全国细菌耐药监测网技术方案2018版.docx

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1、全国细菌耐药监测网技术方案（2018版）全国细菌耐药监测网（ChinaAntimicrobialResistanceSurveillanceSystem,CARSS）是唯一由政府建立，覆盖全国二、三级医疗机构的大型细菌耐药性监测网络。通过本监测网络，可获取有科学价值的、分层的细菌耐药性及变迁资料，掌握全国细菌耐药性流行趋势及新威胁，为政府、卫生行政部门制定相关政策及评估干预措施的有效性提供科学依据。全国细菌耐药监测网包括主动监测和被动监测两种形式，常规开展被动监测，定期或不定期开展主动监测。主动监测技术方案根据监测目标另行制定。本方案仅涉及被动监测。为了维持监测结果的有效性及可比性，保证监测结

2、果质量，特制订本方案。本方案由国家卫生计生委合理用药专家委员会全国细菌耐药监测学术委员会讨论通过，每年审核，定期修订。一、监测范围收集网点医院按规范化操作、自临床标本中分离的有临床意义和公共卫生意义的所有普通细菌及其抗菌药物敏感性试验（以下简称药敏试验）结果。以收集资料为主，必要时，收集菌株用于复核结果和质量控制。为了提高监测数据质量，各网点医院应提高临床标本，特别是无菌体液标本送检率；提高送检标本特别是痰液、血液标本合格率。各实验室应提高细菌，特别是苛养菌的检出率；应掌握分离细菌的临床意义，注意收集感染病原菌。目标细菌目标细菌为自临床标本中分离的有临床意义的细菌，包括以下标本及细菌：（一）无

3、菌部位标本（血液、脑脊液、骨髓、胸水、膀胱穿刺尿、腹水、无菌腔隙穿刺液、组织等）来源的所有非污染细菌；（二）开放部位合格标本（痰、咽拭、尿液、粪便等）来源的具有临床意义的细菌。三、目标细菌鉴定采用专业认可的鉴定系统或手工方法进行目标细菌鉴定。所有分离细菌尽可能鉴定到种，如表皮葡萄球菌，而非凝固酶阴性葡萄球菌。四、抗菌药物敏感性试验根据国际标准、行业要求或仪器制造商建议，规范地进行药敏试验，可采用手工法、仪器法，报告抑菌圈直径（mm）、最小抑菌浓度（MIC值,gml）o全国细菌耐药监测网不接受仅为“耐药（R）”、“中介（I）”、剂量依赖敏感（SDD）、“敏感（S）”的报告结果。采用自动或半自动仪

4、器进行药敏试验时，应按照仪器制造商的要求补充试验，报告经补充试验确认的药敏结果。商品化药敏试验药物浓度范围若不覆盖判断折点，需根据本院临床需要及本方案要求进行补充试验，报告经补充试验确认的药敏结果。五、特殊耐药性检测方法（不包含分子生物学检测方法）（一）甲氧西林（苯哇西林）耐药葡萄球菌（MRS）1、金黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌甲氧西林（苯嗖西林）耐药性待测菌按照纸片扩散法操作步骤，采用30g头泡西丁纸片于3335孵育1618h,或按照微量肉汤稀释法，采用4gml头抱西丁于3335孵育1620h,21m或4lml为甲氧西林（苯哇西林）耐药金黄色葡萄球菌或路邓葡萄球菌。2、路邓葡萄球菌、伪中间葡萄

5、球菌、施氏葡萄球菌以外的凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林（苯嘎西林）耐药性待测菌按照纸片扩散法操作步骤，采用30g头抱西丁纸片于3335孵育24h,24mm为甲氧西林（苯嘎西林）耐药凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）o若18h后即出现耐药可报告为MRCNSo（二）青霉素不敏感肺炎链球菌对于苯哇西林纸片抑菌圈直径19）的肺炎链球菌，需使用MIC方法测定其对青霉素的敏感性。（三）高水平氨基糖昔类药物耐药肠球菌筛选试验1、纸片扩散法将0.5麦氏浊度待测菌接种于平板，贴120场庆大霉素或300g链霉素纸片，352C孵育1618h,抑菌圈直径6m为耐药、10mm为敏感，79mm为不确定，需以微量肉汤稀释法或琼脂

