凝聚胺介质交叉配血标准操作程序文件.docx

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1、凝聚胺介质交叉配血标准操作程序文件1 .【原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发生聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM),降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。其后，加入凝聚胺(溶液，它是一种高阶阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入凝聚胺(Resuspendin

2、g), Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验旨果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。2 .【试剂】75T 装量(BA-1001)套组内容：主要成份 .LIM(Low Ionic Mediun) 1 瓶X55ml 葡萄糖、EDTA (2Na) .Polybrene Solution1 瓶X7. 5mlPolybrene 氯化钠 .Resuspending Solution 1 瓶X7. 5ml柠檬酸钠、葡萄糖3、【试验步骤】3. 1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清(血浆)

3、2滴，加供血者3-5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴，次侧管反之。3. 2各加LIMO. 7ml,混合均匀后，再各加Polybrene2滴,并混合均匀.3. 3用血库离心机3400转/分离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约液体.3. 4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做.3. 5最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混合并涂片，显微镜下观察结果：在30秒T分钟内凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。3.

4、 6配血相合后，认真填写配血记录单和登记本，并通知临床取血。4、【注意事项】4. 1可以用含EDTA之血浆代替血清使用。4. 2若病人血清（血浆）含肝素,如洗肾患者,须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。4. 3本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。4. 4试剂使用前请回复室温再行操作。4.5加做辅助性抗球蛋白试验，H的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。4. 6在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在30秒内观察结果