血清总蛋白液体TP双缩脲法测定方法.docx

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1、血清总蛋白液体(TP)双缩版法测定方法1 .实验原理双缩胭比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。OH-蛋白质+Cu2+紫红色复合物2 .标本采集2. 1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2类型：血清或血浆。3.标本存放2025。C保存可稳定6天；48C保存可稳定4周；-20C保存至少可稳定1年。4 .标本运输室温条件下运输5 .标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6 .实验材料：6.1上海申能总蛋白测定试剂盒货号：14223171701试剂1+试剂6.1.1试剂组成试剂1(R1)：664m1氢氧化钠80mmo1/1酒石酸钾

2、钠12.8mmo1/1试剂2(R2)：616m1氢氧化钠100mmo1/1酒石酸钾钠16mmo1/1碘化钾15mmo1/1硫酸铜6mmo1/16.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225,若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6 .2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCa1U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质

3、控品SOP文件。7 .3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。8 .仪器：奥林巴斯AUIooO生化分析仪9 .操作步骤8 .1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AinOOO生化分析仪项目测定参数.SOP文件9 .2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1OOO生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11 .计算方法：以TrUCa1U复合校准品总蛋白校准值或标准品标准值校准仪

4、器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/1报告。12.参考值范围g/1成人：66-88儿童/青少男女年：130天4262416316个月446647676个月1岁567955701-18岁57-8057-80（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义：总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。14 .操作性能14. 1线性范围：0.5150

5、g114.2 精密度：重复性的评估是根据NCC1S推荐的标准方法，AU1OOO批内重复性小于3%,总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCC1S的规则。批内精密度n=20X(g1)S(g1)CV(%)天间精密度n=20X(g1)S(g1)CV(%)样品152.70.50.91样品152.40.61.06样品270.50.71.01样品270.71.11.53样品3.1040.80.80样品31041.41.3214.3 方法学比较：本公司的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x）,同时对68个样品进行TP检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00-0.7g/1；

6、r=0.997014.4灵敏度：本试剂的检测限为0.5g/1。14 .5病人结果可报告范围0150g1,如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。15 .超出范围结果处理：本法线性上限为150g1如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2o16 .病危报警值的处理无。17 .方法局限性17 .1本法线性上限为150g10如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。18 .2干扰物质：静脉滴注大量右旋糖醉的病人血清或血浆，使用双缩胭方法的检测结果会明显增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度1704mo11,胆红素浓度684mo11,血红蛋白浓度5.00g1,甘油三酯浓度11.3mmo11时没有观察到干扰18 .补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19 .其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。