乳制品中乳糖和蔗糖的测定.docx

《乳制品中乳糖和蔗糖的测定.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《乳制品中乳糖和蔗糖的测定.docx（8页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、乳制品中乳糖和蔗糖的测定糖类测定方法概述1、提取液制备(1)常用提取剂水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.53.5mgm1(3)含脂肪食品先脱脂，然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用7075%乙醇溶液提取。用高浓度乙醇的目的，降低酶的作用，避免糖被酶水解，还可以使淀粉和糊精沉淀。(5)含乙醇及C02液态食品，蒸发至1/31/4原体积，以除去C2H5OH及C02o(6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解。(7)提取固体样品有时需要加热，以提高提取效果。一般在4050,防止多糖溶出。(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶

2、性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁，可影响颜色、浑浊、过滤困难。(2)澄清剂醋酸铅(中性)Pb(CH3C00)23H20,形成沉淀，吸附杂质，可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。乙酸锌和亚铁氟化钾二者生成氟亚铁酸锌I吸附蛋白质等干扰物。硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。(3)澄清剂用量用量适宜，以无新沉淀为准，如2m1饱和醋酸铅(30%)。(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定，生成铅糖化合物。常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。测定方法GB5009.8-2016食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定GB5413.5-2010婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定两个标准中都是有两种方法：高效

3、液相色谱法和莱茵一一埃农氏法适用范围GB5009.8-2016食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定第一法“高效液相色谱法”，本法适用于谷物类、乳制品、果蔬制品、蜂蜜、糖浆、饮料等食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的测定。第二法“酸水解-莱因-埃农氏法”，本法适用于食品中蔗糖的测定。GB5413.5-2010婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定适用于婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定。今天我们重点看一下第二法莱茵一一埃农氏法第二法莱茵埃农氏法原理GB5009.8-2016食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定本法适用于各类食品中蔗糖的测定:试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转

4、化为还原糖，按还原糖测定。水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。GB5413.5-2010婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定乳糖：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，直接滴定已标定过的费林氏液，根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。蔗糖：试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解为还原糖，再按还原糖测定。水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。对比两个标准，蔗糖的检测原理是一样的。着重看一下GB5413.5的测定方法:溶液配制：乙酸铅溶液(200g1)：称取20Og乙酸铅，溶于水并稀释至IOOOm1o草酸钾一磷酸氢二钠溶液：称取草酸钾30g,磷酸氢二钠70g,溶于水并稀释至IO

5、OOm1o盐酸（1+1）：1体积盐酸与1体积的水混合。氢氧化钠溶液（300g1）：称取30Og氢氧化钠，溶于水并稀释至IOOOm1o费林氏液（甲液和乙液）甲液：称取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5m1浓硫酸，加水至50Om1o乙液：称取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500m1,静置两天后过滤。酚歆溶液（5g1）：称取0.5g酚猷溶于IoOnI1体积分数为95%的乙醇中。次甲基蓝溶液（10g1）：称取Ig次甲基蓝于IOOnI1水中。分析步骤：1.在测定前，我们需要先标定费林氏液用乳糖标定称取预先在94七2七烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g（精确到0.Img）f

6、用水溶解并定容至25OnI1f将此乳糖溶液注入一个50m1滴定管中，待滴定。预滴定：吸取IOm1费林氏液（甲、乙液各5m1）于25Om1三角烧瓶中f加入20m1蒸储水（放入几粒玻璃珠）f从滴定管中放出15m1样液于三角瓶中f置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状态15s一加入3滴次甲基蓝溶液一继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止f读取所用样液的体积。精确滴定：另取IOm1费林氏液(甲、乙液各5m1)于25OnI1三角烧瓶中f加入20m1蒸储水(放入几粒玻璃珠)f加入比预滴定量少0.5m11Om1的样液一置于电炉上，使其在2min内沸腾，维持沸腾状态2minf加入3滴次甲基蓝溶液f以每两秒一

