尿中硫氰酸盐的吡啶巴比妥分光光度法.docx

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1、尿中硫氧酸盐的叱喷巴比妥分光光度法1 ,原理微酸性条件下,尿中硫氟酸盐和氯胺T反应生成氯化氟。它使叱哽环裂开，产生戊烯二醛。戊烯二醛于巴比妥酸作用，生成紫红色染料，其色度与硫氟酸盐含量成正比，在580nm波长处比色定量。2 .仪器2. 1聚盖聚乙烯塑料瓶，500m1o2. 2尿比重计。2.3 具塞比色管,IOm1o2.4 分光光度计。3.试剂实验用水为蒸储水。3. 1盐酸溶液，1+3o3.2磷酸盐缓冲液（PH=7）：溶解2.79g磷酸二氢钾和4. 14g磷酸氢二钠于少量水中，并稀释至11。1.3 氯胺T溶液,10g1o1.4 叱唳一巴比妥酸溶液：溶解O.18g巴比妥酸于3m1叱党及IOm1盐酸

2、溶液中，用水稀释至IOOm1（临用前配置）。1.5 硫氟酸盐标准溶液：准确称取01673g已烘干的硫氟酸钾（KSCN）,溶于少量水中，定量转移入IoOmI容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液1OnIg/m1硫氟酸盐标准储备液。存放普通冰箱中，可使用1个月。临用前，用水分别稀释为100ugm1标准溶液(A)和2.0gUg1标准溶液(B)o4 .样品的采集、运输和保存用具盖聚乙烯塑料瓶采集班后尿，摇匀，尽快测量比重。于4h内测定完毕。5 .分析步骤1.1 1样品处理：吸取0.Ind新鲜尿液样于具塞比色管中，供测定。1.2 标准曲线的绘制：取7个具塞比色管，分别加入0、0、0.2、0.5、1.0、1.5、

3、2.Om1标准溶液(A),第1管除外,各管加0.IOm1正常人混合尿,配置成0、0、0.2、0.5、10、15、2.Oug硫氟酸盐标准系列。各管加入2nd叱唳一巴比妥酸溶液，混匀，于室温(室温低于25。C时，置于25。C恒温箱中)放置20min,加水至5m1,混匀。于58Onm波长处,用IOnn1比色杯，以第一管为参比，测量吸光度。以硫酸氢盐的含量(Ug)对相应吸光度绘制标准曲线。1.3 样品测定：用测定标准系列的操作条件，测定样品溶液。由标准曲线得硫氟酸盐的含量(ug)。6 .计算按式(9-42)计算尿中硫氟酸盐的浓度：C=mVk(9-42)线得硫氟酸盐的含量，Ug;V分析时所用的尿样体积,

4、m1；k尿样换算成标准比重下浓度的校正系数。7 .说明7.1本法的最低检测浓度为Img1（按取O.Im1尿样计）；测定范围为0.1-2.0g;相对标准偏差为3.25%-6.73%（硫氟酸盐的含量为02-2.0ug,n=6）；尿样加标回收率为97.1%-99.8%（加标量为0.2、0.5、1Oug,n=6）o7.2显色温度应保持在25。C以上。叱哽-巴比妥酸溶液应于临用前配置，放置时间长会影响吸光度。氟化物进入人体后，大部分与体内的硫结合为硫氟酸盐，从尿中排除，一小部分仍以CN的形式排除。CN也同样显色，故测出的结果是CN一和SCN-的总量。7.3本法由广东省职业病防治院周素华等同志研制。标准编号为WS/T39-1996o