6、稀释法确认。2、微量肉汤稀释法将0.5麦氏浊度待测菌接种于含500gml庆大霉素脑心浸液肉汤（BHI）于352C孵育24h,或接种于含1000gml链霉素的BHI肉汤于352C孵育2448h（若24h敏感继续孵育），任何生长为耐药。3、琼脂稀释法将10l0.5麦氏浊度待测菌接种于含500gml庆大霉素BHI平板于352C孵育24h,或接种于含2000gml链霉素BHI平板于352C孵育2448h（若24h敏感继续孵育），1个菌落为耐药。（四）金黄色葡萄球菌和肠球菌属对万古霉素敏感性万古霉素MIC8gml菌株筛查试验：将0.5麦氏浊度待测金黄色葡萄球菌10l或肠球菌110A1接种于含6gml万古

7、霉素的BHI平板（最好用微量吸液管滴加，也可以用棉拭子在菌悬液中浸润后挤干，涂布直径1015mm或划线接种），352C孵育24h,1个菌落可能为金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性减低或肠球菌属对万古霉素耐药。（五）-内酰胺酶检测1、葡萄球菌属（1）青霉素MICO.12gml或抑菌圈直径29mm的金黄色葡萄球菌待测菌按照纸片扩散法操作步骤，10U青霉素纸片352C孵育1618h,如纸片边缘界限清晰（cliff现象）为内酰胺酶阳性,否则为阴性。（2）青霉素MICO.12gml或抑菌圈直径229mm的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌以头抱硝喂吩纸片刮取MH或血平板孵育1618h后青霉素或头抱西丁纸片边

8、缘菌落，室温1小时或遵循产品说明书，出现红色/粉红色为B-内酰胺酶阳性。当金黄色葡萄球菌头泡硝喂吩试验阴性时，需经青霉素纸片边缘试验确证其是否为产-内酰胺酶菌株。2、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌以头泡硝嘎吩纸片刮取352C孵育的HTM平板（流感嗜血杆菌）或35孵育20-24h后MH平板（卡他莫拉菌）上的菌落，红色/粉红色为匕内酰胺酶阳性。（六）克林霉素诱导性耐药试验1、葡萄球菌属按照纸片扩散法操作步骤，将0.5麦氏浊度待测菌接种于MH平板，15g红霉素纸片和2g克林霉素纸片边缘相距1526mm,352C孵育1618h,与红霉素相邻侧抑菌圈出现“截平”（D形抑菌圈）或克林霉素抑菌圈内有薄雾状生长时为

9、阳性，应报告克林霉素耐药；或将0.5麦氏浊度待测菌接种于含4gml红霉素和0.5gml克林霉素的阳离子调节MH肉汤（CAMHB）,352C孵育1824h,任何生长为阳性，应报告克林霉素耐药。2、肺炎链球菌和溶血链球菌按照纸片扩散法操作步骤，将0.5麦氏浊度待测菌接种于含5%羊血的MH平板或胰酶大豆琼脂平板（TSA）,15g红霉素纸片和2g克林霉素纸片边缘相距12丽，352C,5%C02孵育2024h,与红霉素相邻侧抑菌圈出现“截平”（D形抑菌圈）或克林霉素抑菌圈内有薄雾状生长时为阳性，应报告克林霉素耐药；或将0.5麦氏浊度待测菌接种于含lgml红霉素和0.5gml克林霉素的CAMHB（含2.5

10、%5%溶解马血），352C孵育2024h,任何生长为阳性，应报告克林霉素耐药。（七）碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌以纸片扩散法检测肠杆菌科细菌对碳青霉烯类敏感性时，若抑菌圈直径在中介或耐药范围，需使用MIC法进行确认，亚胺培南/美罗培南折点为llnl敏感，4gml耐药；厄他培南折点为0.5kml敏感，2gml耐药。六、目标药物我国幅员广阔，各医疗机构用药习惯不同，同一种细菌药敏试验所选择的药物不尽相同。为使耐药监测结果能有效应用于抗菌药物临床使用及管理，下表斜体加粗的抗菌药物为各种属细菌必须监测的药物，其它为建议监测药物。除必须监测的药物外，其它监测药物由各医疗机构微生物学、药学、感染病学专家讨论

