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1、7300定时定量PCR仪操作规范1、目的规范操作,正确使用仪器,保证检验结果准确无误。2、适用范围适用于7300定时定量PCR仪的使用与维护3、职责科室负责人:负责监督仪器的使用和维护。操作人员:按规范操作,搞好日常维护,做好使用记录。保管人员:负责仪器定期维护,保养。4、操作程序4.1开电脑4.2开机4. 3开软件4.3. 1方FiIe(文件)中的新建4.3.2从Assay(实验)下拉列表中,选择AbSO1UteQuantifiction(StandardCUeVe)(绝对定量,标准曲线),然后单击Next。4.3.3新建探针,将探针添加到反应板文件中,然后单击Next。4.3.4为每个孔指
2、定探针和任务,然后单击Finisho4.4在We11InSPeCtor(反应孔设定)窗口(依次选择VieW(视图)We11InSPeCtOr(反应孔设定)中,输入样本名。4.5设置反应循环(应用AB公司试剂则可以不改,其他的按试剂盒说明书进行修改)4.6开始绝对定量(AQ)程序。4.6.1选择InStrUment(仪器)选项卡。默认情况下,显示两步法反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法中PCR步骤的标准PCR条件。4.6.2选择FiIe(文件)SaveAs(另存为),输入绝对定量反应板文件名,然后单击Save(保存)。4.6.3将反应板装入仪器中。4.6.4单击Start(开始)。4.6.
3、5采集数据。4.7分析绝对定量数据4.7.1择Ana1ySiS(分析)Ana1ysisSettings(分析设置)以设置分析参数。使用AutoCt(自动Ct)选项。4.7.2单击OK&Reana1ySiS(确定并再次分析),或选择AnaIySiS(分析)AnaIyZe(执行分析)以再次分析数据。4.7.3如果有必要,手动调整基线和阈值。4.7.4单击OK&Reana1ySiS(确定并再次分析),或选择Ana1ySiS(分析)AnaIyZe(执行分析)以再次分析数据。4.4.5查看分析结果。4.8注意事项移动和抬起仪器时只能由适用的场地准备指南中所规定的专业人员或代理机构指派的合格人员进行移动或定位。