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1、筋骨草水煎液对慢性宫颈炎的保护作用研究唐洁I,龙之浩2,蔡晓明3(1.四川省遂宁市中医院药剂科;2.川北医学院临床医学系;3.川北医学院基础医学院,四川南充637000)【摘要】目的:研究筋骨草水煎液对大鼠慢性宫颈炎的保护作用及机制。方法:用苯酚胶浆法建立慢性宫颈炎模型,设空白对照组、模型组、筋骨草水煎液组和地塞米松组。观察大鼠活动情况、宫颈组织病理,测定宫颈指数,采用酶联免疫吸附试验法检测宫颈组织中PGE2的含量。结果:筋骨草组与模型组比较减轻了慢性宫颈炎大鼠宫颈组织病变,数据由SPSSI3.0软件分析,慢性宫颈炎筋骨草组PGE2、宫颈指数平均值为707.46pg/m1、0.4762,比模型
2、组降低了11.19%、9.01%,达显著差异水平。结论:筋骨草水煎液可以缓解大鼠慢性宫颈炎症状,其机制可能与降低PGE2的含量有关。【关键词】筋骨草;慢性宫颈炎;保护作用【中图分类号】R711.32【文献标志码】AStudyonprotectiveeffectofwaterdecotionofAjugadecumbensonchroniccervicitisinratsTANGJie111ONGZhiHao2,CAIXiao-ming3(7.PharmacyDepartmentofSuiningtraditiona1Chinesemedicinehospita1;2.DepartmentofC
3、1inica11aboratoryMedicine,NorthSichuanMeica1co11ege;3.Schoo1ofBasicMedica1Sciences,NorthSichuanMeica1co11ege:Nanchong,637000,Sichuan,China)AbstractObjective:TbstudytheprotectiveeffectsofaqueousextractofAjugadecumbensonchroniccervicitisandthemo1ecu1armechanismofprotectioninrats.Methods:Chroniccervici
4、tisinratswasinducedbyinjectionofpheno1muci1agesuspensionintothevagina,ratswererandom1ydividedintocontro1group,mode1group,andAjugadecumbens(48、12gkg)groupsanddexamethasone(4mgkg)group.Patho1ogica1changesincervica1tissuesofratswereobserved,cervica1indexwasdetected,PGE2wasmeasuredbyE1ISAmethod.Resu1t:t
5、hePGE2andcervica1indexofAjugadecumbensgroupisonaverage707.46pgm1and0.4762,downby11.19%and9.01%comparedwiththemode1group,reachingthesignificantdifference1eve1(P0.05).Conc1usion:ThesefindingsindicatedthatthewaterdecoctionofAjugadecumbenshasprotectiveactionuponchroniccervicitis,inwhichtheinhibitionofPG
6、E2waspotentia1antiph1ogisticmechanism.KeywordsAjugadecumbens;Chroniccerviciti;Protectiveeffect宫颈炎为是一种常见的女性生殖系统疾病,临床分为急性和慢性两类,其中以慢性宫颈炎较为常见,临床表现为白带增多、腰痛、下腹坠痛等,严重者会影响日常生活,治疗不及时会导致病情绵长不愈,甚至引起不孕症,目前还认为慢性宫颈炎是诱发宫颈癌的主要原因之一。临床主要采用物理、手术及药物治疗,前两种治疗方法不但很大程度上损伤机体,而且存在白带增多、水样排液、出血等并发症I1局部给药有一定疗效,但只治标不能治本,容易复发,近年来
7、有报道中药口服可以治疗慢性宫颈炎,疗程虽长,却能达到根治的目的,同时不良反应小。筋骨草(AjUgadecumbensThunb.)又称白毛夏枯草、金疮小草、散血草、破血丹、苦草等,广泛分布于全国各地,一年或二年生草本,为唇形科植物,原产于欧亚大陆,该属植物被广泛引种作为覆盖植物丛生于路旁、溪边的阴凉润湿处,亦见于潮湿草甸或林地,高10-30cm,基部匍匐,叶对生,花期37月,果期5-11月。广泛分布于我国南方,资源极为丰富。筋骨草性寒、味苦,归肺经,为全草类中药,据本草纲目拾遗记载,筋骨草具有止咳化痰、清热凉血、解毒消肿、止痢的功效。四川中药志记载,筋骨草可治妇女月事痛。民间用于治疗慢性支气管
8、炎、风热咳嗽、外伤等。结合筋骨草的性味归经及功效,本研究在慢性宫颈炎的治疗方法探索中具有实际意义,从而为开发我国丰富的筋骨草资源奠定基础。I材料与方法1.1 材料与药品筋骨草水煎液(取四川南充产筋骨草全草浸泡30min,煎煮至沸后调至文火,继续煎煮1520min,同法煎煮两次,合并药液后浓缩至需用浓度。试验鼠为清洁级SD大鼠,雌性、未孕,体重160-180g(由川北医学院实验动物中心提供,合格证号:SYXK(川)2013-076)。屏随环境饲养。苯酚购自成都豪乙生物有限公司,阿拉伯树胶购自成都荣之源生物有限公司,苯酚胶浆现用现配(取苯酚5g,阿拉伯树胶15g,加蒸储水至20m1,配成25%的苯
