生化检验试剂空白、样本空白及水空白测量方法和注意事项.docx

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1、生化检验试剂空白、样本空白及水空白测量方法和注意事项试剂空白生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所有终点法的测试都需要把试剂本身吸光度扣除。试剂本身的吸光度就是试剂空白。测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸储水来测量。传统手工方法中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、空白管。空白管是试剂加蒸储水,测出来就是试剂空白。操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异要测定试剂空白,为实时试剂空白。自动生化仪上试剂空白一般表现为零点吸光度,吸光度通过校准确立的。样本空白溶血、脂血、黄疸会导致样本本身吸光度对测试结果造成影响,对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可去除这方面影响。测量方法是按

2、照正常测试的试剂和样本量,把试剂换成蒸储水或生理盐水来进行测量。与消除样本空白有关的大约有如下几点:1、在双试剂测定时,加入试剂工和样品后的吸光度可一定程度上扣除样本空白,所以有单试剂不能扣除样本空白的说法。2、优质试剂抗干扰能力都比较强有些双试剂,R1加入后先和样本孵育一段时间,将血红蛋白、脂肪、胆红素等反应掉,再加入R2开始测定反应。在一定范围内都可以消除样本空白。3、现代全自动生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则是根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征,选择两个波长和,使干扰组分在这两个波长处的吸光系数相等,使待测物质在两波长处的吸光系数有显著差别。以两波长分别测定分析溶液的吸光度,以两个吸光度值之差SA)计算。这也可以扣除一部分样本空白。4、有些仪器,有专门血清信息、功能设置,做法都是单独占用一个空白通道来计算,也叫做样品空白校准。水空白比色杯在加入水以后的吸光度。水空白意义主要是对光路系统进行检查和校正,如光源、比色杯等,同时在计算中起到消除杯差作用。

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