转录因子1AP1ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本体液.docx

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1、转录因子I(AP-I)E1ISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标木：体液转录因子I(AP-I)E1ISA试剂盒状验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(E11SA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子E1ISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。转录因子I(AP-I)E1ISA试剂盒自备材料1 .蒸储水。2 .加样器：5ukIoUI、50ukWOu

2、k200、500uk10OOuI3 .振荡器及磁力搅拌器等。安全性1 .避免直接接触终止液和底物A、一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2 .实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3 .不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。转录因子I(AP-I)E1ISA试剂盒操作注意事项1 .试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2 .实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3 .不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4 .使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5 .使用干净的塑料容器配置洗涤液

3、。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6 .洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7 .底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8 .加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9 .按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。转录因子1(AP1)E1ISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-一操作过程中避免任何细胞剌激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-EDTA,柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。IOOO

4、Xg离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液一IooOXg离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存一一如果样品不立即使用，应将其分成小部分70C保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50)的稀释：蒸储水50倍稀释。转录因子I(AP-I)E1ISA试剂盒操作步骤1 .使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2 .根据待测样

5、品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3 .加入稀释好后的标准品50U1于反应孔、加入待测样品50U1于反应孔内。立即加入50U1的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37C温育1小时。4 .甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5 .每孔加入80U1的亲和链酶素HRP,轻轻振荡混匀，37C温育30分钟。6 .甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加次

6、。7 .每孔加入底物A、B各50u1,轻轻振荡混匀，37温育10分钟。避免光照。8 .取出酶标板，迅速加入50U1终止液，加入终止液后应立即测定结果。9 .在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。转录因子1(AP1)E1ISA试剂盒性能1 .灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.9902 .特异性：不与其它细胞因子反应。3 .重复性：板内、板间变异系数均小于10%。转录因子I(AP-I)E11SA试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长45Onrn的醉标仪上读取各孔的OD值2、

7、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线，样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800pgm14、敏感度：1.0pg/m1Dyn人强啡肽规格：48T/96T1MP-1人潜伏膜蛋白1规格：48T/96TPro-ANP人前心钠肽规格：48T/96TPro-ANP人前心钠肽规格：48T/96TPSA人前列腺特异性抗原规格:48T/96TPAP人前列腺酸性磷酸前规格：48T/96TPGF人前列腺素F规格：48T/96TPGE2人前列腺素E2规格：48T/96TPGE1人前列腺素E1规格：48T/96TPTGDS人前列腺素D合成酶规格：48T/96TPGDS人前列腺素D合成酶规格：48T/96TPGI人前列环素规格：48T/96TPCP人前胶原C端肽酶规格：48T/96TPA人前白蛋白规格：48T/96T48T/96TCA11A人普通急性淋巴细胞白血病抗原规格：G1UT3人葡萄糖转运蛋白3规格：48T/96TG1UT1人葡萄糖转运蛋白1规格：48T/96TGIP人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽规格:48T/96T