识别小分子的核酸适配体筛选及亲和力表征方法研究.docx

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1、识别小分子的核酸适配体筛选及亲和力表征方法研究提名者：黄石市人民政府提名意见：该项目研究成果符合2023年湖北省自然科学奖申报条件，提交成果均为2023年6月30日以前发表，同意申报。项目简介：本项目专门针对小分子开展新型核酸适配体筛选和亲和力表征研究。通过构建文库固定-荧光定量PCR监测-高通量测序-非标记表征组合筛选策略，可以实现筛选过程的可视化监测、核酸适配体的快速表征，大大提高了筛选效率。已经成功筛选了盐酸克伦特罗、邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯、5羟甲基糠醛等小分子的核酸适配体。在通过对筛选工艺进行系统比较研究，发现国产化磁珠、树脂可以达到进口产品的同等效果，筛选成本可节约90%。同时

2、，通过简单的非标记表征方法，可以快速获得高亲和力核酸适配体。以氯霉素、三聚鼠胺、多巴胺的核酸适配体为模型，发现小分子与金纳米颗粒的结合抑制了适配体与小分子的结合，提出了纳米金/小分子/适配体体系变色的新机理。这个新原理的发现，与前期用金纳米颗粒来表征核酸适配体与靶标结合的机理均不同，为用比色法来表征适配体与小分子间的结合特性提供了新视觉。同时，以两种不同识别性能的多巴胺核酸适配体为研究模板，提出多方法相互佐证的核酸适配体亲和力表征系统。通过本项目提出的新理论，为避免假阳性核酸适配体的发现提供理论支撑，为核酸适配体鉴定提供了新理论基础。本项目在2023年6月30日前已发表研究论文7篇，SC1论文

3、5篇，中文论文2篇。本项目相关的研究成果已获国家发明专利2项。项目提出的筛选技术被同行采纳应用，解决了识别小分子新型核酸适配体发现效率低的难题。同时，本项目提出的金纳米颗粒/小分子/核酸适配体相互作用新机制，为解决核酸适配体表征中假阳性适配体的发现提供理论基础。通过以两种模型核酸适配体为研究对象，验证了多种亲和力表征方法，提出优良核酸适配体的发现必须结合多种表征方法。其中，关于金纳米颗粒/小分子/核酸适配体相互作用新机制的研究成果于2023年发表，在WoS的引用次数为101次。代表性论文专著目录：1. 1iuXX,HeF,ZhangF,ZhangZJ,HuangZC,1iuJW.Dopamin

4、eandme1aminebindingtogo1dnanopar1ic1esdominatestheiraptamer-based1abe1-freeco1orimetricsensing.Ana1.Chem.2023,92(13):9370-9378.2. 1iuXX,1uQ,ChenSR,WangF,HouJJ,XuZ1,MengC,HuTY,HouYY.Se1ectionandidentificationofnove1aptamersspecificforC1enbutero1basedonssDNA1ibraryimmobi1izedSE1EXandgo1dnanopartic1esb

5、iosensor.Mo1ecu1es2018,23(9):2337.3. TaoXQ,HeF,1iuXX,ZhangF,WangX,PengYY,1iuJW.Detectionofch1oramphenico1withanaptamer-basedco1orimetricassay:critica1eva1uationofspecificandunspecificbindingofana1ytemo1ecu1es.MicrochimicaActa2023,187:668.4. 陈思锐，侯建军，刘细霞王芳，张婷，陆琪.基于核酸适配体的微囊藻毒素1R纳米金生物传感检测方法的建立及其识别机制研究.食品质量安全检测学报，2019,10(17):5748-5753.5. 陈思锐，王芳，孟晨，刘细霞*,侯建军，陆琪.基于核酸适配体建立的小分子危害物检测技术研究进展.食品质量安全检测学报,2018,9(16):4187-4192.主要完成人：刘细霞、侯建军、徐振林、何凡、陶晓奇主要完成单位：湖北师范大学、华南农业大学、西南大学