GBSDNA试剂准备.docx

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GBS-DNA试剂准备标准操作规程1 .目的规范B族链球菌核酸DNA检测的试剂准备操作。2 .范围GBS-DNA定量检测实验的PCR反应液配制。3 .操作人员PCR室在岗工作人员。4 .操作步骤5 .1GBS-DNA试剂准备4.1.1试剂复融：从冰箱中取出B族链球菌核酸检测试剂盒，从试剂盒中取出GBS-PCR反应液、酶混合物、UNG,提取固形物、浓缩清洗液。GBS-PCR反应液置于室温复融，复融后把试剂震荡混匀并放于掌式离心机上离心5秒。酶混合液不需复融，震荡混匀后放于掌式离心机上离心5秒，立即放回4冰箱。4.1.2排PCR管：在PCR管盒上排列n个PCR管（n=标本数+阴性对照+阳性对照+4个定量参比品），并盖上PCR盒盖。4.1.3配液:取出GBS-PCR反应液,将nX44.31GBS-PCR反应液,n0.51TaqDNAPO1yn1eraSe,nX0.2P1UNG加入一个离心管并振荡混匀，瞬时离心后，分装至n个PCR反应管，每管45U1,盖上管盖后转移到样本处理区的传递窗内。4.1.4清洗液制备：取出IOX浓缩清洗液与灭菌纯化水按1:9进行稀释。4 .1.5配液结束后立即把PCR主反应液、酶混合物、UNG置于一20冰箱，将提取固形物、清洗液及阳性对照、阴性对照、内参照转移到样品处理区的传递窗内。5 .引用文件PCR室流程记录表