甲状腺球蛋白(Tg)标准操作程序SOP文件.docx

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1、ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-13甲状腺球蛋白（Tg）版序：ABCD页码：第1页，共4页注意：甲状腺球蛋白测定可受到患者标本中抗甲状腺球蛋白抗体（抗-Tg）的干扰。甲状腺球蛋白测定值的高低与所采用的检测方法密切相关。因此检测报告应注明所采用的方法。用两种方法测出的含量不能相互直接比较，以免出错。在疗效观察过程中，如因检测方法改动引起的含量变化，必须用原法同时测定核实过。用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆的甲状腺球蛋白（Tg） O电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。Tg检测可用于甲状腺疾病诊断的确诊以及甲状腺全切除术后的监测。概述：甲状腺

2、球蛋白属糖蛋白，分子量约660KD,由二条蛋白链构成。甲状腺球蛋白绝大多数由甲状腺细胞合成并释放进入甲状腺滤泡的残腔中。TSH,甲状腺体内碘缺乏和甲状腺刺激性免疫球蛋白等因素可刺激甲状腺球蛋白的产生。甲状腺球蛋白在外周甲状腺激素T3和T4的合成中起决定作用。它含有约130个酪氨酸残基，在甲状腺过氧化物酶和碘的存在下，一部分可碘化成单-和双-碘酪氨酸（MIT和DIT）,并可进一步偶联成T3和T4。甲状腺球蛋白在甲状腺细胞中合成并运输到滤泡的过程中，少量可进入血液。因此，在正常人的血液中可有低浓度的甲状腺球蛋白存在。有低浓度的甲状腺球蛋白存在提示有甲状腺组织的存在。甲状腺全切除术后就不再有甲状腺球

3、蛋白可测出。在先天性甲状腺功能低下患者中，检测甲状腺球蛋白可鉴别甲状腺完全缺损、甲状腺发育不全或其它病理状况。另一方面，甲状腺滤泡壁的损伤可导致大量的甲状腺球蛋白进入血液，因此，甲状腺球蛋白也被认为是甲状腺体形态完整性的特殊标志物。甲状腺球蛋白测定也可用于鉴别亚急性甲状腺炎和假的甲状腺毒症。后者，因TSH的抑制，甲状腺球蛋白含量低。抗甲状腺球蛋白抗体的存在可导致甲状腺球蛋白测定的错误结果。Elecsys甲状腺球蛋白测定方法采用针对人甲状腺球蛋白的单克隆抗体。原理：采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第1步：20l标本、生物素化的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗甲状腺球蛋白

4、单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-13甲状腺球蛋白（Tg）版序：ABCD页码：第2页，共4页试剂：M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6. 5mlo粒子浓度0.72mgml,生物素结合能力：470ng

5、生物素g粒子。含防腐剂。R1：生物素化的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度0.7mgl,磷酸缓冲液004moll, pH6. 1 o含防腐剂。R2：钉（Ru）标记的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度LOmg/1；磷酸缓冲液0.04moll, pH6. 1 o含防腐剂。R3：甲状腺球蛋白核实试剂（黑盖），2瓶，3l瓶，含约800ngl甲状腺球蛋白（人）。瓶签上标有该批次的准确浓度。储存和稳定性：存放在2 8度，切莫倒置。M, RI , R2的稳定性：未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度12周；放在Elecsys2010上,8周；（使用后放回28度

6、;如置2025度,约20小时）。R3的稳定性：干粉，可稳定至标明的保质期。液体，2-8度3周标本米集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：肝素、EDTA-K3、枸椽酸钠和氟化纳/草酸-K抗凝均可。标本在15 25度可稳定24小时，2 8度可稳定3天，-20度可稳定1个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。标本和质控液禁用叠氮钠防腐。甲状腺球蛋白核实试验（抗甲状腺球蛋白中和试验）甲状腺球蛋白测定可受到患者血清中抗甲状腺球蛋白抗体（抗-Tg）和非特异性因素的干扰。因此结果必须按以下步骤核查：在标本杯中加入200l标本和50lR3 ,混匀，与不加入的标本作平行测定。检测步骤

7、：提供的材料：货号：11820834, 100人份的Elecsys甲状腺球蛋白试剂盒包含: M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素化抗甲状腺球蛋白的单克隆抗体 R2钉（Ru）标记的抗甲状腺球蛋白的单克隆抗体 R3甲状腺球蛋白核实试剂ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-13甲状腺球蛋白(Tg)版序：ABCD页码：第3页，共4页需要的材料(未提供)： Elecsys甲状腺球蛋白定标液(Tg CalSet)货号11820940 Elecsys 通用质控品(PreciControl Universal)货号 11731416 Elecsys通用稀释液货号11732277 Elecsys2010

8、 分析仪 Elecsys系统缓冲液(ProCell)货号 11662988 Elecsys 测量池清洗液(CleanCell)货号 11662970 Elecsys 添加剂液(SysWash)货号 11930346 Elecsys 系统清洗液支架(Adapter for SysClean)货号 11933159 Elecsys 2010反应杯(Assay Cup)货号 11706802 Elecsys 2010吸样头(Assay Tip)货号 11706799 Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号 11298500方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混

9、匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。定标：每批甲状腺球蛋白试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用Elecsys甲状腺球蛋白定标液定标。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂(试剂经仪器注册24小时以内)标定一次，如再次标定即根据下列要求： 一个月(同一批号试剂) 7天(放置仪器上的同一试剂盒) 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。质控：Elecsys通用质控品1和2以及其它合适的质控品

10、。各浓度区域的质控至少每24工作时、每个试剂盒或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-13版序：ABCD甲状腺球蛋白（Tg）页码：第4页，共4页计算：对每一个标本，仪器会自动计算甲状腺球蛋白含量。单位是ng/ml或gL0在分析测定结果时，标本中可能存在的抗甲状腺球蛋白抗体的干扰因素应该考虑进去。未处理标本（Tg标本）的测定值和加入甲状腺球蛋白核实试剂标本（标本+R3）的测定值代入以下算式求出回收率：甲状腺球蛋白含量（标本+R3）-0. 8甲状腺球蛋白含量（标

11、本）0.2R3的甲状腺球蛋白含量（见瓶签） 100正确的回收率应在70-130%之间。如回收率不在此范围内，结果报告应注明。干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素36mgdl）、溶血（血红蛋白L9gdl）、脂血（脂质2000mgdl）生物素100ngml等干扰。接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（2500Ul） o甲状腺球蛋白含量高达120000ngl也不出现前滞现象。21种常用药物经试验对本测定无干扰。接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体的干扰。甲状腺球蛋白测定可受到患者血清中抗甲状腺球蛋白抗体（抗-Tg）和非特异性因素的干扰。因此结果必须经平衡回收试验核查过。甲状腺球蛋白测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。检测范围：0. 1001000 ng/ml 或ll稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:10稀释。稀释后的标本甲状腺球蛋白含量必须高于50ngl （Ng/l）。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。正常参考值：85 ng/ml甲状腺完全去除后就不再有甲状腺球蛋白可测出。在这些病人中如有甲状腺球蛋白升高，需要做进一步的诊断检查。如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。