超快核酸银染试剂盒说明书.docx

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1、超快核酸银染试剂盒说明书1、试剂盒简介货为了适应超快核酸银染试剂盒快速检测和疫病研究的需要，本公司参照O1E国际标准中规定的引物序列，经多次实验及系统优化，开发生产了本讨剂盒。应用本冏喻进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。2、试剂盒组成：试剂盒组成包括核酸提取试剂和核酸扩增试剂，具体组成参见表1：s表1：试剂盒组成（50test/盒）组成成分体积样品DNA提取液15m1X1管样品DNA提取液250011管核酸扩增试剂：DEPC水5m1X1管BPPCR反应液75011管Taq酶（5Uu1）4i1管阴性对照Im1X1管BP阳性对照ImIXI管操作流程

2、：1 .从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4C。2 .设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50u1；3 .样本孔中加入待测样本50u1；空白孔不加。4 .除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体IooU1,用封板膜封住反应孔，37C水浴锅或恒温箱温育60min.5 .弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350UD,静置Imin,甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）.6 .每孔加入底物A、B各501,37C避光孵育15min7 .每孔加入终止液50u1,15min内，在45Onm波

3、长处测定各孔的OD值。样本：血清血浆组织匀浆等液体样本标记物X血清血浆组织匀浆等应用，仅用科研实验检测定量，定性检检测方法:夹心法技术要求：全程按说明书步骤检测，操作规范，专业，仪器设备齐全。规格：48t96t性状：液体运输方式：快递发货有效期：6个月品特点：灵敏性高，一-性，吸附均匀，吸附性好，回收利用率高，是一款可以让您放心选购的产品。使用范围：此产品供科研实验使用，不得用于-。用途：用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。注意事项：1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀

4、释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。2,各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。3 .请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔di一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（XnX5）。4 .封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5 .底物请避光保存。6 .严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以醉标仪读数为准.7 .所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。8 .本试剂不同批号组分不得混用。9 .不能使

5、用过期产品。10 .如与英文说明书有异，以英文说明书为准。每个样品测试反应体系配制见下表2。表2每个样品测试反应体系配制表试齐UPCR反应液Taq酶合计用量14.5U10.5U115U1样本处理及要求：1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4匕过夜后于IO(X)g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-2(C或-80保存，但应避免反复冻融。2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8CIOOOg离心20分钟，或将标本放于-2(C或-80匕保存，但应避免反复冻融。3. 组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会

6、影响测量结果)，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如Ig的组织样品对应9m1的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000Xg离心510分钟，取上清检测。4. 细胞培养物上清或其它生物标本：IOOOg离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-2(C或-8(C保存，但应避免反复冻融。注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。试剂盒组成及试剂配制：1 .酶联板(Assayp1

7、ate)：一块(96孔)。2 .标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。3 .样品稀释液(Samp1eDi1uent)：1X20m1瓶4 .生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDi1uent)：IX1Om1/瓶。5 .辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidinDi1uent)：IX1omI/瓶。6 .生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1X120u1/瓶(1：100)7 .辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1120u1JS(1：100)8 .底物溶液(TMBSubstrate)：IX1oinI/瓶。9 .浓洗涤液(WaShBuffer)：1X20d瓶，使用时每瓶用蒸储水稀释25倍。10 .终止液(StopSo1ution)：IX1OmI/瓶(2NH2S04)。