11、，遵循以下原则确定：（一）参照国际、行业要求，并根据标准每年度更新（应至少遵循上一年度的标准）；（二）根据各种属细菌特点，选择相应药物进行药敏试验。尽量包括本医院临床有效的常用抗菌药物，适当选择临床少用但使用价值高的药物;（三）根据耐药监测结果调整监测药物种类。表：全国细菌耐药监测网监测药物细菌名称监测药物（料体物/者为必须监测药物）青霉素、头袍西丁（或苯嘎西林*）、庆大霉素、阿米卡星、红素、克林霉素、左氧氟沙星（或环丙沙星）、万古霉素*、替方葡萄球菌属拉宁、利奈嘎胺、SMZco,利福平、替加环素XK吠喃妥因（/标本）分离自脑脊液的肺炎链球菌:青霉素*、万古簟素、阿莫西林/克拉维酸、头泡吠辛求

12、、头跑R提*（或头跑嘎的*）、美罗培南*肺炎链球菌分离自脑脊液以外的肺炎链球菌:青霉素*（或苯嗖西林纸片）、红霉素、克林霉素、左氧氟沙（或莫西沙星）、万古霉素、SMZc。、阿莫西林/克拉维酸、头吠辛*、头抱曲松*（或头抱喂肠*）、美罗培南*红霉素、克林霉素、青霉素（或氨羊西林）、头抱曲松（或头溶血链球菌群嘎的、头抱此照）、万古霉素、左氧氟沙星青霉素*（或氨苇西林*）、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、草绿色链球菌群古霉素、头抱曲松（或头抱嘎的、头抱此眄）肠球菌属青霉素（或氨苇西林）、庆大霉素（高浓度）或链霉素（高浓度.左氧氟沙星（或莫西沙星）、万古霉素、替考拉宁、利福平、利流感嗜血杆菌和副流感嗜血

13、杆菌嘎胺、米诺环素、吠喃妥因（尿标本）氨苇西林、氨节西林/舒巴坦、头抱吠辛（或头抱克罗）、头狗t松（或头匏嘎丽）、左氧氟沙星（或莫西沙星）、SMZco.阿奇素肠杆菌科细菌（大氨苇西林、头胞嘎林、氨芾西林/舒巴坦、头跑味辛、头抱西口肠埃希菌、克雷伯头跑曲松（或头袍嚷的）、头跑他哽、头泡哌酮、头泡哌酮/4菌属、变形杆菌巴坦、哌拉西林/他嗖巴坦、头胞毗丽、亚胺培南（或美罗培南,属、肠杆菌属、枸庆大霉素（或妥布霉素）、阿米卡星、左氧氟沙星（或环丙沙星,檬酸杆菌、沙雷菌SMZco、替加环素XK吠喃妥因（尿标本）属等）肠杆菌科细菌（志贺菌属、沙门菌氨苇西林、头袍曲松（或头袍嘎的）*、左氧氟沙星、SMZco

14、.氯霉素标属）铜绿假单胞菌不动杆菌属哌拉西林、哌拉西林/他嘎巴坦、头跑他唳、氨曲南、头抱哌四舒巴坦、头跑此丽、亚胺培南（或美罗培南）、庆大霉素（或布霉素）、阿米卡星、左氧氟沙星（或环丙沙星）、多黏菌素氨苇西林/舒巴坦、哌拉西林/他嗖巴坦、头狗他唳、头抱哌酿舒巴坦、头胞嗽胎、亚胺培南（或美罗培南、多尼培南）、庆,霉素（或妥布霉素）、阿米卡星、左氧氟沙星（或环丙沙星）多黏菌素*、米诺环素、替加环素W嗜麦芽窄食单胞左氧氟沙星、SMZco.米诺环素、头抱他唳*、氯霉素/洋葱伯克霍尔德菌其他非肠杆菌科细菌*头跑他嗯、SMZco,美罗培南、左氧氟沙星*、米诺环素、氯霉哌拉西林、头跑他喔、氨曲南、亚胺培南（或美罗培南）、哌西林/他哇巴坦（或替卡西林/克拉维酸）、庆大霉素（或妥布点人阿米卡星、左氧氟沙星（或环丙沙星）、SMZco淋病奈瑟菌头抱曲松（或头抱克的）、四环素、环丙沙星、青霉素、头泡辛、大观霉素注释：“X”表示纸片法或MIC法均可用于伪中间葡萄球菌苯嗖西林