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1、屏障环境实验人员的工作流程一、实验人员、实验动物及实验用品进出屏障实验室步骤1 .实验人员进出屏障系统操作规范(1)动物实验人员进出屏障系统:外部区域一门禁机一门厅一登记(脱外套、鞋、首饰品等,把要带入的仪器放入传递窗、喷雾、开紫外线灯)一进入一更用消毒液洗手一二更(先用75%乙醇自动喷手消毒,戴口罩,穿无菌衣、鞋套,再戴好灭菌手套,把无菌包扔到一更,再用75%乙醇自动喷手消毒)一风淋(120秒)一内准备室一动物实验室或饲养室(完毕,清理桌面、地面)一污物走廊一非洁净区一门厅换回自己的衣服。进入门厅并脱去外套,将个人衣物存放在衣柜内。通过门禁机进入门厅,填写屏障实验室进出登记,在一更内脱去较厚
2、的衣服,浸泡双手进行消毒,进入二更,用75%乙醇自动喷手消毒,然后按顺序戴上口罩,穿无菌工作服、鞋套,戴手套,进入风淋室风淋120秒(风淋时不停转动身体),进入洁净区、准备室、清洁走廊。如果灭菌衣物要补充,工作人员必须先去洁净区准备间取灭菌衣物放在二更传递窗内,以便下次使用。然后再到洁净准备间去取当天工作所需要的物品进入实验室工作。工作完毕后把废弃物、用过的用具和笼具一同整理,打扫内部环境卫生,最后将所有废弃物推出到污物走廊。工作人员把废弃物推入缓冲间后再推出屏障外,然后到门厅去换回自己的衣服。把穿过的工作服拿去清洗、晒干,供下次消毒用。(5)在屏障系统内,实验人员进出时不能同时开启两扇门,并
3、做到随手关门;不能逆向进入风淋室和二更;人一旦进入污物走廊后,即不得返回饲养室。2 .动物进出屏障系统操作规范自产动物:根据屏障设施动物实验区和生产区的具体布局情况,传入方式有两种:一种是直接经生产区与实验区之间的内传递窗传入;另一种是经实验区的传递窗传入。1)自产动物(带饲养笼盒)一内传递窗一直接进入实验室饲育区一(实验后)一(经包装)污物走廊一外部区域。2)自产动物(带运输盒)一传递窗一直接进入实验室饲育区一(实验后)一(经包装)污物走廊一外部区域。引进动物:从外单位引进的实验动物应当注意的注意事项:动物来源单位的生产设施等级不能低于使用单位;购买动物时,应当向生产单位索取动物检疫合格证;
4、转运动物的运输盒必须保持完整不破损,并且具备相应的等级。外购必须经过传递窗传入。传递动物时必须由两个人完成,一个人在洁净准备问,另一个在屏障外,在屏障外的人确认传递仓对侧门关闭时,才能打开进口,用2%过氧乙酸喷运输盒的外表面一下,放进传递仓,再用2%过氧乙酸喷一下,关闭进口并开启紫外线灯,15分钟后由在洁净准备间的人打开内口,在传递仓内开启运输盒并把动物移到预先准备好的灭菌饲养盒里,运输盒留在传递仓内,关闭传递仓内口,此时饲养员把动物送入隔离检疫室饲养一段时间(一般为1周),观察健康正常后送入饲养室饲养或实验室做实验。3 .物品进出屏障系统管理规范(1)物品流向:包装一高压灭菌消毒、传递窗、渡
5、槽一清洁准备室一动物实验室或饲养室一(污物经包装处理)污物走廊一外部区域。(2)不同实验物品进入屏障系统的规程1)耐高压类:屏障内使用的全部鼠盒、水瓶、饲料、垫料、衣服、纸张等耐高压物品都必须经过双扉预真空高压灭菌器灭菌后方可进入屏障内。2)不耐高压类:不耐高压类物品必须经过传递仓(缓冲间)传入屏障内。在屏障外确认传递仓对侧门关闭时,打开进口,把欲传入物品的外表面用2%过氧乙酸喷雾擦拭,然后放进传递仓,再用2%过氧乙酸对传递窗内部进行喷雾消毒,关闭进口并开启紫外线灯,30分钟后由在洁净准备间的人打开内门,取出物品并关闭内门。3)耐浸泡类:有些耐液体浸泡但不耐高压的物品,可以采取消毒液长时间浸泡
6、,再放入传递窗传入。更换下来的脏鼠盒、饮水瓶等物品通过污物走廊、缓冲间运出屏障外,送到洗刷消毒室,清洗晾干后待消毒。使用后的废弃物品,从污物走廊传出后无害化处理。待清洗消毒的实验器械,从污物走廊传出或带出。二、动物实验准备工作计划好当日工作内容,取足当天所需物品、实验器械、饲料、饮用水等,根据人员物品单向流动的原则一次性移入实验室。三、实验期间注意事项1 .进入实验室后,关闭紫外线灯,确认实验室有无异常,包括室内温度、湿度、气味、水瓶有无漏水、有无动物逃逸等,如有异常需及时与实验室管理人员沟通。2 .检查每盒动物的采食及饮水情况,如采食饮水情况正常,则继续每日的工作,若发现采食饮水不正常的笼盒
7、,先检查饮水瓶瓶塞是否堵塞,再观察动物是否出现不适症状,做到早发现、早处理。3 .发现动物死亡,要调查死亡原因,及时带出屏障实验室,必要时对尸体进行解剖,排除传染性疾病的可能后,同笼动物方可继续使用。4 .每日实验操作结束后,应观察每笼动物的饲料及饮水是否足够,如需添加,无菌饲料必须使用料铲添加,不能直接用手拿取,掉落在地上的饲料不得饲喂。饮水要保证连续不断,仔细检查瓶塞有无异物堵塞或漏水,如有发现问题水瓶应及时更换。为避免水瓶被微生物污染,水瓶灭菌后仅限一次性使用。完成当日实验离开前应再次检查饮水和饲料。5 .如工作需要从一个实验室进入其他实验室,需将双手在消毒液中浸泡,换下原实验室拖鞋后再进入其他实验室。6 .使用实验室内仪器设备应做好登记,发现异常要及时告知实验室管理人员。四、实验结束注意事项1 .整理实验室中的物品、器械。2 .登记实验室温湿度、压力记录。3 .将污物移至污染走廊(污物中如有处死的动物,应确保动物已死亡才能移入污染走廊)。4 .打扫实验室卫生。饲育架、实验台应用消毒液进行擦拭消毒。地面上的污物、饲料残渣、垫料等应先清扫干净,后用消毒液浸泡过的拖布擦拭消毒。将污水移入污染走廊。最后,对房间进行喷雾消毒。5 .打开紫外线灯,离开实验室。