9、酚胶浆)。大展PGEz放免试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司,地塞米松磷酸钠注射液购于成都第一药业有限公司。1.2 造模与给药采用范英昌等报道的方法,SD大鼠适应性喂养一周后,腹腔注射3%的戊巴比妥钠1m1kg麻醉,以头低尾高的体位固定,将0.5m1玻璃注射器(用灌胃针头)轻轻插入大鼠阴道内约3-4mm处,向其中缓慢注入苯酚胶浆0.2m1,使用医用无菌棉签堵塞阴道口,保持体头低尾高位5min后放回笼内,每隔2天注射1次,连续5次4。造模成功表现为大鼠阴道红肿并伴有黄白色分泌物。将大鼠随机分为6组:空白组(10只),模型组(10只),筋骨草低(4gkg,10只)、中(8gkg,10只)、高剂量(
10、12gkg,10只)组,地塞米松组(4mgkg,10只)。给药组从第一次注射造模后第3天开始灌胃,同时模型组和空白对照组灌服生理盐水(IOmIkg),连续给药15天。1.3 大鼠活动观察观察大鼠一般情况,阴道口是否干燥,外阴及阴道口粘膜有无红肿,阴道有无分泌物。1.4 宫颈指数及其组织病理学检查末次给药后24小时处死大鼠(杀剖前禁食禁水4h),取出阴道至子宫角处组织,分离宫颈(子宫阴道部开口与双子宫分叉交界处)后精密称定,计算宫颈指数。分离部分宫颈组织备检,用10%中性甲醛固定,常规石蜡包埋切片,HE染色,镜下观察宫颈组织病理变化情况。1.5 宫颈组织PGE2测定即刻用液氮冷冻部分宫颈组织,精
11、密称定3-6mg于微型匀浆器中,加无水乙醇0.4m1研磨,再加生理盐水1.6m1制成匀浆,3000rmp,4C离心15min,吸出上清液,-80C保存。按放免试剂盒说明书检测PGE2的含量。1.6 统计学分析实验数据以(Xs)表示,采用差异显著性统计分析(用SPSSI3.0软件进行统计),以P0.05为差异具有统计学意义。2结果与分析2.1 大鼠活动观察空白组大鼠活动正常,外阴洁净,阴道口无红肿。模型组动物扎堆倦卧,毛发蓬松,大多数外阴可见大量黄色或白色的浓稠分泌物,阴道口红肿,少数阴道有流血。筋骨草组可见白色分泌物,阴道口粘膜红肿程度较模型组明显减轻。2.2 宫颈脏器指数测定结果及组织病理学
12、检查空白组大鼠宫颈指数最大值为0.4150,最小值为0.3480,模型组宫颈指数最大值为0.5524,最小值为0.5000,与空白组比较,模型组宫颈指数显著升高(PVOQ1)。筋骨草组宫颈指数最大值为0.5014,最小值为0.4185,与模型组相比,筋骨草低、中剂量组达显著差异水平(P0.05),高剂量组达极显著差异水平(Pn=10)组别脏器指数(。)空白对照组0.40920.0808模型组0.51910.0177*地塞米松组O.4357O.O133低剂量组0.48560.0136中剂量组0.48280.0130高剂量组0.46010.0213*P0.05,与空白对照组比较;P0.05,与模型
13、组比较;gP0.05,与筋骨草高剂量组比较有显著差异。宫颈指数1.60I1111I空白斑帙型西药组-低组筋中阻筋一组图1各组大鼠宫颈指数(。)比较Figure8Comparationofcervica1indexinrats与空白组比较,模型组宫颈组织鳞状上皮明显增生,炎性细胞浸润明显,说明宫颈炎模型复制成功。与模型组比较,筋骨草组病变有所减轻,其中高剂量组炎细胞浸润程度最低,结果如图2所示。图2大鼠宫颈组织病理变化(HEX20)Figure9Cervica1tissuepatho1ogica1changesinratsK:空白对照组;M:模型组;X泗药组;J1:低剂量组;J2:中剂量组;J3
14、:高剂量组2.3宫颈组织PGE2测定空白组大鼠宫颈组织PGE2最大值为600.03pgm1,最小值为569.85pgm1,模型组PGE2最大值837.82pgm1,最小值为769.48pgm1,方差分析表明模型组与空白组宫颈组织PGE2含量达极显著差异水平(P0.01)o筋骨草组PGE2最大值为750.46pgm1,最小值为66829pgm1,与模型组比较,达极显著差异水平(P0.01);与筋骨草高剂量组相比,低剂量组PGE2含量达极显著差异水平(P0.01),中剂量组未达显著差异水平,结果见表2、图3。表2各组大鼠宫颈组织中PGEz含量比较(xs,n=10)Tab1e5Comparation
15、ofPGE2incervica1tissue(Xs,n=10)组别PGE2(pgm1)空白对照组609.84+22.67模型组796.58+21.30*地塞米松组673.5113.31低剂量组734.2410.44中剂量组708.391736高剂量组679.7466.32V0.05,与筋骨草高剂量组比较有显著差异。Figure10ComparationofPGE2incervica1tissue3讨论PGE2是由于局部组织细胞受到刺激而产生的炎性介质,可增强毛细血管通透性,从而进一步引起炎症反应性水肿和渗出,降低PGE2的生成将显著改善局部炎症。血液中的PGE2很快失活,而炎症组织中的PGE2却能保持恒定水平,因此,直接测定宫颈组织中PGE2的表达,更能说明炎性反应的程度。地塞米松是一种临床上仍广泛应用的长效糖皮质激素,在抗炎药物开发中其作为阳性对照具有常见性。本试验基于筋