2023年公猪精液品质实验室检查工作程序.docx

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1、2023年公猪精液品质实验室检查工作程序1 .打开电源:打开水浴锅、光密度仪、采精杯预热橱、电子称、和显微镜的电源开关。2 .摇匀贮精: 将贮存在精液贮存箱中的精液瓶轻柔摇动,使之悬浮均匀(早晚各一次)。 清点并记录贮存精液的种类和数目。 同时检查并注意保持贮存箱的温度在1618C0(低于15C会损害精子)3 .检查贮精质量:用毛细管吸取待检精液置于温度为37水浴锅中20分钟。在400倍显微镜下评估贮存精子的质量,活力不得低于60%、形态异常率不得高于15%,判定使用与否并作记录。4 .配制稀释液: 根据当时的精液稀释配制计划,称取一定量的蒸馈水,放入37C的水浴锅中预热(每头次输精剂量为85

2、95M1,至少为70M1)。 将稀释剂按1:1与蒸储水充分混匀,放入37C水浴锅中加热。 稀释液配制好后30分钟至24小时内使用。5 .采精前的准备: 先备采精杯放入预热橱。 预热盖玻片、载玻片到37C,预热稀释液到37。将光密度仪调至待读状态。 查看公猪使用记录表,结合配种计划要求,确定可使用公猪及需稀释的头份。 公猪每周采精一次,不得多于二次,纯繁时需查看公、母猪系谱,防止近交。6 .采精: 准备温水和干毛巾。 根据公猪体高将假台畜调至适当高度。 将采精公猪赶入采精栏。 用温水洗净公猪下身,并用毛巾擦干。 将手洗净擦干,戴上采精专用手套。 诱使公猪爬上假台畜。 待其将尿液和包皮积液排净后,

3、用手握成空拳导入阴茎,让其抽动数次后,用手锁住阴茎头,顺势拉出。 待其射精后,弃掉开始部分的胶体和清亮的副性腺液,收集富含精子的部分。 公猪射精时间一般为575分钟,在没有结束射精时,不要放开采精的手。7 .原精的处理: 采精后去掉采精杯上的滤纸和黏液,注意避免杂物掉入精液,插入干净的温度计,测量精液的温度并作记录。 IOO倍显微镜下给精子活力评分,不得低于2,否则弃之不用。 用移液枪吸取定量原精,完全注入已用定量参比液调零的比色杯中混匀, 测定“OD”值,通过专用的“OD”值与密度值转换表,查到精子密度,作记录。 电子称上量精液的净重,得到所采精液的体积,作记录。 鲜精镜检应在精液采用后10

4、15分钟进行,注意避免阳光直射。8 .精液的稀释: 计算可稀释头份=体积(M1)X浓度(10/M1)X精子活率400 根据计划稀释头份计算稀释液用量和精液需要量,并在电子称上称取所需体积的稀释液(每份分装体积为8595M1)0 调整稀释液的温度使其与原精温度相差不超过1C。 将所需体积的精液与稀释液混合均匀。 镜检稀释后精子的活力不得低于60%,精子形态异常率不得低于15%,否则不可用。9 .包装与贮存: 用吸耳球将稀释的精液吸入虹吸导管并弃掉开始部分液体。 分装需缓慢进行并注意注入精液瓶的精液量和瓶盖的质量。 在瓶身写上公猪耳号和采精日期。 分装好的精液待其逐步冷却至室温后放入17C精液专用

5、保温箱贮存。10 .工作记录:填写公猪使用记录表和公猪使用记录卡。填写采精记录表内容包括采精日期、采精者姓名、公猪耳号、收集类型(部分或全部)、采精量、采精质量和备注(公猪健康状况和性欲等)。11 .设备仪器的清洗及保养:及时清洗精液配制过程中使用的析具和仪器,并用蒸储水过滤,将废物、废液及时处理,注意避免清洗剂与精液配制用具接触,注意保持实验室干燥与卫生。精液品质检查八密度:密度是指精液中所含精子的密集程度。由于精液中所含精子数不同,精子密度也有差异。检查精子密度的方法是取精液一滴在干净的凹波片上,在显微镜下与活力同时检查。检查时应注意勿使显微镜的物镜接触到精液。一般将精液的密度分为密、中、

6、稀3级。密:表示精液中精子稠密,数量很多,充满着整个视野,精子间的距离不能容纳一个精子的长度。由于精子之间彼此靠得很紧,所以很难看到单个精子的活动情形。中:表示精液中含有中等密度的精子,精子分散在整个视野的各部分,精子之间的距离可容纳12个精子,单个精子的活动情形看到得很清楚。稀:表示精液中精子稀薄,数量很少,很疏地散布在视野各处,精子之间的距离很大。2、活动力:精子的活动力是表示精液品质的重要指标之一,它与温度有密切关系。检查活动力最好在3738摄氏度时进行,温度过高精子活动过剧,很快死亡;检查精子活动力时,取12滴精液滴在凹玻片上,放在显微镜下放大100200倍观察精子的活动情况。精子的活动方式大致有前进、旋转、摆动3种。精子呈直线前进,称为前进式活动;精子的活动沿圆周形边缘旋转,称为旋转式活动;精子活动时不改变位置,而是不断在原地摆动,称为摆动式活动。精子活动力的等级是根据精液中呈直线前进式活动的精子的多少来评定的,评定一般分为5级;4级精子中有5分之4呈前进式活动。3级精子中有5分之3呈前进式活动。2级精子中有5分之2呈前进式活动。1级精子中有5分之1呈前进式活动。当精液中没有呈直线前进式活动的精子时用“0”来表示。为保证配种的高受胎率,精子活动力必须在“3”以上才能使用。

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