鸡肉中硝基呋喃代谢物测定的不确定度评定.docx

《鸡肉中硝基呋喃代谢物测定的不确定度评定.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《鸡肉中硝基呋喃代谢物测定的不确定度评定.docx（9页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、高效液相色谱串联质谱法测定鸡肉中硝基陕喃代谢物的残留量一、目的用高效液相色谱串联质谱法测定鸡肉中硝基吠喃代谢物的残留量。采用国家标准GB/T21311-2007所规定的测定程序二、测量程序框图三、测量结果计算鸡肉中硝基吠喃代谢物的残留量X可表示为X=-m式中：C-样品溶液中硝基吠喃代谢物的浓度；m称样量。四、技术规定国家标准GB/T21311-2007规定了完整的测量程序。其有关规定大致如下。1 .仪器和试剂的技术指标(1) 0.2mo1/1盐酸溶液：用水将17m1浓盐酸稀释到11o(2) 2.0mo11氢氧化钠溶液：用水将80g氢氧化钠溶解并定容至11。(3) 0.1mo1/1邻硝基本甲醛溶

2、液：用甲醇将1.5g邻硝基本甲醛溶解并定容至0.11。(4) 03mo1/1磷酸钾溶液：用水将79.893g三水磷酸钾溶解并定容至IU(5) 0.1%甲酸水溶液(含5mMo11乙酸镂)；量取Im1甲酸和0.0386g乙酸钺，用水溶解定容至IU(6)标准储备液:分别称取适量标准品(精确至0.00OIg)用乙懵溶解,配成浓度为IOomg/m1的标准储备液。(7)混合标准1级中间液：分别取标准储备液Im1于IOOm1容量瓶中，用乙晴定容至刻度，即为Img/m1混合标准1级中间液。(8)混合标准2级中间液：取混合标准1级中间液标准储备液Im1于IOOm1容量瓶中，用乙精定容至刻度。即为0.01mgm1

3、混合标准2级中间液。(9)混合标准内标液：乙懵溶液中四种内标浓度为0.02mgm1.(10)试验用定量仪器均计量合格。(11)要求高效液相色谱串联质谱的检出限为：0.5ngm1.2 .程序(1)样品的制备：将样品用组织捣碎机充分捣碎，装入洁净容器，4冷藏避光保存。(2)水解与衍生化：称取2g(精确至0.0Ig)样品于50m1朔料离心管中，力口入5m10.2mo1/1盐酸溶液，再加入0.02mg/m1混合标准内标液0.1m1,0.1mo1/1邻硝基本甲醛溶液0.05m1,涡旋混合均匀，加盖，于60振荡避光衍生16h.(3)提取与净化：将衍生后的样品取出冷却至室温，加)入05m10.3mo11磷酸

4、钾溶液，用2.0mo1/1氢氧化钠溶液调pH7.4(0.2),加入5m1乙酸乙酯，振荡提取20min,1OOOOrZmin离心2min。收集乙酸乙酯层，再用5m1乙酸乙酯重复提取一次，合并乙酸乙酯层于40N2吹干，残渣用Im1起始流动相定容，并加入5m1乙精饱和正己烷，涡旋混合均匀，静置分层，下层过微孔滤膜后供仪器测定。(4)混合标准溶液的制备：按最终浓度为0,1,2,3,5,10ngm1计算分别向六个离心管中加入相应量的标准品，除不加样品外，均按(2)(3)操作处理。(5)计算样品中硝基吠喃代谢物的含量。五、不确定度来源和数学模型由于本测定规定采用国家标准GBf21311-2007给出的经验

5、方法来测量鸡肉中硝基吠喃代谢物的残留量。顾不考虑该方法本身的误差。因此在测量不确定度评定中只考虑与实验操作有关的的不确定度分量。样品溶液中硝基吠喃代谢物的浓度c用高效液相色谱串联质谱进行测量，其计算公式为式中：A1-高效液相色谱串联质谱测得的硝基吠喃代谢物定量离子的峰面积;A2-一高效液相色谱串联质谱测得的内标化合物离子的峰面积；B0-一校正曲线的截距;CS-内标浓度；Bi-一校正曲线的斜率。鸡肉中硝基吠喃代谢物的残留量X,其计算公式为式中：f1enp.一.水解衍生温度对测量结果的影响所引入的修正因子;fiime水解衍生时间对测量结果的影响所引入的修正因子;fm-由于标准物质称量的影响所引入的

6、修正因子；fs.一由于标准物质的不确定度引入的修正因子；fvo1ume1-由于标准液定容体积的影响引入的修正因子；RoIUme2由于加入混合标准内标液的体积的影响引入的修正因子。六、不确定度分量(1)样品溶液中硝基味喃代谢物的浓度C液相色谱串联质谱仪上测量的峰面积与内标化合物的比值,然后由校准曲线计算硝基吠喃代谢物的浓度C及其标准不确定度(C)配制出浓度分别为0,123,5,IOngZm1的五个校准标准溶液，各测量1次，共计6次,采用最小二乘法拟合校准曲线时,表一测量数据标准物质浓度ng/m1定量离子峰面积A1内标峰面积A2浓度2ngm1RESPONSE200807.38501273.4126

