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1、湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目结题报告项目名称:NAPI(FDc-SP)蛋白与激活的B细胞表面相结合的观察项目编号:湘教通(2009)320号学生姓名:周琳琳万玮陈琳成瑛张玖琳所在学校和院系:湖南文理学院生命科学学院项目实施时间:2010-2012指导教师:李峰王文龙联系电话:填表日期:20表-4-3湖南省教育厅2013年制一、基本情况项目名称NAP1(FDC-SP)蛋白与激活的B细胞表面相结合的观察立项时间2009完成时间2012项目主要研究人员序号姓名学号专业班级所在院(系)项目中的分工1周琳琳生科07级生科学院主持2万玮生科07级生科学院参与3陈琳生科07级生科学院参与4成瑛
2、生科07级生科学院参与5张玖琳生科07级生科学院参与二、研究成果简介项目研究的目的、意义;研究成果的主要内容、重要观点或对策建议;成果的创新特色、实践意义和社会影响;研究成果和研究方法的特色。限定在2000字以内。鼻咽癌相关肽NAP1为滤泡树突状细胞(FDC)分泌的一种新的多肽,与FDC-SP(FDCsecretedprotein)同为C4orf7编码的一种产物。NAP1基因在鼻咽癌组织中表达下调,鼻咽癌组织中次级淋巴滤泡及其位于生发中心的FDC数目的减少是NAP1基因在鼻咽癌组织中表达下调的主要原因,但其生物学功能及作用机制尚不明确。构建PCMV-tag2A-NAP1真核表达载体,转染192
3、9细胞,采用荧光定量PCR和Westernb1otting检测转染后细胞内NAP1的表达水平,流式细胞技术检测NAP1融合蛋白与激活的B淋巴细胞的结合效率。结果表明,NAP1融合表达载体转染组的mRNA和蛋白质表达量显著升高,NAP1融合表达载体能在1929细胞中稳定表达。流式细胞检测结果显示,NAP1与B淋巴细胞组活化后的结合率(70.35%)明显高于未活化组的结合率(44.47%),表明NAP1能够特异性结合到B细胞表面,该研究为后续B淋巴细胞中NAP1特异性结合蛋白的分离与鉴定奠定了基础。三、项目研究总结报告预定计划执行情况,项目研究和实践情况,研究工作中取得的主要成绩和收获,研究工作有
4、哪些不足,有哪些问题尚需深入研究,研究工作中的困难、问题和建议。(字数不限,可加页面)1、完成了NAP1基因的真核表达载体的构建、表达和检测。在有关基因克隆的载体构建,基因的真核表达,细胞培养等方面得到了很好的训练,达到了预期效果。2、进行了重组质粒NAP1mRNA表达水平的Rea1-TimePCR检测,重组质粒NAP1融合蛋白表达水平的WeSternb1otting鉴定。3、进行了NAP1融合蛋白与B细胞结合的FCM检测。实验结果表明,真核表达的Myc-NAP1蛋白质能够特异性结合到B细胞表面,在激活的B淋巴细胞上可能存在NAP1特异性的结合蛋白。该研究为激活的B淋巴细胞中NAP1特异性结合
5、蛋白的分离与鉴定奠定了基础。四、经费使用情况经费合计IOoOo元,其中,学校配套资助2000元,学院(所)配套资助0元,其他经费1000元。经费支出情况:购买实验材料及测试费开支13000元。五、指导教师及学院(系)审核意见项目指导教师对结题的意见,包括对项目研究工作和研究成果的评价等。该课题研究已顺利完成,撰写研究论文2篇,其中1篇已发表。主持人周琳琳的毕业论文获学校优秀毕业论文。学生通过该项目的实施,在实践能力方面得到了大的提升,达到了预期效果。根据以上情况,建议结题。负责人签章:年月日项目主持人所在学院(系)对结题的意见,包括对项目研究工作和研究成果的评价等负责人签章:年月日六、学校结题审核意见学校对项目研究的任务、目标、方法和研究成果水平等进行评价,是否结题。