C反应蛋白CRP定量测定作业指导书.docx

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1、C反应蛋白(CRP)定量测定作业指导书1 .原理CRP抗血清用缓冲液稀释后加到一份病人血清中,经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光,散射光结果和样品中的CRP浓度成正比。2 .标本采集:2.1标本采集前病人准备:受检者空腹2.2标本种类:血清或血浆2.3标本要求:采集血清标本时,取被检者静脉血。用无菌注射器抽取病人静脉血2m1,室温放置不超过2小时,分离血清备用。3 .标本储存:待测标本在2-8C存放不超过8小时,-20C不超过三个月,-70C以下长期保存。应避免反复冻融。4 .标本运输:室温运输5 .标本拒收标准:细菌污染、溶血、脂血标本不能作测定。6 .试剂6. 1试剂名称:补体C

2、3检测试剂盒6.2试剂生产厂家:XX诊断试剂公司6. 3包装规格:60Testkit6.4试剂盒组成:缓冲液30m1空白缓冲液30m1抗血清试剂0.5m1定标液0.5m1磁卡1张7.仪器设备:7. 1仪器名称:OrionTUrbOXRP1US特定蛋白分析仪7.2仪器厂家:XX集团公司7. 3仪器型号:Turboxp1us8.操作步骤:8. 1试剂配制:8. 1.1抗血清应用液准备:吸取500U1抗血清加到反应缓冲液中,轻轻混匀,应用液2-8-C可保存12个星期。8. 1.2空白缓冲液:液体待用。8. 1.3定标液:用0.9%NaC1进行1:51稀释。定标液根据IFCC提供的材料CRM470进行

3、标定。8.2 收集与处理样品:样品用0.9%NaC1进行I:51稀释。8.3 为每一份样本测定准备一份样品空白,同样,为定标液另外准备一份定标液空白。8.4 准备两份定标液测定(定标完成后,标准曲线数据存储在磁卡内。下次检测如使用同批试剂,可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息)。8. 5如下准备各比色管:定标液空白定标液测定样品空白样品测定样品定标液空白缓冲液抗血清应用液20u1500u120u1500u120u1500u120u1500u18.6 轻轻摇动混匀,室温18-25C放置305分钟。8.7 仪器测试步骤:参见TUrbOXR特定蛋白分析仪作业指导书。9. 结果计算:仪器直接读出测

4、定结果,无需计算。10. 临床意义:CRP是一种急性时相反应蛋白,在健康人中浓度很低。任何伴有侵袭性细菌感染、炎症或者组织损伤的疾病情况下,病人血清中都伴有CRP浓度的增高。CRP增高非常快速,并且在炎症开始后的6到12小时中就可检出CRP升高情况。11. 参考范围:10mg112. 质量控制:建议使用厂家提供的CRP质控液和临床标本同时检测,结果在控制范围内。13. 操作性能:快速简便、灵敏度高、重复性好、特异性高。14. 方法局限性:高脂血影响测定结果。15. 超出范围结果处理:线性测定范围:10-150mg/,如果结果超过150mg1,那么将样品用09%NaC1行1:2(1+1)稀释后再进行测定,结果乘以2。16. 其它16. 1试剂中含有0.K的叠氮钠作为保护剂,叠氮钠易和铅铜急剧化合生成易爆炸的金属叠氮化合物,因此试剂一旦有溢出须用大量的水冲去。16.2当要丢弃包括所有的实验材料和试剂时,须经121C一个小时的高压灭菌。16.3定标液中的含有来源于人血清的材料,已经测定HCV、HBSAg和HIV抗体阴性,应仍然视为传染源。

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