融冻与巴氏消毒法对母乳巨细胞病毒感染性的影响.docx

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1、融冻与巴氏消毒法对母乳巨细胞病毒感染性的影响周文姬I沈永珍1周紫光2,张春一I钟志成3广东省妇幼保健院新生儿科工手术室，产前诊断实验室，广东广州511400第一作者：周文姬(1988年)，女，硕士,主管护师，研究方向：新生儿护理及护理管理方向，Emai1：通讯作者：钟志成(1982年)，男，硕士，主管技师，研究方向：产前诊断实验实临床检验方向，Emai1：基金项目：广东省医学科研基金(编号：A)摘要目的比寂融冻与巴氏消毒法对母乳巨细胞病毒(HCMV)的灭活效果。方法选取2023年3二6月期间在广东省妇幼保健院住院的组例早产儿母亲作为研窕对象，收集其新鲜母乳。经过母乳初筛后，有4例母亲母乳HCM

2、V-DNA阳性。4例母乳HCMV-DNA阳性母亲留取新鲜母乳后，篷分为3份，每份Iom1。然后各取I份新鲜母乳作为对照组,另外各取2份分别经融冻工昧组)和巴氏水浴消毒工巴氏消毒组上。记录三组母乳HCMV-DNA载量情况、融冻组与巴氏消毒组母乳HCMV-DNA清除率、4例阳性母亲对应的三组早产儿(对照组、融冻组和巴氏消毒组)获得性HCMV感染情况。结果一三组母乳HCMV-DNA平均载量比较差异具有统计学意义(P0.05),其中巴氏消毒组和融冻组HCMV-DNA平均载量分别为(3.210.57)m1,(3.740.68)m1,明显低于对照组的(4.120.79)m1,面巴氏消毒组的HCMV-DNA

3、平均载量又明显低于融冻组,差异均具有统计学意义(P0.05)；巴氏消毒组肛HCMV-DNA清除率为100.0%,明显高于融冻组的25.0%,差异具有统计学意义(P0.05)；三组早产儿获得性HCMV感染率比较差异具有统计学意义(P0.05),其中巴氏消毒组早产儿HCMV感染率为0.0%,明显低于对照组的75.0%和融冻组的50.0%,面融冻组明显低于对照组的75.0%,差异均具有统计学意义(P0.05).结论普通水浴巴氏消毒能完全消除母乳中HCMV的感染性，融冻法则无法完全消除。对于极低出生体重早产儿或免疫缺陷患儿，如母亲感染HCMV,乳汁筛查出HCMV阳性，母乳应使用巴氏消毒处理后再喂养更为

4、安全。【关键词】母乳；巨细胞病毒感染；融冻；巴氏消毒；早产儿EffeCtOfthawingandPaSteIIriZatiOnonhumanmi1kCytOn1egaIOVinISinfectionZHOUWenji,SHENYongzhen1,ZHOUZiguang2,ZHANGChunyi1,ZHONGZhicheng31DepartmentofNeonato1ogy,2OperationRoOm,DepartmentofPrenata1Diagnosis,GuangdongWomenandChi1drenHospita1GuangdongGuangzhou,511400AbstractO

5、bjective:ToCOmDaretheinactivationeffectOfthawingandDaSteUriZatiOnonhumanmi1kCyIomegaIoVirUS(HCMV)Methods:20mohersDrema1ureinfan1shospiia1izedinGUangdOngMaIerna1andChiIdHeakhHoSDiIa1fromMarCh1oJUne2023WereSeIeCtedastheStUdySUbieCtSoCo1IeCttheirfreshbreastmi1k.AftertheDre1iminarySCrCeningOfhumanmi1k.I

6、hereWere4mothersWiIhHCMV-DNADOSi1iVebreastmi1k.FOUrmothersWithHCMV-DNADoSitiVebreas1mi1kretainedfreshbreastmi1kandWeredividedinto3portionseach,Iom1each.Then,take1freshbreastmi1kasIheComrO1group,andtake2freshbreastmi1kastheContro1grour).andtake2freshbreastmi1kastheCOntrO1groupafterthawing(IhaWinggrou

7、D)andDaSteUriZation(DaSteUriZaIiOngrour).HCMV-DNAIoadOfhumanmi1kinthreegroups,HCMV-DNAC1earanCerateOfhumanmi1kinthawinggroupandDaSteUriZatiOngrouD,andacquiredHCMVinfectioninthreegroupsOfDrematUreinfantsCOnesDondingtofourDOSitiVemo1hers(ComrO1group.IhawinggrouDandDaSIeUriZa1iOngroup)Wererecorded.Resu

8、1ts:ThemeanHCMV-DNAIoadOfhUmanmi1kinIhethreegroupsWaSStatiStiCa1IySignifiCant(PVo.05).ThemeanHCMV-DNAIoadOfDaSteUriZedgroupandthawedgrour)Were(3.210.57)m1and(3.740.68)m1,WhiChWereSignifiCantIyIoWerthanthatOftheCOntro1group(4.120.79)m1,Whi1ethemeanHCMV-DNAIoadOfTaS1eUriZedgroupWaSSignifiCanuyIOWerIha

9、nIhatOfIhaWedgroup(P30mD。研究人员收集母乳后立即予以轻轻摇匀，再分装成3份至聚乙烯无菌标本瓶，每份IOmk1份放入-20冷冻保存，3天后放入28冰箱融解12h至液态；1份密封后立即行水浴巴氏消毒，使用水浴加热箱，62.5C加热30min;1份新鲜母乳不做处理作为对照。(3)母乳病毒浓缩处理：对处理组和非处理组均采用聚乙二醇沉淀法进行浓缩和收集用于细胞感染。具体做法：所获乳汁先采用8000g/min离心IOmin分离出脂肪层、乳清层和沉淀层。取中间层无脂乳清成分，进一步使用0.22Um除菌滤膜过滤，所获液体随后加入聚乙二醇等体积，颠倒混匀，置EPPendOrf离心机22000g/min离心30min,移去所有上清，加入生理盐水0.1m1制成浓缩感染病毒原液备用,(4)HCMV感染性检测：将人胚肺成纤维细胞(humanembryo1ungfibrob1ast,HE1,华拓HTXI563)按常规方法培养、传代、胰酶消化，采用细胞计数板调整至浓度为Z5X105m1转置12孔HE1细胞培养板0.5m1ce11,培养24小时待细胞贴壁，移除细胞培养基，加入调整后的病毒液0.1亳升37摄氏度细胞培养箱孵育15分钟。随后加入2m1含IOOgm1新霉素、0.29mgm1谷氨酰胺和10%小牛血清的培养液(minima1e