血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定.docx

《血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定.docx（3页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、血清厂谷氨酰转移酶(-GGT)速率法测定1 .实验原理GGT催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以厂谷氨酰-3-竣基-对硝基苯胺为底物，将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽，生成对硝基苯胺和-谷氨酰双甘肽。在405nm进行吸光度检测，吸光度升高的速率与标本中GGT活力成正比。-谷氨酰-3-拨基-对硝基苯胺+双甘肽cg对硝基苯胺+r谷氨酰双廿肽2 .标本：2.1病人准备：无特殊。2.2类型：血清或EDTA血浆。3,标本存放：室温可保存8小时；28可保存3天；-20保存至少可稳定1周。4 .标本运输：常温条件下保存运输。5 .标本拒收标准：细菌污染的标本。6 .实验材料6.1试剂利德曼-GGT测定试剂

2、盒(试剂16X641试剂2616m1)6.1.1试剂组成试剂I(R1)：6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含叠氮钠(0.95g1)为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。1.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCa1U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。1.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7 .仪器：奥林巴斯AUIoOO生化分析仪8 .操作步骤8 .1项目基本参数：参见AU1OOO生化分析仪项目

3、测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU1OOO生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11 .计算方法：以TrUCaIU复合校准品GGT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行GGT活力检测，可以直接使用A/min均值乘以计算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算GGT活力的计算因子见下表：AA/minX因子=GGT活

4、力U/1底物起始的反应（37C）样品起始的反应（37C）405nm1421115812 .参考值范围：女性7-32U/1；男性-49U1参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义：-谷氨酰转移酶（GGT）又称-谷氨酰转肽酶。存在于肝脏和胆汁中，是肝胆疾病最敏感的指示物。因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值，因此y-谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病。结合丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯醐等其它酶，-谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断非常有价值。14 .操作性能14.1线性范围：2-500U1（,14. 2

5、精密度：精密度的评估是根据NCC1S推荐的标准方法，AUIOOO批内精密度小于3%,总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCC1S的规则。批内精密度n=20X(U/DS(U/1)CV(%).批间精密度n=20X(U/1)S(U/1)CV(%)样品139.90.992.48样品141.50.621.49样品273.60.851.16样品272.30.610.85样品32061.320.64样品32040.740.3614.3方法学比较：本公司的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x）,同时对78个样品进行GGT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+1.O

6、OU/1；r=0.999014.4灵敏度：本试剂的检测限为2U/1。14.5病人结果可报告范围：2-500U/1。15 .超出范围结果处理：本法对GGT活力检测的最大500U/1,当样品测定值超过上限时，应将样品用9g1氯化钠溶液作1+5稀释，重新测定，结果乘以6。16 .病危报警值的处理17 .方法局限性17 .1本法对GGT活力检测的最大500U/1,当样品测定值超过上限时，应将样品用9g1氯化钠溶液作1+5稀释，重新测定，结果乘6。18 .2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mo11,胆红素浓度684mo11,血红蛋白浓度44.00g1,甘油三酯浓度22.6mmo11时没有观察到干扰

7、。19 .补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。20 .参考文献1. Thomas1.C1inica11aboratoryDiagnostics.1s1ed.Frankfurt:TH-BooksVer1agsgese11schaft;1998.p.80-6.2. PersijnJP,vanderSi1kW.Anewmethodforthedeterminationofgamma-g1utamy1transferaseinserum.JC1inChemC1inBiochem1976;14:4217.3. SzaszG.Gamma-G1utamy1transpeptidase.In:BergmeyerHU.McthodenderenzymatischenAna1yse.Weinheim:Ver1agChemie,1974.p.757.4. FischbachF,ZawtaB.Age-dependentreference1imitsofsevera1enzymesinp1asmaatdifferentmeasuringtemperatures.K1in1ab1992;38:555-61.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。