动物细胞工程试题及详解[1].docx

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1、动物细胞工程试题1用动、植物成体的体细胞进行离体培育，下列叙述正确的是(C)A都须用液体培育基B都需用培育箱C都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性解析：动物细胞离体培育主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培育体现的是全能性。植物体细胞是固体培育基。动物体细胞培育须要二氧化碳培育箱。动物细胞培育：1、动物细胞的培育：动物细胞培育就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培育基中，让这些细胞生长和繁殖。2、动物细胞培育液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。3、动物细胞培育液的特点：液体培育基含动物血清。4、动物细胞培育须要满足以下条件(1)足够

2、的养分供应一一微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。(2)适宜的温度:36.5oC0.5；适宜的P的7.27.4。无菌、无毒的环境：培育液应进行无菌处理。通常还要在培育液中添加确定量的抗生素，以防培育过程中的污染。此外，应定期更换培育液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（4）气体环境：95%空气+5%CO2。2是细胞代谢所必需的，CO?的主要作用是维持培育液的pHo5、动物细胞培育的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）一剪碎一用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞f制成细胞悬液f转入培育瓶中进行原代培育f贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个

3、细胞接着传代培育。2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D）A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）.B正确去除植物细胞壁须要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞须要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。

4、D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M,甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是NMo3制备单克隆抗体所接受的细胞工程技术包括（A）细胞培育细胞融合胚胎移植细胞核移植A.B.C.D.解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培育获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D）A.用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培育单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C.将

5、等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者解析：A错误一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分别出的抗体产量低、纯度低、特异性差；B错误单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的，杂交瘤细胞是由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的；C错误制备单克隆抗体过程中的筛选：筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以与BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培育基淘汰，筛选出B瘤融合的细胞。筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培育用相应抗原检测的方法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有

6、很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。5用动物细胞工程技术获得单克隆抗体，下列试验步骤中错误的是()A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C.用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培育后提取单克隆抗体解析：动物细胞没有细胞壁，所以不须要纤维素酶去除细胞壁6某探讨小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培育细胞的毒性。供培育的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培育的问题：将数量相等的甲细胞和乙

7、细胞分别置于培育瓶中培育，培育液与其他培育条件均相同。一段时间后，视察到甲细胞数量比乙细胞数量多O(2)在动物细胞培育时，通常在合成培育基中加入适量血清，其缘由是血清可以补充合成培育基中缺乏的物质o细胞培育应在含5%的CO?的恒温培育箱中进行，CO?的作用是维持培育液PHo(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长停止o药物试验须要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更多o若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶消化处理。(4)为了防止细胞培育过程中细菌的污染，可向培育液中加入适量的抗生素o(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿

8、瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培育液中加入_丫，B组细胞培育液中加入无菌生理盐水，经培育后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_mRNA_或蛋白质合成水平的差异，确定Y的药效。7回答下列有关细胞培育的问题在动物细胞培育过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制O此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层o要使贴壁的细胞从瓶壁上分别下来，须要用酶处理，可用的酶是胰蛋白酶。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现苍老甚至死亡现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传

9、物质发生变更而变成不死性细胞，该种细胞的黏着性降低细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量削减O现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，视察到死细胞被染色，而活细胞不染色，缘由是_由于死细胞膜丢失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色O(4)检查某种毒物是否能变更细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜进行视察。(5)在细胞培育过程中，通常在超低温条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低。给患者移植经细胞培育形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击。8如图所示为单克隆抗体制备过程示意图。(D淋巴细胞能与骨髓瘤细

10、胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜具有确定的流淌性。此过程，常用聚乙二醇作为诱导剂，杂交瘤细胞繁殖进行的是有丝分裂。该细胞的特点(遗传性状)是既能大量增殖又能产生特异性抗体(2)筛选出杂交瘤细胞的方法是培育液中加入氨基蝶吟，收集增殖的细胞O(3)杂交瘤细胞的体外培育与植物组织培育的培育基相比有何主要不同？_液体培育基含有葡萄糖和动物血清O(4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了抗原与抗体之间结合的高度特异性(5)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培育

11、两大技术。9现有甲、乙两种可能有确定毒性的化学物质，试验室探讨人员欲通过动物细胞培育的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个探讨人员的身份参与此项探讨，完成下列有关问题：(1)试验原理：有毒物质能诱导细胞产生染色体变异o依据这种变异细胞占全部培育细胞的百分数(以下称Q值)，可推断该化学物质的毒性。材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培育液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸储水、滴管、培育皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。试验步骤：I.制备细胞悬浮液。把

12、活的小白鼠胚胎放在培育皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培育液，制成细胞悬浮液。II .进行细胞培育。 .取A、B、C3个干净的培育瓶，消毒灭菌加入等量的细胞悬浮液 .向A、B两个培育瓶中分别加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸储水，摇匀； .把3个培育瓶放在37C的恒温箱中培育。III .制作临时装片。 .当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培育瓶，用胰蛋白酶液处理，加入动物细胞固定液，快速杀死细胞并固定细胞分裂相; .静置一段时间后，分别从各培育瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培育瓶有相同编号的载玻片的中心，_用适宜浓度

13、龙胆紫进行染色35min后，盖上盖玻片。IV .镜检和统计。把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，找寻处于有丝分裂中期的细胞，并与_c进行对比，统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。(4)结果分析与结论： .经探讨人员试验得知，A、B、C三个培育瓶的Q值依次为：Q=1.3%,Qif12.5%,Qc=O.1%,由此可知该试验的结论是一甲乙都是有毒性的且乙的毒性大于甲O .在试验中，C培育瓶起比照作用，C瓶的Q值说明动物细胞在正常培育状态下染色体变异频率特殊低米加绵羊白面绵去核卵细胞乳磔细触枝10下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：2

14、U脉冲剌激I早q胚监】I(Br片尊汴妊娠、出生克阵“多莉”1图乙(1)图甲和图乙所示的过程中，都必需用到的动物细胞工程技术手段是动物细胞培育细胞处理后，才能被(2)图甲中注射病原入小鼠体内后，要经过吞噬细胞免疫细胞识别。过程常在灭火的病毒诱导下完成，过程与体外培育相比，其优点是不需特定的培育基，不需严格的外界环境条件。(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_特异性o(4)图乙过程常选择MII中期的卵母细胞做受体细胞,缘由是_MII期卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和养分添加o若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？不是。缘由是一卵细胞细胞质的遗传物质也能限制某些性状O(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能_DoA.有选择地繁殖某一性别的家畜B.繁殖家畜中的优良个体C.用于保存物种D.变更动物的核基因在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分别出来的成熟的体细胞干脆培育成一个新个体，而是必需将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为缘由最可能是C。A.卵细胞大，便于操作B.卵细胞含有的养分物质多C.卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达D.重组细胞才具有全能性