7、滴的速度徐徐滴入(溶液蓝色完全褪尽即为终点)一记录消耗的体积。按式(2)、(3)计算费林氏液的乳糖校正值(f1)式中：A1实测乳糖数，单位为毫克(mg)；V1滴定时消耗乳糖溶液的体积，单位为毫升(m1)；m1称取乳糖的质量，单位为克(g);f1费林氏液的乳糖校正值；A11由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数，单位为毫克(mg)o用蔗糖标定称取在10522。C烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g(精确到0.Img)f用50m1水溶解并洗入IOOm1容量瓶中一加水Iom1,再加入Iom1盐酸(1+1)一置于75C水浴锅中，时时摇动f使溶液温度在67.0695C,保温5min一冷却后，加2滴酚猷溶液(5g

8、1)一用氢氧化钠溶液(300g1)调至微粉色一用水定容至刻度。再进行上述预滴定和精确滴定的操作(同乳糖标定)按式(4)、(5)计算费林氏液的蔗糖校正值(f2)：样品预处理：称取婴儿食品或脱脂粉2g,全脂加糖粉或全脂粉2.5g,乳清粉1g,精确到O.Img,用IoOm1水分数次溶解并洗入25Om1容量瓶中。徐徐加入4m1乙酸铅溶液、4m1草酸钾一磷酸氢二钠溶液，并振荡容量瓶f用水稀释至刻度f静置数分钟一用干燥滤纸过滤f弃去最初25m1滤液后一所得滤液作滴定用。乳糖的测定滴定预滴定：吸取IOnI1费林氏液(甲、乙液各5m1)于25Om1三角烧瓶中一加入20m1蒸福水(放入几粒玻璃珠)f从滴定管中放

9、出15m1样液于三角瓶中f置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状态15sf加入3滴次甲基蓝溶液f继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止一读取所用样液的体积。精确滴定：另取IOm1费林氏液（甲、乙液各5m1）于25OnI1三角烧瓶中一再加入20m1蒸储水（放入几粒玻璃珠）f加入比预滴定量少0.5m11.Om1的样液f置于电炉上，使其在2min内沸腾，维持沸腾状态2min一加入3滴次甲基蓝溶液一以每两秒一滴的速度徐徐滴入（溶液蓝色完全褪尽即为终点）f记录消耗的体积。乳糖试样中乳糖的含量X按式（6）计算式中：X试样中乳糖的质量分数，单位为克每百克（g100g）；F1由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖

10、数，单位为毫克（mg）；f1费林氏液乳糖校正值；V1滴定消耗滤液量，单位为毫升（m1）；m试样的质量，单位为克（g）。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。蔗糖的测定取50m1样液（过滤后的滤液）于IOOm1容量瓶中f加水Iomu再加入Iom1盐酸（1+1）置于75C水浴锅中，时时摇动f使溶液温度在67.0C695C,保温5min一冷却后，加2滴酚猷溶液（5g1）一用氢氧化钠溶液（300g1）调至微粉色一用水定容至刻度。滴定预滴定：吸取IOm1费林氏液（甲、乙液各5m1）于25Om1三角烧瓶中一加入20m1蒸得水（放入几粒玻璃珠）f从滴定管中放出15m1样

11、液于三角瓶中一置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状态15sf加入3滴次甲基蓝溶液一继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止f读取所用样液的体积。精确滴定：另取IOm1费林氏液（甲、乙液各5m1）于25OnI1三角烧瓶中一再加入20m1蒸储水（放入几粒玻璃珠）f加入比预滴定量少0.5m11.Om1的样液f置于电炉上，使其在2min内沸腾，维持沸腾状态2minf加入3滴次甲基蓝溶液一以每两秒一滴的速度徐徐滴入（溶液蓝色完全褪尽即为终点）f记录消耗的体积。若试样中蔗糖与乳糖之比超过3：1时，则计算乳糖时应在滴定量中加上表2中的校正值数后再查表Io精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15沆检出限为O.4g100go