免疫学知识点汇总.docx

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1、免疫学知识点汇总1、免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。2、免疫应答分为识别阶段、活化阶段和效应阶段。3、识别阶段，是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。4、活化阶段，是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化、增殖，分化的阶段。5、效应阶段，是浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能。7、免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。8、中枢免疫器官是免疫细胞发育为成熟免疫细胞的场所，它包括骨髓和胸腺。9、成年人和动物所有血细胞及淋巴细胞的发源地是骨髓。10、T细胞发育的重要中枢器官

2、是胸腺。11、外周免疫器官及组织包括淋巴结、脾、黏膜伴随的淋巴组织。富含血管的最大外周淋巴器官是脾。12、自然杀伤细胞来源于骨髓造血干细胞，其发育成熟依赖于骨髓及胸腺微环境。13、免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后产生的、执行体液免疫功能的一组球蛋白。14、抗体是机体在抗原刺激下，由浆细胞合成分泌产生的具有免疫功能的球蛋白。15、所有抗体是球蛋白，但不是所有的球蛋白都是抗体。16、Igg是血清中含量最高的免疫球蛋白，是再次免疫应答的主要抗体，也是唯一能通过胎盘的抗体。17、补体的激活途径有经典途径、替代途径、MB1途径。18、正常血清中，含量最高的补体成分是C3、C4o19、细胞

3、因子：由免疫细胞分泌具有生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称，生物活性常表现为多效性、重叠性、拮抗效应和协同效应。20、抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定族（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。21、抗原抗体结合力：1静电引力；2.范德华力（最小）；3.氢键结合力；4.疏水作用力（最强）22、抗原与抗体结合的特异性，是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。23、抗原抗体比例合适时，沉淀物形成快而多，称为等价带。24、抗体过量时，称为前带；抗原过量，称为后带。25、单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。26、85%Nac1溶液或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。28、抗原抗体

4、反应一般在PH值为69之间进行，反应温度为37o29、颗粒性抗原包括各种细胞、细菌、寄生虫等。30、半抗原即是在独立存在时只具有抗原性而无免疫原性的物质。31、半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。32、常用的蛋白质类半抗原载体以牛血白蛋白最常用。33、弗氏佐剂（最常用免疫动物）：弗氏不完全佐剂（羊毛脂+液体石蜡）+卡介苗。34、R（兔）一宽一诊断试剂、H（马）一窄一免疫治疗。35、初次免疫：皮内注射；加强免疫/颗粒型抗原，静脉注射；.宝贵抗原，淋巴结注射；（第1次、第2次免疫间隔时间为1020d,第3次为7Iod）。36、IgG类抗体的纯化方法有盐析法、凝胶过滤法、离子交换层析

5、法、亲和层析法等。37、免疫脾细胞免疫用抗原尽量提高其纯度和活性，免疫途径多用腹腔内或皮内多点注射法。38、脾淋巴细胞特征是抗体分泌功能和能在选择培养基中生长，骨髓瘤细胞则可无限分裂既永生性。细胞融合的选择培养基有三成份：次黄喋吟(H)氨甲蝶吟(A)胸腺喀咤核甘(T)称为HAT培养基。39、凝集反应凝集反应分为两个阶段，抗原抗体的特异性结合和出现可见的颗粒凝聚。细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称直接凝集反应。玻片法凝集法主要用于抗原的定性分析，也用于人类ABO血型的测定。试管凝集试验可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。如肥达试验、外斐试验

6、，输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。间接凝集（可溶性抗原）：正向间接（测抗体）；反向间接（测抗原）；间接凝集抑制（抗原、抗体都可测）；协同凝集（可用于细菌病毒的直接检测）间接血凝试验原理是将抗原（或抗体）包被于红细胞表面，成为致敏载体，然后与相应的抗体（或抗原）结合，从而使红细胞被动的凝聚在一起，出现可见的红细胞凝集现象。40、沉淀反应沉淀反应分的第一阶段中，抗原抗体发生特异性结合，几秒到几十秒即可完成，出现肉眼不可见的可溶性小复合物。抗原过量时，使浊度反而下降，光散射亦减少，钩状效应。当反应液中抗体过量时，随着抗原递增而增加，至抗原、抗体最适比例处达最高峰，这就是经典的海德堡曲线

