页 / 共3页
亲,该文档总共3页,全部预览完了,如果喜欢就下载吧!
资源描述

《鸡卵黄免疫球蛋白IgY酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《鸡卵黄免疫球蛋白IgY酶联免疫分析试剂盒使用说明书.docx(3页珍藏版)》请在第一文库网上搜索。

1、鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T30ng/1-900ng1使用目的:本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中卵黄免疫球蛋白(IgY)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)水平。用纯化的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入卵黄免疫球蛋白(IgY),再与HRP标记的卵黄免疫球蛋白(IgY)抗体结合,形成抗体-抗原-酎标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的卵黄免

2、疫球蛋白(IgY)呈正相关。用酶标仪在45Onm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20m1X1瓶7终止液6m11瓶2酶标试剂6m1X1瓶8标准品(1600ng1)0.5m1X1瓶3酶标包被板12孔X8条9标准品稀释液1.5m1X1瓶4样品稀释液6m1X1瓶10说明书1份5显色剂A液6m1111封板膜2张6显色剂B液6m1X1/瓶12密封袋1个1 标本要求2 .标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20C保存,但应避免反复冻融3 .不能检测含NaN3的样品,因

3、NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1 .标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800ng15号标准品I51的原倍标准品加入1501标准品稀释液400ng14号标准品1501的5号标准品加入1501标准品稀释液200ng13号标准品1501的4号标准品加入1501标准品稀释液IOOngZ12号标准品1501的3号标准品加入1501标准品稀释液50ng11号标准品1501的2号标准品加入1501标准品稀释液2 .加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50I,待

4、测样品孔中先加样品稀释液40h然后再加待测样品101(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酷标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3 .温育:用封板膜封板后置37C温育30分钟。4 .配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸储水30倍稀释后备用5 .洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6 .加酶:每孔加入酶标试剂501,空白孔除外。7 .温育:操作同3o8洗涤:操作同5o9 .显色:每孔先加入显色剂A501,再加入显色剂B501,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.10 .终止:每孔加终止液50I,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11 .测定:以

5、空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:准备试剂,样品和标准品1加入准备好的样品和标准品,37C反应30分钟:J:洗板5次,加入酶标试剂,37C反应30分钟洗板5次,加入显色液A、B,37C显色10分钟计算计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1 .试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方

6、可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2 .浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3 .各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4 .请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(XnX5)。5 .封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6 .底物请避光保存。7 .严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8 .所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9 .本试剂不同批号组分不得混用。10 .如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1 .试剂盒保存:2-8。2 .有效期:6个月

展开阅读全文
相关资源
猜你喜欢
相关搜索

当前位置:首页 > 应用文档 > 工作总结

copyright@ 2008-2022 001doc.com网站版权所有   

经营许可证编号:宁ICP备2022001085号

本站为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的收益归上传人(含作者)所有,必要时第一文库网拥有上传用户文档的转载和下载权。第一文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容本身不做任何修改或编辑。若文档所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知第一文库网,我们立即给予删除!



客服