输血科作业指导书汇编.docx

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1、武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-002页 号第4页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日2、玻片法（1）取清洁玻片1张（或白瓷板1块），用蜡笔划成方格，标明抗A、抗B和抗A+B,分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A+B分型血清1滴相应的方格内，再各加受检者2%红细胞悬液1滴，混匀。（2）另取洁净玻片1张（或瓷板1块），用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和0细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和0型试剂红细胞悬液1滴。（3）将玻片（或白瓷板）不断轻轻转动，使血清与细胞

2、充分混匀,连续约l5min,肉眼观察有无凝集（或溶血）反应。如用玻片做试验时，也可用低倍镜观察结果。3、微柱凝胶血型卡法。【附注】1、分散血清质量性能应符合商品合格试剂的要求，试验结束后应放置冰箱保存，以免细菌污染。2、试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混合，用生理盐水洗涤3次，以除去存在于血清中的抗体及可溶性抗原。3、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。4、操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液,武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-002页 号第5页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发

3、布日期2016年07月20日以便容易核实是否漏加血清。5、IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4为最强，但为了防止冷凝集的干扰，一般仍在室温（2024C）下进行试验，37可使反应减弱。6、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防止出现假阳性或假阴性。7、观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱排列的区别。8、判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。表1 ABO血型正反定型结果标准血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试验红细胞抗A抗B抗A+BA细胞B细胞 0细胞+A+ -+B+ O+ -+AB 注：+:凝集或溶血；-：不凝集。【正反定型结果不致的原因】有技术性问题或红细胞

4、和血清本身的问题，常见者有以下几种。1、标准血清效价太低、亲和和不强。如抗A血清效价不高，可将A亚型误定为。型，AB型误定为B型。武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-002页 号第5页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日以便容易核实是否漏加血清。5、IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4为最强，但为了防止冷凝集的干扰，一般仍在室温（2024C）下进行试验，37可使反应减弱。6、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防止出现假阳性或假阴性。7、观察时应注意红细胞呈特异性

5、凝集、继发性凝固以及缗钱排列的区别。8、判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。表1 ABO血型正反定型结果标准血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试验红细胞抗A抗B抗A+BA细胞B细胞 0细胞+A+ -+B+ O+ -+AB 注：+:凝集或溶血；-：不凝集。【正反定型结果不致的原因】有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种。1、标准血清效价太低、亲和和不强。如抗A血清效价不高，可将A亚型误定为。型，AB型误定为B型。武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-S0P-1-002页 号第5页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚

6、明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日以便容易核实是否漏加血清。5、IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4为最强，但为了防止冷凝集的干扰，一般仍在室温（2024C）下进行试验，37可使反应减弱。6、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防止出现假阳性或假阴性。7、观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱排列的区别。8、判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。表1 ABO血型正反定型结果标准血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试验红细胞抗A抗B抗A+BA细胞B细胞 0细胞+A+ -+B+ O+ -+AB 注：+:凝集或溶血；-：不凝集。【正反定型结果不致的原因】有技

7、术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种。1、标准血清效价太低、亲和和不强。如抗A血清效价不高，可将A亚型误定为。型，AB型误定为B型。武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-S0P-1-002页 号第5页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日以便容易核实是否漏加血清。5、IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4为最强，但为了防止冷凝集的干扰，一般仍在室温（2024C）下进行试验，37可使反应减弱。6、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防止出现假阳性或假阴性。7、观察时应注

8、意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱排列的区别。8、判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。表1 ABO血型正反定型结果标准血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试验红细胞抗A抗B抗A+BA细胞B细胞 0细胞+A+ -+B+ O+ -+AB 注：+:凝集或溶血；-：不凝集。【正反定型结果不致的原因】有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种。1、标准血清效价太低、亲和和不强。如抗A血清效价不高，可将A亚型误定为。型，AB型误定为B型。武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-002页 号第9页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血

9、型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日悬液浓度()压实红细胞(滴)盐水(滴)212.0ml(40)510.8ml(16)1010.4ml(8)2010.2ml(4)2、为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。3、如条件许可，可分别制备A1、A2,及其他亚型的红细胞悬液,以供ABO亚型鉴定时参考。4、如欲将红细胞保存，应严格注意无菌技术采取血液，以ACD保存液按4： 1抗凝，置4冰箱可保存3周，临用时取出一部分经盐水洗涤后配制成需的浓度。如以红细胞保存液保存，在4C下可保存45周。红细胞保存液的配法：5. 4%

10、葡萄糖液640ml及109mmolL枸椽酸钠264ml混合后，如新配的1%硫柳汞液1. 8ml,经高压灭菌的(110,15min)溶液最后pH为7. 4,使用时血液与保存液的容积比为6 ： 1。二、A1和A2亚型鉴定【原理】根据ABO血型的血清学特点，A型和AB型可分为&、A2. A3、A2B亚型。抗-A (B型)血清中含有抗A和抗A两种抗体；抗A可以凝集武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-002页 号第9页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日悬液浓度()压实红细胞(滴)盐水(滴

11、)212.0ml(40)510.8ml(16)1010.4ml(8)2010.2ml(4)2、为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。3、如条件许可，可分别制备A1、A2,及其他亚型的红细胞悬液,以供ABO亚型鉴定时参考。4、如欲将红细胞保存，应严格注意无菌技术采取血液，以ACD保存液按4： 1抗凝，置4冰箱可保存3周，临用时取出一部分经盐水洗涤后配制成需的浓度。如以红细胞保存液保存，在4C下可保存45周。红细胞保存液的配法：5. 4%葡萄糖液640ml及109mmolL枸椽酸钠264ml混合后，如新配的1%硫柳汞液1. 8ml,

12、经高压灭菌的(110,15min)溶液最后pH为7. 4,使用时血液与保存液的容积比为6 ： 1。二、A1和A2亚型鉴定【原理】根据ABO血型的血清学特点，A型和AB型可分为&、A2. A3、A2B亚型。抗-A (B型)血清中含有抗A和抗A两种抗体；抗A可以凝集武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-002页 号第9页共10页版本/修改次数第4版第0次修改ABO血型鉴定审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月20日悬液浓度()压实红细胞(滴)盐水(滴)212.0ml(40)510.8ml(16)1010.4ml(8)2010.2ml(4)2、为

13、了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。3、如条件许可，可分别制备A1、A2,及其他亚型的红细胞悬液,以供ABO亚型鉴定时参考。4、如欲将红细胞保存，应严格注意无菌技术采取血液，以ACD保存液按4： 1抗凝，置4冰箱可保存3周，临用时取出一部分经盐水洗涤后配制成需的浓度。如以红细胞保存液保存，在4C下可保存45周。红细胞保存液的配法：5. 4%葡萄糖液640ml及109mmolL枸椽酸钠264ml混合后，如新配的1%硫柳汞液1. 8ml,经高压灭菌的(110,15min)溶液最后pH为7. 4,使用时血液与保存液的容积比为6 ： 1。二、A1和A2亚型鉴定【原理】根据ABO血型的血清学特点，A型和AB型可分为&、A2. A3、A2B亚型。抗-A (B型)血清中含有抗A和抗A两种抗体；抗A可以凝集武汉市蔡甸区人民医院输血科工作制度文件编号SXK-WHCDQRMYY-SOP-1-003页 号第12页共6页版本/修改次数第4版第0次修