7、理论。与免疫浊度法测定密切相关的因素有抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的溶液、增浊剂。免疫球蛋白定量测定常用的方法有单向琼脂免疫扩散法和免疫比浊法。单向扩散试验平板法是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂凝胶内。扩散试验平板法结果中，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体量大。血清蛋白区带电泳技术是检测蛋白质的经典分析方法。血清免疫球蛋白定量测定可作为检测M蛋白的初筛试验。免疫电泳（I正P）是区带电泳技术和免疫扩散技术相结合的一种免疫学分析方法。免疫固定电泳QFE）技术是区带电泳技术与特异性抗血清的免疫沉淀反应相结合的一种免疫学分析方法。冷球蛋白又称冷免疫球蛋白，是一组在低温下发生沉淀，加温后又复溶的免

8、疫球蛋白。一般在-4时发生沉淀，于37时又复溶解。41、放射免疫：竞争法；免疫放射：非竞争法；使用最广的是1125,荧光效率是指荧光物质分子将光能转变成荧光的百分率。常用的荧光素有：异硫氟酸（FrrC、最常用）；四乙基罗丹明（RB200）；四甲基异硫氟酸罗丹明（TRITC）；藻红蛋白（R-RE）时间分辨荧光免疫测定以锢系元素祐（EU3+,应用最广）合物为荧光标记物，偏振免疫测定的偏振波长是485常用标记蛋白的方法有：搅拌法和透析法。荧光抗体鉴定包括效价及荧光素与蛋白的结合率，大于1:16为理想，一般固定标本的荧光抗体以FP=1.5为宜用于活细胞染色的以2.4为宜。免疫荧光显微技术实验中，直接法

9、操作简便，特异性高，非特荧光染色因素少。间接荧光法可用于检测抗原和抗体。本法的第一抗体为针对抗原的特异抗体。荧光显微镜与普通光学显微镜主要结构基本相同，不同之处在于光源、滤光片、聚光器和镜头等。HRP是目前在酶联免疫吸附试验中应用最为广泛的标记用酶。邻苯二胺被认为是HRP虽为敏感的色原底物之一。TMB已成为目前E1ISA中应用最广泛的底物。塑料制品一般用聚苯乙烯固相膜免疫测定中常用的膜为玻璃纤维素膜，尼龙，聚偏氟乙烯（PVDF）膜和硝酸纤维素膜等。其中最常用为硝酸纤维素膜（NC）膜。双抗体夹心法测抗原，用抗体结合在微孔滤膜中央，滴加待检标本，若标本中为待测抗原则与膜上抗体结合，然后滴加金标抗体

10、,加洗涤液洗涤后，阳性者即在膜中央呈红色斑点。间接法测特异性抗体，用抗原包被在微孔滤膜上，滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后，滴加金标抗抗体，加洗涤液洗涤后，阳性者即在膜中央呈红色斑点（胶体金聚集）E1ISA是用酶标记抗原或抗体作标志物，用于检测液体样品中可溶性抗原或抗体含量的微量分析技术。均相酶免疫测定，是利用酶标志物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变的原理。均相酶免疫测定主要用于小分子激素和半抗原的测定。E1ISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。本法有三个必要的试剂:固相的抗原或抗体；酶标记的抗原或抗体；酶反应的底物。双抗体夹心法属于非竞争结合测定，是检测抗原最常用的方法,适用

11、于检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。竞争法测定不同于单个抗原决定簇的小分子抗原的竞争法，其测定的可靠性主要受竞争抗体的特异性和亲和力影响。检测抗体中的捕获法，又称反向间接法。主要用于血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定，目前最常用的是病原体急性感染诊断中的IgM型抗体。44、化学发光技术Y咤酯：最常用的直接化学发光剂；电化学发光：三联毗钉酶标链霉亲和素一生物素方法的特点:敏感性高；低背景着色；第一抗体工作浓度低；操作简便。46、免疫细胞分离纯淋巴细胞群的采集主要的方法有:黏附贴壁法；吸附柱过滤法；磁铁吸引法；PerCO11分离液法。外周单个核细胞的分离的分层液常用：FiCo1I（由上到

