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1、实验三冬虫夏草、茯苓、贯众、麻黄等生药鉴别一、目的要求掌握冬虫夏草、茯苓、猪苓、贯众、麻黄的性状鉴别、显微鉴定特征及理化鉴别方法。二、仪器、用品与药品白瓷板、小勺、解剖针、酒精灯、试管、吸水纸、银子、载玻片。水合氯醛、蒸储水、5%氢氧化钾、20%氢氧化钠、碘一碘化钾试液、碘试液、碘化锁钾,碘化汞钾、2%麻黄碱酸性水溶液,2%硫酸铜试剂、10%氢氧化钠、乙醍。冬虫夏草、茯苓个、猪苓个、茯苓皮、茯苓块、茯神、猪苓片、贯众个、贯众饮片、麻黄。草麻黄(雌、雄株)腊叶标本。冬虫夏草子座横切片、绵马贯众、荚果蕨贯众、草麻黄茎横切片。茯苓、猪苓粉末、草麻黄粉末。三、实验内容与方法(一)性状鉴定1茯苓pori
2、a和猪苓po1yporus观察并比较茯苓、猪苓二者在外形,颜色、表面特征、断面颜色及质地等方面有何不同?再观察茯苓皮、赤茯苓、茯神和猪苓饮片各有何特征,如何区分?2、冬虫夏草Cordyceps注意冬虫夏草的虫体似蚕,具2030条环节,腹面有足8对,子座棕色,长圆柱形,顶端稍膨大,其内密生子囊壳(子实体)。3、观察多种贯众,注意形状、大小和叶柄断面特征。4、麻黄HerbaEphedrace:观察草麻黄的药材,并取草麻黄腊叶标本观察,注意其茎节、叶片等有何特征。再分别观察雌株与雄株,注意花序的着生位置与特征等。注意与中麻黄及木贼麻黄的区别。草麻黄EphedraSinica:少分枝,节上鳞片2片。裂
3、片呈锐三角形,顶端反卷,基部约1/2合生成筒状。木贼麻黄Eequ1setina:小枝多分枝,节上鳞片2,裂片呈钝三角形,多不反卷,基部约2/3合成鞘状。中麻黄Eintermedia:小枝多分枝,节上鳞片3,裂片三角状圆形,微反曲,基部约1/3合成或不合生。(二)显微鉴定1取茯苓粉末,用水或5%氢氧化钾装片,镜检可见:茯苓:多为无色不规则的颗粒状团块或末端圆钝的分枝状团块,菌丝细长,多无色,可见少数棕色菌丝,无草酸钙结晶。2、冬虫夏草子座横切面:子囊壳近表生,基部陷于子座内,几列?内有多数细长的子囊,注意壁的厚度、孔口;子囊抱子24个,线形,具有多数横隔。3、取绵马贯众的叶柄横切片观察:注意表皮
4、、下皮层、内皮层及束鞘细胞的特征。维管束的类型、数目及排列方式。细胞间隙大,有的间隙有单细胞间隙腺毛,呈球形或棒状,含棕色分泌物。注意:荚果蕨贯众叶柄横切有何不同。4、麻黄:取草麻黄茎横切片,置显微镜下观察可见,切面呈圆形或椭圆形,具多数棱脊,呈波状凹凸。表皮:外被厚的角质层,细胞外壁增厚,壁上有细小草酸钙砂晶.两棱线间有内陷气孔,保卫细胞切面呈三角形,内外壁均增厚木化。皮层:外侧23列细胞径向延长,似栅状,每一棱脊的表皮内侧有非木化的下皮纤维束。薄壁细胞中含草酸钙砂晶与方晶,纤维束散在。维管束:韧皮部外侧具新月形纤维束,形成层几成环,木质部三角形,木化,多少连成环,偶见麻黄式穿孔板。髓:薄壁
5、细胞中含红棕色物质,偶见环髓纤维。取麻黄粉末少许,放在载玻片的中央偏右一些,滴加水合氯醛溶液2滴,用解剖针调和均匀,在酒精灯上以小火微微加热透化(要使载玻片保持平稳,慢慢移动,且勿使液体沸),在加热过程中,要随时添加水合氮醛溶液,千万勿蒸干,加热到粉末微透明为止,待载玻片冷却后再滴加水合氯醛溶液少许,用解剖针将粉末搅匀,加上盖玻片,即可镜检,可见:表皮碎片:黄棕色,表皮细胞表面观长方形,壁上布满草酸钙砂晶,有的可见气孔。气孔:多位于表面碎片上,表面观内陷,长圆形,保卫细胞多单个,似电话筒状。皮层纤维:黄色,成束或单个散在,壁极厚,壁上布满砂晶(嵌晶纤维)。导管:多成束,多为螺纹与孔纹导管,偶见
6、麻黄式穿孔板(导管分子横壁倾斜,有数个圆形的穿孔排成13歹叽色素块:红棕色,散在,形状不规则。(三)理化鉴定1、分别取茯苓、猪苓粉末少量,置白瓷板的凹窝内,各加入碘化钾碘I2滴,放置片刻后,茯苓呈深红色,猪苓呈棕褐色(检蛰多糖);取茯苓粉末约0.1g于试管中,加水5m1,煮沸,加碘试液3滴,溶液显黄色,应不显蓝色或紫红色(检查淀粉及糊精);分别取茯苓,猪苓粉末少量,置白瓷板凹窝内,各加入适量20%氢氧化钠溶液茯苓呈粘胶状,猪苓不呈粘胶状(与茯苓区别)。2、麻黄的沉淀反应:取2%麻黄碱水溶液,在白瓷液的两个凹窝内各滴I2滴,再分别加入碘化镑钾和碘化汞钾试剂I2滴,前者产生桔黄色沉淀,后者不产生沉
7、淀。3、麻黄的双缩版反应:取2%麻黄碱酸性水溶液2m1于试管中,加入2%硫酸铜试剂数滴,再加入10%氢氧化钠至微过量(约5滴),呈紫红色,然后加入等量乙醛,轻轻振摇,放置数分钟后,醍层显紫色,水层呈蓝色。四、实验报告:(一)绘草麻黄粉末特征图,茯苓粉末特征图。(二)记录草麻黄的理医学全在线化鉴别结果。(三)记录茯苓理化鉴别的实验结果。五、思考题:(一)麻黄活性成分是什么?横切片和粉末有哪些重要鉴别特征?(二)绵马贯众的药材性状和显微特征有哪些?(三)茯苓主要含有何种成分,有何药理作用?(四)茯苓与猪苓主要区别点是什么?(五)冬虫夏草的入药部位,鉴别点是什么?何谓真菌类植物?常用真菌类生药有哪些?