7、02.5570.9082624.944689.8321.8123994.857642.4873.09751734312665.7745.210103815.883721.01210.584拟合校准曲线的方程为:AS=b,c+B0A?BI=1o5347,Bo=-0.102518nSxx=(ci-c)i=1S=67.45测量的实验标准偏差为S(C)之牛f)2I=IA?n-2(:0.102518-1.05347*0)2+(-:0.102518-1.05347*1O)2+778.012602.557(1.812-0.102518-1.05347*2.0)2+(3.097-0.102518-1.0534

8、7*3.0)2+S(C)=6-2S(c)=0.1378“、S(C)U(C)F对被测样品测量一次，即P=1。测得样品溶液的浓度CO=1Ongm1(c)=01378I11(1.0-3.5)21.05347H+6+67.45=0.1367向(Co)=咨2=0.1367=0/367(2)质量a)样品称量引入的不确定度b)样品称样量为：2.00g,根据所给出的质量允许差Ay=0.5mg,其置信水平p=99%,属矩形分布，包含因子k=3。不确定度为：/(6)=?=?警=2.887Tg相对标准不确定度：(M=必应=166=8.335IO-5m2.00b)标准物质称量引入的不确定度标准物质称取量为：0.010

9、g,根据所给出的质量允许差Ay=O.5mg,其置信水平p=99%,属正态分布，包含因子k=3。不确定度为：u2(m)=0.1667mgk3(5.210-0.102518-1.05347*5.0)2+(10.584一一0.102518-1.05347*10.0)2相对标准不确定度：*2(加)=49=结出=0.01667m10而(M=JreJ(m)+也?2(M_0.01667(3)标准物质引入的不确定度评定根据标准物质证书提供的信息，硝基映喃代谢物的不确定度是1%。一般认为，标准物质给出的是扩展不确定度，属正态分布，包含因子k=3,其相对不确定度为：-S)=等=学=0.003333(4)体积a)标

10、准溶液定容引入的不确定度a.1容量瓶校准IOOm1容量瓶校准结果的不确定度为1%(k=2),Utre1(V)=0.0005K乙a.2温度容量瓶是在20C下进行的校准，而在实验室室内温度在4范围内变动。温度变动对体积测量的影响可以通过体积膨胀系数来进行计算。由于溶液的体积膨胀系数明显大于容量瓶容积的膨胀，因此只考虑前者的影响。水的体积膨胀系数为2.1104c/于是对体积测量所引入的不确定度分两为八八1(X)12.11O44ru(V)=尸=0.05z13a.3稀释溶液时将体积增加到容量瓶刻度时得得不确定度将溶液体积稀释到所需标准体积的重复性可以通过实验测量得到。对典型的IOOm1容量瓶反复充满10

11、次并进行称量，得到实验标准差为002m1,于是引入的标准不确定度分量为()25=-U1-j=U3(V)u3(V)=0.02m1将三个分量合成，得到体积测量的不确定度分量为u(V)=y3ui(V)2+3u2(V)2+3u3(V)2M(V)=0.06245w(V)=0.0006245re,100两次吸取引入的不确定度b)加入内标液时由移液器引入的不确定度加入内标液时由移液器引入的不确定度可以通过实验测量得到。对于1001移液器反复吸取10次并进行称量，表二称量结果次数12345678910称量值99.898.9100.299.499.599.199.799.599.699.7得到实验标准差为0.1

12、316U1,于是引入的标准不确定度分量为SU)2J=I=u(Y)Vn-u(Y)=0.1316皿u(Y)Urv1(Y)=0.001316M100(4)衍生时间与温度引入的不确定度忽略。七、不确定度分量汇总表表三测量不确定度汇总表序号来源数值标准不确定度U（X）相度标准不确定度Ure1（X）IC硝基吠喃代谢物的质量浓度1ng/m10.13670.13672m称样量2.g0.1667mg8.3351053m2标准物质称取量0.010g0.1667mg0.016674fe标准物质的影响10.003333().0033335V标准溶液定容体积IOOm10.06245m10.00062456Y内标液加入量

13、IOOP10.131610.0013167fiime衍生时间的影响1008Uemp衍生温度的影响100八、合成标准不确定度合成标准不确定度UCre1(X)为J(X)=y12re(c)+ui(mJ+ui(m2)+U2re(fs)+U2re(V)+U2rv1(Y)+U2re(ftime)+U2re1(f,en)_0.1362+(8.335105)2+0.016672+0.00333320.00062452+0.0013162+O2+O2=0.1371而硝基吠喃代谢物的残留量X为X=-=0.5gkgin2最后得Mc(X)=uceri(X)X=0.1371.5gkg=0.06855九、扩展不确定度取包含因子k=2,则扩展不确定度U(X)=Z(X)=2x0.06855=0.1371/gkg十、不确定度报告按照国标GB/T213U-2007所规定的测量程序，被测样品中硝基味喃代谢物的残留量为0.5gkgo其扩展不确定度U(X)=O.1371ug/kg。它是由标准不确定度UCIV1(X)和包含因子k=2的乘积得到的。