12、下为：血浆，单个核细胞，粒，红）和Perco11（由上至下：死细胞，单个核细胞，淋，红，粒）T、B细胞和T细胞亚群的分离常用的方法有：磁性微球分离法、荧光激活细胞分离仪分离法。分离细胞的短期保存技术:将分离的细胞用适量含10%20%灭活小牛血清的Hankstc-199.RPMI1640或其他培养液稀释重悬。短期可置于4保存。分离细胞的长期保存技术：液氮深低温（-196。C）环境保存细胞,加入二甲亚碱作为保护剂。活力测定最简便常用的为台盼蓝染色法。47、淋巴细胞表面标志物T细胞表面主要的CD抗原有:CD2:表达于全部人T细胞和NK细胞表面，因其能与绵羊红细胞结合，又称绵羊红细胞受体。CD3:是一

13、种多链的糖蛋白，表达于全部T细胞表面，是T细胞的表面标志，是TCR-CD3复合物的重要组成部分。B细胞活化后转化为浆细胞，分泌抗体，执行体液免疫功能。B细胞表面膜免疫球蛋白的检测：Sm1g是B细胞最具特征性的表面标志。CD抗原检测：B细胞表面存在着、CD19CD20CD22等抗原。人类NK细胞表面标志主要以CDI6、CD56来认定。单核一吞噬细胞的典型表面标志是CD14树突状细胞是一大类专职抗原递呈细胞，主要有两种来源，即髓系和淋巴系。淋巴细胞表面标志检测评价免疫功能的重要指标。在评价免疫功能时经常采用CD4CD8比值。48、淋巴细胞功能检测检测T细胞增殖反应的方法有:形态学检查法；3H-TD

14、R掺入法；MTT比色法。MTT比色法的敏感性虽不及3H-TDR掺入法，但操作简便，无放射性污染。T细胞介导的细胞毒试验：与一定比例的1混合培养，观察杀伤情况。T细胞功能体外试验通常用PHA刺激淋巴细胞的增殖、转化试验来判断T细胞的功能。B细胞主要产生Ig参与机体体液免疫应答，B细胞功能低下或缺乏对外源性抗原刺激的应答能力减弱或缺陷，特异性抗体产生减少或缺如。溶血空斑试验：直接法只能测IgM,每一个空斑中央含一个抗体形成细胞，空斑数目即为抗体形成细胞数。体内试验：注入Ag一段时间后检测Ab细胞因子是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌的活性物质，其主要生物学功能是介导和调节免疫应答及炎症反应

15、,其化学本质是蛋白质或多肽。促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法：放射性核素掺入法、MTT比色法。49、抗病毒活性测定法主要用于IFN等细胞因子的检测。50、流式细胞仪的工作原理是采用激光作为激发光源。51、球蛋白按重链分IgG、igA、igMigD和IgE5类。IgG是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫应答的主要抗体。IgG有4个亚类，即IgG1igG2、igG3、igG4,正常人体血中含量依次减少，Igg1最多，Igg4最少。IgA可分为血清型和分泌型两类血清型Iga主要以单体形式存在，分泌型Ig的由链连接的二聚体和分泌成分组成，是参与黏膜局部免疫的主要抗体。Igm为五聚体，是分子量最大免疫球蛋白，又称巨球蛋白。IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，IgG最多。M蛋白(MP)是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白。52、补体检测补体大多为糖蛋白，属于B球蛋白，C1a、c8等为y球蛋白,C1sc9为球蛋白。正常血清中补体各组分含量相差较大，其中C3含量最高。补体的性质不稳定，易受各种理化因素的影响，加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。经典途径是以抗原抗体复合